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【技术实现步骤摘要】
本申请涉及羊肚菌,特别是一种高腺苷含量的羊肚菌菌株zjydj002及其应用。
技术介绍
1、羊肚菌(morchella sp.),俗称羊肚子、羊肚蘑、羊雀菌、包谷菌等,隶属子囊菌亚门(ascomycotina)、盘菌纲(discomycetes)、羊肚菌科(morchellaceae)。野生羊肚菌是世界著名的珍稀名贵食(药)用真菌,具有较高的营养价值。羊肚菌具有较高的食(药)用价值。
2、羊肚菌子实体和菌丝体不仅营养成分丰富,除包括:蛋白质、碳水化合物、脂肪、粗纤维、核黄素、烟酸、叶酸和维生素等多种成分外,羊肚菌中还含有多糖、酶类、吡喃酮抗生素、脂肪酸类化合物、氨基酸、腺苷、矿物质及其他多种化学成分。
3、近年来,羊肚菌受到了国内外学者的广泛重视,研究内容主要涉及资源种类,地理分布,生长环境,栽培技术,化学成分及药理活性。现代药理学研究表明,羊肚菌具有免疫调节活性、抗肿瘤活性、保护心血管系统、保护胃粘膜、保护肾脏、保肝作用、抗氧化活性等药理学作用。
4、腺苷是一种内源性嘌呤核苷酸,是虫草素生物合成的直接前体。腺苷具有改善心脑血液循环,防止心律失常,保护肾脏,改善失眠等药理作用。在《中华人民共和国药典》中腺苷被用作虫草的质控指标。目前,腺苷的提取研究主要集中在蛹虫草、冬虫夏草等虫草及相关伴生真菌中,对于羊肚菌中腺苷的含量测定以及相关研究报道鲜少。
5、公开于
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解,而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域普通技术人员所
技术实现思路
1、本申请针对上述技术问题提供了一种高腺苷含量的羊肚菌菌株zjydj002。
2、本申请提供了一种高腺苷含量的羊肚菌菌株zjdydj002,羊肚菌
3、(morchella sp.)菌株zjdydj002的保藏编号为cgmcc no.40977;基因序列如seqid no.1。
4、优选的,菌株zjdydj002的生长培养基为综合pda培养基;pda培养基至少包括:马铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水,自然ph;菌株zjdydj002菌丝体的腺苷平均含量为493.68μg/g。
5、本申请的另一方面还提供了一种如上述菌株zjdydj002在腺苷补充制剂中的应用。
6、可根据本领域常用剂型将该菌株的发酵物、菌株培养物或菌株本身,制成粉末后与各类辅料混合后,制成各类型的制粒,例如粉剂、胶囊用于补充人体或动物体的腺苷。也可以为按以下所述液体培养方法制得的培养物,通过冻干干燥处理或浓缩处理后制得粉体制剂,并与所需辅料混合后制得所需剂型的制剂。
7、本申请的另一方面还提供了一种如前述菌株zjdydj002的液体培养方法,包括以下步骤:将菌株zjdydj002的试管种,接种于液体培养基中培养至液体培养基中长出可见菌丝球。
8、优选地,液体培养基中培养条件为在16~22℃转速150~180rpm,震荡培养7~10天。该菌株最短仅需培养7天即可进行腺苷含量的检测,菌丝球生长速度较快,长势较好,有利于进一步工业化运用。
9、优选地,液体培养基中接种量为菌丝体组织块按4~6块/瓶接种;
10、优选地,液体培养基为葡萄糖18~19重量份、蛋白胨5~6重量份、酵母粉3~4重量份、磷酸二氢钾1重量份、硫酸镁1~4重量份,加水定容至1000ml,自然ph值。
11、优选地,试管种的制备方法为将菌株zjdydj002接种于综合pda培养基斜面中,在16~20℃下培养3~5天得到试管种。
12、优选地,综合pda培养基为马铃薯200重量份、葡萄糖18~20重量份、琼脂18~20重量份、磷酸二氢钾1重量份、硫酸镁0.5重量份,加水定容至1000ml,ph自然。
13、本申请的另一方面还提供了一种如上述菌株zjydj002的腺苷含量测定方法,包括以下步骤:采用高效液相色谱仪检测预处理干制的菌株zjydj002的菌丝球;
14、采用外标法处理高效液相色谱仪检测结果,计算得到腺苷含量;
15、优选地,高效液相色谱仪设置色谱条件为:色谱柱为250×4.6mm,5μm的c18柱,流动相为a相为乙腈-b相为水,按a:b体积比为5:95比例等度洗脱,流速为1.0ml/min;检测波长260nm;柱温35℃;进样量10μl。
16、优选地,菌丝球的干制方法为:40~50℃下,烘干菌丝球至含水量为8%~10%,得到干菌丝体。
17、优选地,检测样品的预处理方法包括以下步骤:
18、1)取粉碎的干菌丝体粉末0.5g于100ml容量瓶中,加水80ml后,超声提取3h,冷却至室温,用水定容摇匀,得到样液;
19、2)离心样液取上清液,过滤上清液得到滤液;
20、优选地,离心样液条件为7000r/min离心5min;
