【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术与生物医药领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽及其编码核酸、与非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽特异性结合的单克隆抗体，以及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
技术介绍
1、非洲猪瘟病毒(asfv)是一种具有高度传染性和破坏性的猪病原体，会引起发烧、呼吸困难、皮肤发绀、淋巴结、肾脏和胃肠粘膜明显出血等临床症状。非洲猪瘟(asf)由asfv感染引起，1921年首次在肯尼亚报道，2018年传入中国，此后蔓延到多个国家，给全球养猪业造成巨大经济损。世界动物卫生组织(woah)将asf列为法定报告动物疫病，家猪的发病率和死亡率接近100％。
2、非洲猪瘟病毒是一种在细胞质中复制的大型双链dna病毒，是asfarviridae家族的唯一成员，也是唯一的dna虫媒病毒。asfv的直径为175-215nm，呈20面体对称，有囊膜，基因组长度为170-190kb，编码超过160种蛋白质。由于asfv的基因组较大，编码的蛋白质复杂，免疫逃逸机制不明晰，截止到目前为止，全球范围内仍没有控制非洲猪瘟传播的商业化疫苗或有效的抗非洲猪瘟病毒药物。因此，在早期快速准确地诊断asfv是防控asf的重要措施。
3、目前，woah已将酶联免疫吸附测定(elisa)作为诊断asf的重要血清学方法，市面上也有几种商业化的elisa试剂盒用于检测asf抗体，其中磷蛋白p30、衣壳蛋白p72、多蛋白pp62和
4、非洲猪瘟病毒pd205r蛋白是由d205r基因编码的一种非结构蛋白，pd205r蛋白的部分序列与真核生物rna聚合酶ii亚基5(rpb5)相似，并具有该蛋白家族的特征结构域。rpb5与基础转录因子tfiib相互作用，是潜在的转录激活因子相互作用的靶点。同时，asfv也编码类似于tfiib因子的蛋白质，因此推测pd205r参与asfv转录相关过程。且有研究发现，pd205r在asfv感染的巨噬细胞中大量表达，可能在病毒基因转录和mrna加工过程中发挥重要作用。然而，pd205r蛋白的具体生物学功能尚不清楚，对其抗原性进行研究、鉴定可能为开发asfv表位疫苗提供材料基础。
技术实现思路
1、本专利技术主要解决的技术问题是提供一种非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽。
2、其次，本专利技术提供一种非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽及其编码核酸在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
3、再次，本专利技术提供一种与非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位特异性结合的单克隆抗体、以及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
4、最后，本专利技术提供一种抗非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的单克隆抗体或杂交瘤细胞株在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
5、为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
6、一种非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽，所述非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽包含如seq id no：1所示的氨基酸序列。
7、本专利技术提供的非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位为线性表位，位于非洲猪瘟病毒pd205r蛋白第167-181位氨基酸(即167-sdppvvwlggrpgdf-181)，其中关键氨基酸为s167、w173、l174、g175、p178和d180。
8、一种非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽的编码核酸。
9、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述编码核酸为dna或rna，在不改变编码氨基酸序列的前提下，可以根据密码子的偏好性进行修饰改造。
10、一种包含非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽或其编码核酸的生物材料。
11、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述生物材料包括但不限于重组表达载体(如质粒载体、病毒载体)、基因表达盒、重组菌、宿主细胞(如原核细胞、真核细胞)。
12、一种非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽或其编码核酸、生物材料的应用，所述应用包括以下任一种或多种：
13、(1)在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物中的应用；
14、(2)在制备检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
15、一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物，所述药物包含以下一种或多种有效成分：
16、(1)非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽；
17、(2)非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽的编码核酸；
18、(3)包含非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽或其编码核酸的生物材料。
19、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述药物为预防和/或治疗性疫苗。具体的，所述疫苗可以为核酸疫苗，其中包含非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽的编码核酸，如dna疫苗、rna疫苗。所述疫苗也可以为多肽疫苗、重组蛋白疫苗或合成长肽疫苗，其中包含非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽。
20、一种检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，所述试剂可以为免疫检测和/或诊断试剂，试剂中包含非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽，可用于检测非洲猪瘟病毒感染后产生的能够特异性识别并结合pd205r蛋白的抗原表位肽的抗体。所述试剂也可以为分子检测和/或诊断试剂，试剂中包含检测非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽的编码核酸的引物、探针、分子信标等，均根据该编码核酸设计、合成。
21、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述试剂还可以包含药剂学上可接受的载体、辅料等。对于免疫检测和/或诊断试剂，所述试剂中包含样本稀释液、酶标板、封闭液、洗涤液、底物、终止液、阴性对照、阳性对照等中的一种或多种。对于分子检测和/或诊断试剂，所述试剂中包含聚合酶(依赖rna和/或dna的聚合酶)、扩增反应缓冲液、阳性对照、阴性对照等中的一种或多种。
22、一种抗非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体由保藏在中国典型培养物保藏中心、保藏编号为cctcc no：c2023250的杂交瘤细胞株asfv-pd205r-19a5(hybrid本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种非洲猪瘟病毒pD205R蛋白的抗原表位肽，其特征在于：所述非洲猪瘟病毒pD205R蛋白的抗原表位肽包含如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。
2.一种如权利要求1所述的抗原表位肽的编码核酸。
3.一种包含如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸的生物材料。
4.一种如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸、或者如权利要求3所述的生物材料的应用，其特征在于：所述应用包括以下任一种或多种：
5.一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、或者检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，其特征在于：所述药物或试剂包含以下一种或多种有效成分：
6.一种抗非洲猪瘟病毒pD205R蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体由保藏在中国典型培养物保藏中心、保藏编号为CCTCC NO：C2023250的杂交瘤细胞株ASFV-pD205R-19A5(Hybridoma cell line ASFV-pD205R-19A5)分泌产生。
7.一种用于制备如权利要求6所述的单克隆抗体的杂
8.一种如权利要求6所述的单克隆抗体、或者如权利要求7所述的杂交瘤细胞株的应用，其特征在于：所述应用包括以下任一种或多种：
9.一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物，其特征在于：所述药物包含以下一种或多种有效成分：
10.一种检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，其特征在于：所述试剂为免疫检测和/或诊断试剂，包含以下一种或多种有效成分：
...【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽，其特征在于：所述非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的抗原表位肽包含如seq id no：1所示的氨基酸序列。
2.一种如权利要求1所述的抗原表位肽的编码核酸。
3.一种包含如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸的生物材料。
4.一种如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸、或者如权利要求3所述的生物材料的应用，其特征在于：所述应用包括以下任一种或多种：
5.一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、或者检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，其特征在于：所述药物或试剂包含以下一种或多种有效成分：
6.一种抗非洲猪瘟病毒pd205r蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体由保藏在中国典型培养物保藏中心、保藏编号为cctcc no：c2023250的杂交瘤细...
【专利技术属性】
技术研发人员：何文瑞，张改平，林志钊，韩世充，万博，任豪杰，张雨杭，赵燕燕，胡曼，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。