【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药生物，具体涉及一种靶向cacna2d2基因的干扰sirnas在神经母细胞瘤治疗药物制备中的应用。
技术介绍
1、神经母细胞瘤(neuroblastoma，nb)是一种起源于交感神经系统的异质性较高的实体肿瘤，也是小儿颅外最常见的恶性实体肿瘤，占儿童恶性肿瘤发病总数的8％～10％，约占儿童因恶性肿瘤死亡总数的15％。目前神经母细胞瘤按照风险评级可分为低、中、高危型，虽然低危和中危神经母细胞瘤患者通过综合治疗往往可取得较好的治疗效果，治愈率超过90％，但高危神经母细胞瘤患者的预后较差，即使综合各种治疗方案，五年生存率也低于50％，后期容易出现复发及耐药的情况(park jr,et al.jama.2019aug 27；322(8):746-755.)。
2、神经母细胞瘤是危害儿童健康的重大疾病，因此，进一步研究神经母细胞瘤治疗的新型潜在靶点及干预手段，对于推动神经母细胞瘤的临床治疗具有积极意义。
3、cacna2d2基因编码电压依赖性钙通道的假定辅助亚基α2δ2，该亚基是电压门控钙离子通道(vgcc)的辅助亚单位之一，参与vgccα1亚基的贩运，改变vgcc的结构及功能，进而影响细胞的钙离子内流。大量研究显示cacna2d2亚基异常导致的钙离子浓度改变与癫痫等疾病的发生密切相关，例如α2δ2亚基的突变易导致钙通道电流密度降低引起早期婴儿癫痫性脑病的发生(edvardson s,et al.j med genet.2013feb；50(2):118-123.)；小鼠失神癫痫模型的特点是cacn
4、目前关于cacna2d2表达与肿瘤的关系研究报道较少，仅有一篇文献显示在前列腺癌中沉默cacna2d2可抑制肿瘤细胞的增殖(warnier m,et al.oncogene.2015oct 16；34(42):5383-5394.)。关于cacna2d2基因在神经母细胞瘤中的作用尚没有文献报道，且抑制cacna2d2这一干预策略的最佳适用肿瘤类型也未知。因此，cacna2d2在神经母细胞瘤尤其是高危患者中的作用有待进一步研究。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是通过探究与神经母细胞瘤发生发展有关的基因，以此作为药物靶点应用于制备治疗神经母细胞瘤的药物，以提高患者疗效、改善预后和生存。
2、为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、本专利技术提供了电压门控钙通道辅助亚基α2δ2(cacna2d2)作为药物靶点在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用。具体的，所述药物为下调cacna2d2基因表达的药物。
4、进一步的，所述cacna2d2基因核苷酸序列如seq id no:1所示，所述cacna2d2基因编码的蛋白序列如seq id no:2所示。
5、本专利技术通过泛癌种数据库分析发现cacna2d2基因在神经母细胞瘤中的表达水平最高，且肿瘤细胞相较于正常肾上腺组织显著高表达。更为重要的是，相较于cacna2d2低表达的神经母细胞瘤患者，高表达患者的生存时间显著下降。因此，我们首次提出cacna2d2基因是神经母细胞瘤尤其是恶性进展的关键基因，为神经母细胞瘤提供了新的治疗靶点，且神经母细胞瘤是cacna2d2靶向干预策略的潜在适应症。
6、本专利技术通过应用针对cacna2d2基因的sirnas达到下调cacna2d2的作用，从而研究cacna2d2在神经母细胞瘤中的作用。研究结果显示，cacna2d2下调表达后，显著抑制神经母细胞瘤细胞的细胞增殖及克隆形成能力。本专利技术为神经母细胞瘤治疗药物的开发提供新的作用靶点。
7、具体的，针对cacna2d2基因为靶点，开发相应的敲低该基因表达的药物制剂，通过下调cacna2d2基因的表达实现抗神经母细胞瘤的目的。
8、进一步的，所述药物为靶向cacna2d2的sirna。
9、进一步的，所述sirna的核苷酸序列如seq id no:3或seq id no:4所示。上述2个针对cacna2d2基因的sirnas能够抑制cacna2d2的表达，进而抑制神经母细胞瘤细胞的增殖及克隆形成能力。
10、本专利技术研究结果显示，cacna2d2下调表达可以显著抑制神经母细胞瘤sk-n-dz和sk-n-be(2)细胞的细胞增殖及克隆形成能力。结合sk-n-dz和sk-n-be(2)均是由mycn扩增的高危神经母细胞瘤患者来源的肿瘤细胞，我们首次公开了cacna2d2的sirnas分子可以作为有效干预手段，用于神经母细胞瘤尤其是高危患者的治疗。
11、进一步的，所述药物还包括药学上可接受的辅料。所述辅料为能够递送有效剂量活性物质，不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或受试者无毒副作用的任何制剂或载体介质。所述辅料包括填充剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂或润滑剂。
12、所述药物可按照药剂学上记载的制剂制备方法制成制剂。以上所述药物的制剂形式为液体制剂或固体制剂。
13、本专利技术具备的有益效果：
14、本专利技术首次公开cacna2d2异常高表达与神经母细胞瘤不良预后尤其是恶性进展相关，提供了以cacna2d2基因作为药物靶点应用于制备治疗神经母细胞瘤的药物，进一步提供cacna2d2sirna在制备神经母细胞瘤治疗药物中的用途。下调cacna2d2可以有效抑制神经母细胞瘤的细胞增殖及克隆形成能力，为目前神经母细胞瘤治疗药物的开发提供了新的方向。本专利技术为制备新的神经母细胞瘤药物、提高患者疗效、改善预后和生存提供了可能性。
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1.电压门控钙通道辅助亚基α2δ2作为药物靶点在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用，其特征在于，所述药物为下调电压门控钙通道辅助亚基α2δ2基因表达的药物。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述电压门控钙通道辅助亚基α2δ2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述电压门控钙通道辅助亚基α2δ2基因编码的蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为靶向电压门控钙通道辅助亚基α2δ2的siRNA。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述siRNA核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述siRNA核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物的制剂形式为液体制剂或固体制剂。
【技术特征摘要】
1.电压门控钙通道辅助亚基α2δ2作为药物靶点在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用，其特征在于，所述药物为下调电压门控钙通道辅助亚基α2δ2基因表达的药物。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述电压门控钙通道辅助亚基α2δ2基因的核苷酸序列如seq id no:1所示。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述电压门控钙通道辅助亚基α2δ2基因编码的蛋白序列如seq id no:2所示。
4.根据权利要求1所述的应用，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：应美丹，何俏军，杨波，邵雪晶，曹戟，许爱笑，张建华，
申请(专利权)人：南湖脑机交叉研究院，
类型：发明
国别省市：
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