【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药制剂质量控制领域，特别涉及香丹注射液中降香组分的质量控制方法。具体涉及棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法。
技术介绍
1、香丹注射液为降香饱和芳香水与丹参水提醇沉液按一定生药比配制组合而成。丹参为该制剂的君药，其酚酸类成分是香丹注射液的主要活性成分。梅超[梅超.降香对丹参的吸收动力学影响及其机制研究[d].长春中医药大学,2011]提出降香的存在可促进丹参有效成分向体内分布，降低清除率，起到协同增效作用；高珊等[高珊等.香丹注射液中降香质量考察研究[j].中国药物评价,2017,34(2):104-106.]提出如今香丹注射液的生产厂家众多，注射液中所含降香成分具有较大差异。目前颁布的关于香丹注射液的标准ws3-b-3289-98中，仅对丹参的有效成分进行限定，忽视降香成分的评价，这也使得香丹注射液中降香质量失控更为严重。为了进一步保证香丹注射液疗效的稳定性，因此有必要建立一种可用于制剂中降香质量评价的通用方法。
2、陆倩等[陆倩等.柱切换色谱法同时测定香丹注射液中水溶性成分及橙花叔醇的含量[j].中国中药杂志,2008,33(23):2776-2780]提出香丹注射液中降香组分与丹参组分含量差异悬殊，常规的分析手段难以检测到痕量降香物质群，因此制剂中降香组分检测必须采用一定富集手段。但该文献中采用柱切换色谱法对降香组分进行富集，该法有机溶剂用量高、提取时间长、提取效率和富集率低。
3、分散液液微萃取技术是在传统液液萃取基础上发展起来的一种样品前处理技术。与传统的液
技术实现思路
1、本专利技术针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法，通过分散液液微萃取-反萃取技术富集降香物质群，提取相应高效液相色谱-二极管阵列检测器(hplc-dad)分析数据形成棒状图以实现香丹注射液中降香组分的多尺度表征。
2、本专利技术提供了一种棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法，包括：样品前处理、液相分析、dad信息提取与棒状图生成、棒状图信息匹配，其中样品前处理包括分散液液微萃取-反萃取技术。
3、优选地，分散液液微萃取包括涡旋辅助分散液液微萃取。
4、进一步优选地，涡旋辅助分散液液微萃取的转速为3000-4000rpm。
5、优选地，分散液液微萃取的萃取剂体积为100-400μl。
6、优选地，分散液液微萃取的萃取剂为正烷烃。
7、进一步优选地，萃取剂为正十四烷。
8、优选地，分散液液微萃取的萃取时间为30-120s。
9、优选地，反萃取的萃取剂体积为50-200μl。
10、优选地，反萃取的萃取时间为30-120s。
11、优选地，液相分析采用高效液相色谱-二极管阵列检测器测定。
12、优选地，液相分析的色谱条件为：色谱柱为agilent zorbax sb c18(4.6mm×250mm,5.0μm)；柱温30℃；流速1.0ml·min-1；dad检测器的检测波长200-400nm；进样量10μl，采取双流动相梯度洗脱。
13、进一步优选地，双流动相为乙腈和纯水。
14、更进一步优选地，梯度洗脱程序为：0-8min，乙腈为34％，纯水为66％；8-22min，乙腈由34％线性增加到48％，纯水由66％线性减少到52％；22-30min，乙腈由48％线性增加到53％，纯水由52％线性减少到47％；30-42min，乙腈由53％线性增加到65％，纯水由47％线性减少到35％；42-50min，乙腈由65％线性增加到90％，纯水由35％线性减少到10％；50-55min，乙腈由90％线性增加到95％，纯水由10％线性减少到5％；55-66min，乙腈为95％，纯水为5％。
15、优选地，dad信息提取与棒状图生成包括如下步骤：
16、步骤(1)从高效液相色谱工作站中导出dad数据，进行最大值滤波器快速定位物质峰保留信息；
17、步骤(2)采用airpls法逐波段基线校正，基于基线与斜率信息采用宽松变换的判定方式寻找峰起始点与结束点；
18、步骤(3)对同一物质峰以起始点与结束点是否为彼此子集的方式合并，保留峰响应最大的波段信息形成棒状图。
19、优选地，棒状图信息匹配通过设定香丹注射液棒状图为基准，将其每个峰对降香供试品和丹参供试品的棒状图进行遍历匹配。
20、优选地，遍历匹配过程包括：
21、s1)通过判定待匹配样品中是否存在与基准峰相对保留时间不超过±2％的峰，若存在，分别将基准峰与待匹配峰出峰区间数据svd分解，保留95％最大主成分后重建数据；否则认为该基准峰无相应可匹配峰，开始下一个基准峰的匹配。
22、s2)分别叠加基准峰与待匹配峰出峰区间的光谱并归一化形成平均光谱；
23、s3)若两者余弦相似度＞0.97，则保存于匹配成功序列；若0.97≥余弦相似度≥0.85，则提取待匹配峰出峰区间各保留时间点光谱与基准峰平均光谱比较相似度，若此时存在相似度大于0.97的待匹配峰区间点，则也认为匹配成功，否则认为匹配失败；若余弦相似度＜0.85则判定无匹配；最后，若待匹配样品中存在两个及以上与基准峰匹配成功的峰，则取余弦相似度最大者为匹配结果。
24、与现有技术相比，本专利技术所述棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法具有以下优势：
25、(1)本专利技术所述的棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法具有强选择性富集，能够基本排除丹参组分干扰并富集降香组分；
