【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，特别涉及一株对肠出血性大肠杆菌o157：h7和其他高毒力多重耐药致病大肠杆菌具有高抑菌活性的乳酸片球菌36e-3菌及应用。
技术介绍
1、(1)致泻大肠埃希氏菌(也称致泻大肠杆菌diarrheagenic escherichia coli,dec)是一类重要的食源性致病菌，可引起人和动物急性胃炎、持续腹泻等疾病。该类病原菌有5种重要致病类型，包括肠致病性大肠杆菌(enteropathogenic e.coli,epec)、肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenic e.coli,etec)、产志贺毒素大肠杆菌(shiga toxin-producinge.coli，stec)，肠侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive e.coli,eiec)和肠集聚性粘附大肠杆菌(aggregative e.coli，eaec)，在食源性疾病和临床领域，常被报道的类型主要为epec、stec、eaec和ehec o157：h7，这几类群是我国人群春夏季腹泻感染的主要病原菌，亦是动物感染的常见腹泻病原菌。
2、(2)肠出血性大肠杆菌e.coli o157:h7属于产志贺毒素大肠杆菌stec类群中的高致病血清型，可在较低剂量10-100cfu感染，引起人出血性腹泻、结肠炎、溶血性尿毒综合征等疾病，是全球重点监测的食源性病原菌。e.coli o157:h7的典型致病特征是能够产生两种志贺毒素(stx1和stx2；分别由stx1和stx2毒力基因编码)，志贺毒素在肠道肠腔产生，可穿过上皮细胞进入血循环，引起
3、(3)当前，致泻大肠杆菌(包括e.coli o157:h7)引起的食源性疾病仍是发达国家和发展中国家面临的重要公共卫生问题。在非o157：h7型致泻大肠杆菌感染治疗方面，抗生素如(阿莫西林、诺氟沙星)等可用于辅助治疗，但菌株容易产生耐药性，对人体健康存在潜在危害。e.coli o157：h7感染治疗方面，国内外目前仍缺乏有效手段。多项研究证实，抗生素使用会加速e.coli o157:h7志贺毒素的产生和释放，因此，临床上通常不建议应用抗生素进行治疗。在动物养殖中，致泻大肠杆菌引起的动物腹泻问题长期、持续存在，抗生素的长期使用导致动物及养殖环境大量多重耐药菌产生，给食品、环境和人体健康构成了重要威胁。
4、(4)开发稳定、高效、天然安全的生物防控技术已成为食品安全和人畜健康发展的新热点。特别是国内外“禁抗”形势下，乳酸菌作为病原菌防控和调节人体健康的益生菌，受到了众多食品企业和动物养殖企业的关注。乳酸菌可产生有机酸、细菌素、糖类等多种抑菌活性物质，抑制或杀灭病原菌，而对人畜无毒副作用。乳酸片球菌为乳酸菌一个种，已证实对革兰氏阳性和革兰氏阴性致病菌有较好的抑制作用，前期已有不同种类乳酸菌抑制致泻大肠杆菌报道，但主要针对一种大肠杆菌致病型或血清型，如大肠杆菌o157:h7或eteck88，对同时抑制多种高毒力耐药致泻大肠杆菌(包括e.coli o157:h7)的益生菌研究鲜见报道。本团队前期在食品、动物源或临床腹泻样本致泻大肠杆菌监测中发现，同一个样品中往往会存在多种不同致病类型的致泻大肠杆菌(如同时检出epec和stec)，因此需要筛选具有多重抑菌效果的菌株用于防控，而不仅仅针对某一类血清型或致病类型。此外，以往诸多文献中，益生菌筛选主要以标准菌株作为指示菌，缺乏对实际样品分离菌株(食品株、动物致病株和临床株)抑菌效果的评价数据。
5、基于以上不足，本专利技术筛选出一株可同时对多种不同类型(血清型)致泻大肠杆菌具有高抑菌活性的菌株——乳酸片球菌36e-3，所用指示菌主要来源于食源性(高毒力耐药菌)、动物致病分离株和临床分离株，在实际应用中更具针对性和代表性。本专利技术菌株与以往筛选的乳酸菌相比，在致泻大肠杆菌污染防控以及畜禽健康养殖等方面具有更高的推广应用价值。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于提供一株对多种高毒力耐药致泻大肠杆菌(包括e.coli o157:h7)具有抑菌活性且可产生ii类细菌素的乳酸片球36e-3菌株及应用。
2、本专利技术的乳酸片球菌(pediococcus acidilactici)36e-3于2023年11月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所，邮编：510070，保藏编号为：gdmcc no：64049。
3、本专利技术的第二个目的是提供乳酸片球菌36e-3在制备抗菌微生物菌剂中的应用。
4、优选，所述的抗菌微生物菌剂是抗大肠杆菌、单增李斯特菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、蜡样芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌的微生物菌剂。
5、优选，所述的大肠杆菌是致泻大肠杆菌。
6、本专利技术的第三个目的是提供一种抗菌微生物菌剂，其特征在于，含有上述乳酸片球菌36e-3作为活性成分。
7、本专利技术的第四个目的是提供一种抑菌素，其蛋白序列如seq id no.2所示。
8、本专利技术提供编码上述抑菌素的编码基因。
9、优选，所述的编码基因如seq id no.3所示。
10、本专利技术的乳酸片球菌(pediococcus acidilactici)36e-3可以同时抑制多种高毒力致泻大肠杆菌的生长，且携带bovicin_255_variant ii类细菌素氨基酸序列，具有广谱抑菌效果(对其他常见食源性致病菌也具有明显抑制作用)，在食品病原菌污染防控和畜禽动物健康养殖方面具有较高的应用价值。
11、pediococcus acidilactici 36e-3于2023年11月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所，邮编：510070，保藏编号为：gdmcc no：64049。
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1.乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)36E-3，保藏编号为：GDMCC No：64049。
2.权利要求1所述的乳酸片球菌36E-3在制备抗菌微生物菌剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的抗菌微生物菌剂是抗大肠杆菌、单增李斯特菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、蜡样芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌的微生物菌剂。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的大肠杆菌是致泻大肠杆菌。
5.一种抗菌微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述的乳酸片球菌36E-3作为活性成分。
6.一种抑菌素，其蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。
7.编码上权利要求6所述的抑菌素的编码基因。
8.根据权利要求7所述的编码基因，其特征在于，所述的编码基因如SEQ ID NO.3所示。
【技术特征摘要】
1.乳酸片球菌(pediococcus acidilactici)36e-3，保藏编号为：gdmcc no：64049。
2.权利要求1所述的乳酸片球菌36e-3在制备抗菌微生物菌剂中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的抗菌微生物菌剂是抗大肠杆菌、单增李斯特菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、蜡样芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌的微生物菌剂。
4.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：张淑红，代京莎，吴清平，黄远斌，张菊梅，古其会，杨小鹃，吴毓薇，赵昕宇，邓梅清，曾嘉辉，彭飞艇，林秀华，
申请(专利权)人：广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心，
类型：发明
国别省市：
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