21、优选地,上清液所用过滤膜为0.45μm水系微孔滤膜;
22、本申请能产生的有益效果包括:
23、1)本申请所提供的高腺苷含量的羊肚菌菌株zjydj002及其应用,该菌株发菌快,污染少,菌丝壮,产量高、生产周期短,该菌株子实体具有腺苷含量高的优点,具有较高的应用价值,能快速获得大量腺苷提取原料。该菌株的液体培养时间仅为7天即可进行腺苷提取使用,培养周期较短,且所得0.5g液体培养液中干菌丝体粉末的腺苷含量可达494μg/g,远高于现有羊肚菌中腺苷的含量,该菌株腺苷产量高。
24、2)本申请所提供的高腺苷含量的羊肚菌菌株zjydj002及其应用,该菌株在平板培养时,可见该菌株的菌丝粗壮,培养过程中未见被杂菌干扰情况,说明存在一定的杂菌抵抗效果。试管菌株也仅需培养3~5天即可用于液体培养基接种,发菌快,能有效缩短培养时间和生产周期。
25、3)本申请所提供的羊肚菌腺苷含量检测方法,采用该方法可准确测定羊肚菌菌株zjydj002液体发酵液中菌丝体的腺苷含量。
26、保藏信息:
27、菌株zjydj002,于2023年11月10日保藏至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所;鉴定为羊肚菌(morchella sp.),保藏编号cgmcc no.40977。
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1.一种高腺苷含量的羊肚菌菌株ZJYDJ002,其特征在于,羊肚菌
2.根据权利要求1所述的高腺苷含量的羊肚菌菌株ZJYDJ002,其特征在于,菌株ZJDYDJ002的生长培养基为综合PDA培养基;
3.一种如权利要求1或2所述高腺苷含量的羊肚菌菌株ZJDYDJ002在腺苷补充制剂中的应用。
4.一种如权利要求1或2所述高腺苷含量的羊肚菌菌株ZJDYDJ002的液体培养方法,其特征在于,包括以下步骤:将菌株ZJDYDJ002的试管种,接种于液体培养基中培养至液体培养基中长出可见菌丝球。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,液体培养基中培养条件为在16~22℃转速150~180rpm,震荡培养7~10天;
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,液体培养基为葡萄糖18~19重量份、蛋白胨5~6重量份、酵母粉3~4重量份、磷酸二氢钾1重量份、硫酸镁1~4重量份,加水定容至1000mL,自然pH值;
7.一种如权利要求1或2所述的高腺苷含量的羊肚菌菌株ZJYDJ002的腺苷含量测定方法,包括以下步骤:采用高
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,高效液相色谱仪设置色谱条件为:色谱柱为250×4.6mm,5μm的C18柱,流动相为A相为乙腈-B相为水,按A:B体积比为5:95比例等度洗脱,流速为1.0mL/min;检测波长260nm;柱温35℃;进样量10μL。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,菌丝球的干制方法为:40~50℃下,烘干菌丝球至含水量为8%~10%,得到干菌丝体。
10.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,检测样品的预处理方法包括以下步骤:
...【技术特征摘要】
1.一种高腺苷含量的羊肚菌菌株zjydj002,其特征在于,羊肚菌
2.根据权利要求1所述的高腺苷含量的羊肚菌菌株zjydj002,其特征在于,菌株zjdydj002的生长培养基为综合pda培养基;
3.一种如权利要求1或2所述高腺苷含量的羊肚菌菌株zjdydj002在腺苷补充制剂中的应用。
4.一种如权利要求1或2所述高腺苷含量的羊肚菌菌株zjdydj002的液体培养方法,其特征在于,包括以下步骤:将菌株zjdydj002的试管种,接种于液体培养基中培养至液体培养基中长出可见菌丝球。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,液体培养基中培养条件为在16~22℃转速150~180rpm,震荡培养7~10天;
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,液体培养基为葡萄糖18~19重量份、蛋白胨5~6重量份、酵母...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙达锋,吴素蕊,游金坤,华蓉,刘绍雄,冯云利,代秋琼,王娟,邓雅元,
申请(专利权)人:中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所,
类型:发明
国别省市:
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