26、(2)本专利技术所述的棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法无需特殊仪器或设备，试剂用量小，相较于现今普遍采用的传统液液微萃取作为香丹注射液前处理手段大幅缩短了前处理时间；
27、(3)本专利技术所述的棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法首次在hplc分析上发现大量降香组分峰群，以往的液相分析仅能指出个别降香峰或仅富集单个指标物质；
28、(4)本专利技术所述的棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法通过全波段信息提取能够快速掌握分析液性质，相较于传统指纹图谱能够更全面更彻底反应香丹注射液中降香组分的信息。
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1.一种棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法，其特征在于，所述方法包括：样品前处理、液相分析、DAD信息提取与棒状图生成、棒状图信息匹配；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分散液液微萃取包括涡旋辅助分散液液微萃取。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述涡旋辅助液液微萃取的转速为3000-4000rpm。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分散液液微萃取的萃取剂为正烷烃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分散液液微萃取的萃取剂体积为100-400μL，所述分散液液微萃取的萃取时间为30-120s。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反萃取的萃取剂体积为50-200μL，所述反萃取的萃取时间为30-120s。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液相分析的色谱条件为：色谱柱为Agilent ZorBax SB C18(4.6mm×250mm,5.0μm)；柱温30℃；流速1.0mL·min-1；DAD检测器的检测波长200
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述双流动相为乙腈和纯水，梯度洗脱程序为：0-8min，乙腈为34％，纯水为66％；8-22min，乙腈由34％线性增加到48％，纯水由66％线性减少到52％；22-30min，乙腈由48％线性增加到53％，纯水由52％线性减少到47％；30-42min，乙腈由53％线性增加到65％，纯水由47％线性减少到35％；42-50min，乙腈由65％线性增加到90％，纯水由35％线性减少到10％；50-55min，乙腈由90％线性增加到95％，纯水由10％线性减少到5％；55-66min，乙腈为95％，纯水为5％。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述DAD信息提取与棒状图生成包括如下步骤：
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述棒状图信息匹配通过设定香丹注射液棒状图为基准，将其每个峰对降香供试品和丹参供试品的棒状图进行遍历匹配；
...【技术特征摘要】
1.一种棒状图辅助优化香丹注射液分散液液微萃取-反萃取降香的方法，其特征在于，所述方法包括：样品前处理、液相分析、dad信息提取与棒状图生成、棒状图信息匹配；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分散液液微萃取包括涡旋辅助分散液液微萃取。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述涡旋辅助液液微萃取的转速为3000-4000rpm。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分散液液微萃取的萃取剂为正烷烃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分散液液微萃取的萃取剂体积为100-400μl，所述分散液液微萃取的萃取时间为30-120s。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反萃取的萃取剂体积为50-200μl，所述反萃取的萃取时间为30-120s。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液相分析的色谱条件为：色谱柱为agilent zorbax sb c18(4.6mm×250mm,5.0μm)；柱温30℃；流...
【专利技术属性】
技术研发人员：张慧，陈源，颜继忠，潘迎锋，沈斌彬，孙如琏，刘雳，
申请(专利权)人：正大青春宝药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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