【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因检测领域，特别涉及用于检测myh7、mybpc3、tnnt2和tnni3基因的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
1、遗传性心血管疾病是引起猝死高发的一个很重要原因，心源性猝死(suddencardiac death，scd)有一定的遗传倾向，与单基因遗传性心血管疾病基因及其位点多态性相关。肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy，hcm)是导致青年人及健康者心源性猝死的首要原因，主呈常染色体显性遗传，即有50％的概率遗传到下一代，约60％的家族性和30％的散发性hcm患者可检测到明确的致病基因突变，以编码肌小节蛋白的基因为主。hcm的不良预后包括心源性猝死、心力衰竭和卒中。myh7(β-肌球蛋白重链)、mybpc3(肌球蛋白结合蛋白c)、tnnt2(心肌肌钙蛋白t)和tnn13(心肌肌钙蛋白i)突变是导致hcm的4个常见原因。一旦myh7、mybpc3、tnnt2及tnni3基因的相关位点发生突变或双突变，临床症状较严重，预后性较差。mybpc3(myosin binding protein c,cardiac)是一种编码心肌肌球蛋白结合蛋白的基因。心肌肌球蛋白结合蛋白c位于心肌肌小节中的c区，约占肌原纤维中蛋白总数的2％。mybpc3基因突变多为缺失、插入、重复等，导致产生一种缺少肌球蛋白和肌蛋白集合位点的平截蛋白，从而造成肌小节结构和功能损害。myh7(myosin heavy chain 7)是一种编码心脏β肌球蛋白重链的基因。心脏β肌球蛋白重链是人心室肌球蛋白的主要成分，在心肌
2、对于包括肥厚型心肌病在内的心源性猝死疾病而言，由于这些疾病的大部分在症状发作前不会有明显的先兆性症状，而一旦发作往往会造成难以挽回的后果。同时，这些疾病运用传统鉴别和诊断方法主要依靠生化检查和影像学检查，如超声心动图、心电图检查、x线检查、心脏磁共振(mri)和心内膜下心肌活检等，难以实现早期诊断，极大地制约了对包括肥厚型心肌病在内的心源性猝死疾病的早期干预。如今，运用临床遗传学方法来进行辅助诊断，已成为该病早期诊断新的优良策略。mybpc3、myh7、tnnt2与tnni3四个基因是肥厚型心肌病的核心基因，通过采用基因检测手段，在未发病或发病早期筛查出携带者，可以实现疾病早期的筛查和管理。
3、现有技术中，常常采用经典而原始的限制性片段长度多态性、核酸分子杂交、taqman-mgb法、snp shot多重pcr技术、毛细管电泳法和高通量测序技术等检测心肌病的核心基因突变，但其测序的深度不足，常常导致结果不准确，而且成本高，不适用于大规模人群的肥厚型心肌病筛查。因此，本领域尚需开发检测方便的、准确度高的检测mybpc3、myh7、tnnt2与tnni3四个关键基因的肥厚型心肌病诊断试剂盒。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种用于检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和tnni3基因的引物探针混合液。
2、本专利技术的另一目的在于提供一种用于检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和tnni3基因的试剂盒。
3、本专利技术的另一目的在于提供一种联合检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和tnni3基因的方法。
4、为解决上述技术问题，本专利技术第一方面提供了一种引物对组，
5、所述引物对组用于检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和/或tnni3基因，所述引物对组选自下组的一种或多种引物对：
6、第一引物对，所述第一引物对包括具有如seq id no：1所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：2所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第一引物对用于检测mybpc3基因c.842c>g位点；
7、第二引物对，所述第二引物对包括具有如seq id no：3所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：4所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第二引物对用于检测mybpc3基因c.931g>a位点；
8、第三引物对，所述第三引物对包括具有如seq id no：5所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：6所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第三引物对用于检测myh7基因c.1357c>t位点；
9、第四引物对，所述第四引物对包括具有如seq id no：7所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：8所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第四引物对用于检测myh7基因c.1816g>a位点；
