【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析化学，具体涉及的是甲砜霉素中基因毒性杂质二氯乙酸的检测方法。
技术介绍
1、甲砜霉素化学名称为：d-苏-2-二氯乙酰胺基-1-(4-甲砜基苯基)-1,3-丙二醇，其结构式如下：
2、
3、化学式：c12h15cl2no5s
4、分子量：356.222
5、甲砜霉素为氯霉素类抗生素，其抗菌作用比氯霉素大3-5倍，免疫抑制作用较氯霉素大6倍，临床上主要用于呼吸道感染、尿道感染、肝胆感染、肠道感染、外科感染、伤寒、痢疾和脑膜炎症等。临床上长期使用尚未发现有类似氯霉素长期用药后发生再生障碍性贫血的毒性。该药口服吸收好，2小时血药浓度即可达峰，比氯霉素高而持久，副作用轻微。
6、根据甲砜霉素原料的合成工艺路线，有水解产生基因毒杂质二氯乙酸的风险，至今未见有甲砜霉素中二氯乙酸杂质的检测方法的报道，因此急需要开发一种快速、有效检测基因毒性杂质二氯乙酸的分析方法，以控制甲砜霉素原料质量。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种从甲砜霉素中分离基因毒性杂质二氯乙酸的方法，以快速、有效地检测甲砜霉素原料药中潜在的基因毒性杂质，以控制甲砜霉素原料药的质量，具有较大的应用价值和经济价值。
2、根据甲砜霉素原料的合成工艺路线，有水解产生基因毒杂质二氯乙酸的风险，其结构式如下：
3、
4、依据ich-m7，可以根据啮齿类动物的致癌效价数据，例如td50(导致50％肿瘤发生率的给药剂量)，来
5、为了达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：
6、一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，采用高效液相色谱检测甲砜霉素中基因毒杂质二氯乙酸，所述检测方法包括如下步骤：
7、(1)分别配制甲砜霉素供试品溶液和基因毒性杂质对照品溶液；
8、(2)将步骤(1)所得的甲砜霉素供试品溶液和基因毒性杂质对照品溶液分布注入液相色谱仪，完成基因毒性杂质的测定；采用外标法计算甲砜霉素中基因毒性杂质的含量；
9、进一步，所述的基因毒杂质为二氯乙酸；
10、进一步，所述步骤(2)液相色谱条件为：
11、色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
12、流动相采用梯度洗脱方法，流动相a为磷酸水溶液，流动相b为乙腈或甲醇，
13、进一步，流动相a和流动相b的体积百分比始终保持100％；
14、作为优选技术方案，所述流动相a中所述磷酸水溶液是体积分数为0.08％～0.12％的水溶液，最优选为0.1％磷酸水溶液。
15、进一步，流动相b为乙腈。
16、进一步，所述的方法中流动相流速为0.5～1.5ml/min，最优选为1.0ml/min。
17、进一步，所述的方法中色谱柱柱温为30℃～35℃，最优选为30℃；检测器波长为210nm。
18、进一步，稀释剂为50％～100％乙腈水溶液，最优选为60％乙腈水溶液。
19、进一步，所述步骤(2)中，高效液相色谱所用色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱柱长为150～250mm，优选250mm；内径为3.0～4.6mm，优选4.6mm；粒径为2.7～5μm，优选5μm。
20、进一步，所述的方法中梯度洗脱的程序为：
21、 时间(min) 流动相a(％) 流动相b(％) 0 85 15 10 85 15 20 20 80 25 20 80 30 85 15
22、进一步，为保证产品质量，杂质的限度保持在35ppm以下，配制二氯乙酸对照品溶液样品浓度为0.4～1.0μg/ml，最优选为0.6μg/ml。甲砜霉素供试品配制浓度为10～25mg/ml。最优选为20mg/ml。最终限度定为30ppm。
23、进一步，所述的步骤2)中甲砜霉素供试品和二氯乙酸对照品的峰面积为依据，如检测中甲砜霉素供试品峰面积小于二氯乙酸对照品的峰面积，则判定为合格。外标法计算甲砜霉素中基因毒性杂质的含量公式为：
24、
25、asam：供试品溶液的峰面积；
26、astd：对照品溶液的峰面积；
27、cstd：对照品溶液的浓度，mg/ml；
28、ws：供试品的称样量，mg；
29、vs：供试品溶液的稀释体积，ml。
30、所述基因毒性杂质的检测限和定量限均符合限度要求(loq为10ppm lod为5ppm)。
31、有益效果：
32、本专利技术方法采用高灵敏度、高耐用性色谱方法，采用简单的色谱条件可以将甲砜霉素中基因毒性杂质二氯乙酸与供试品中其他物质达到有效分离，具有分析时间短、灵敏度高、重复性好，准确度高好等优点，可以快速有效的检测甲砜霉素原料药中的基因毒性杂质，从而解决了基因毒性杂质分离和测定较为困难的问题，从而保证了甲砜霉素原料药在大生产中的质量可控。
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1.一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，所述流动相A磷酸水溶液是体积分数为0.08％～0.12％的水溶液。
3.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱方法为：
4.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，所述色谱柱柱长为150～250mm，内径为3.0～4.6mm，粒径为2.7～5μm，检测波长为210nm，柱温为30℃～35℃，流速为0.5～1.5ml/min。
5.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，所述流动相A为乙腈。
6.根据权利要求5所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，色谱柱柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm，检测波长为210nm，柱温为30℃，流速为1.0ml/min。
7.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，甲砜霉素供试品溶液浓度为10～25mg/ml。>
8.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，基因毒性杂质对照品溶液溶度为0.4～1.0μg/ml。
9.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，样品的进样量为20μl。
...【技术特征摘要】
1.一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，所述流动相a磷酸水溶液是体积分数为0.08％～0.12％的水溶液。
3.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱方法为：
4.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质的检测方法，其特征在于，所述色谱柱柱长为150～250mm，内径为3.0～4.6mm，粒径为2.7～5μm，检测波长为210nm，柱温为30℃～35℃，流速为0.5～1.5ml/min。
5.根据权利要求1所述一种甲砜霉素基因毒杂质...
【专利技术属性】
技术研发人员：顾霞，张家榕，张玲，
申请(专利权)人：江苏恒盛药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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