10、第五引物对，所述第五引物对包括具有如seq id no：9所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：10所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第五引物对用于检测myh7基因c.1987c>t位点和myh7基因c.1988g>a位点；
11、第六引物对，所述第六引物对包括具有如seq id no：11所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：12所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第六引物对用于myh7基因c.2156g>a位点；
12、第七引物对，所述第七引物对包括具有如seq id no：13所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：14所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第七引物对用于检测tnnt2基因c.274c>t位点；
13、第八引物对，所述第八引物对包括具有如seq id no：15所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：16所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述第八引物对用于检测tnnt2基因c.388c>t位点；
14、第九引物对，所述第九引物对包括具有如seq id no：17所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：18所示的核苷酸序列的反向引物；优选地，所述九引物对用于检测tnni3基因c.434g>a位点；和
15、第十引物对，所述第十引物对包括具有如seq id no：19所示的核苷酸序列的正向引物和具有seq id no：20所示的核苷酸序列的反向引物。优选地，所述第十引物对用于检测tnni3基因c484c>t位点。
16、在一些优选的方案中，所述引物对组用于检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和tnni3基因，所述引物对组包括：
17、第一引物对集；
18、第二引物对集；和/或
19、第三引物对集；
20、其中，所述第一引物对集包括选自下组的一种或多种引物对：
21、第七引物对、第八引物对、第九引物对和第十引物对；(用于检测tnnt2基因c.274c>t、tn本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种引物对组，其特征在于，所述引物对组用于检测人类MYH7、MYBPC3、TNNT2和/或TNNI3基因，所述引物对组选自下组的一种或多种引物对：
2.根据权利要求1所述的引物对组，其特征在于，所述引物对组用于检测人类MYH7、MYBPC3、TNNT2和/或TNNI3基因，所述引物对组包括：
3.一种引物探针混合液，其特征在于，所述引物探针混合液用于检测人类MYH7、MYBPC3、TNNT2和/或TNNI3基因，所述引物探针混合液包括权利要求1或2所述的引物对组和探针组；所述探针组包括选自下组的一种或多种探针：
4.根据权利要求3所述的引物探针混合液，其特征在于，所述第一探针具有如SEQ IDNO：21所示的核苷酸序列；
5.根据权利要求3或4所述的引物探针混合液，其特征在于，所述引物探针混合液包括权利要求2所述的引物对组和探针组，所述探针组包括：
6.根据权利要求3所述的引物探针混合液，其特征在于，所述第一探针、所述第六探针、所述第八探针具有第一荧光标记；优选为FAM；
7.根据权利要求6所述的引物探针
8.一种用于检测人类MYH7、MYBPC3、TNNT2和/或TNNI3基因分型的PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1或2所述的引物对组；
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求5-7中任一项所述的引物探针混合液，所述试剂盒包括第一容器、第二容器和/或第三容器；
10.一种检测人类MYH7、MYBPC3、TNNT2和/或TNNI3基因分型的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种引物对组，其特征在于，所述引物对组用于检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和/或tnni3基因，所述引物对组选自下组的一种或多种引物对：
2.根据权利要求1所述的引物对组，其特征在于，所述引物对组用于检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和/或tnni3基因，所述引物对组包括：
3.一种引物探针混合液，其特征在于，所述引物探针混合液用于检测人类myh7、mybpc3、tnnt2和/或tnni3基因，所述引物探针混合液包括权利要求1或2所述的引物对组和探针组；所述探针组包括选自下组的一种或多种探针：
4.根据权利要求3所述的引物探针混合液，其特征在于，所述第一探针具有如seq idno：21所示的核苷酸序列；
5.根据权利要求3或4所述的引物探针混合液，其特征在于，所述引物探...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐小解，蒋析文，朱小亚，卢敏萍，陈连杰，
申请(专利权)人：广州达安基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。