【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及蛋白检测领域。具体而言，本专利技术涉及猴痘病毒的检测方法和试剂盒。
技术介绍
1、猴痘(monkeypox)是一种由猴痘病毒(mpxv)引起的人畜共患病，最早发现于非洲西部和中部地区原始森林。猴痘病毒与痘苗病毒、天花病毒相似，临床表现为暴露10-12天后发热，发热2-3天后皮肤出疹。皮疹的变化，从斑丘疹，一直到小水疱、脓疱，大约10天左右出现结痂。病毒可以通过直接密切接触由动物传染给人，传染途径主要包括血液、体液、皮肤或黏膜伤口。人类二次传播主要通过空气飞沫传播，飞沫可感染眼睛、鼻子和喉咙的黏膜。
2、目前，聚合酶链反应pcr是国内外检测猴痘病毒的主要检测方法，但需要依赖设备，且较易产生污染。需要开发简便易普及的猴痘病毒免疫学检测方法。
技术实现思路
1、猴痘病毒a29l蛋白(mkpva29l)是猴痘病毒的表面包膜蛋白(ncbi序列号np_536566.1),长度为110个氨基酸,与牛痘病毒162蛋白(cpxv-162)和痘苗病毒a27l蛋白(vaca27l)同源。
2、专利技术人经过大量理论研究和实验摸索，充分考虑猴痘病毒的a29l蛋白结构特性，对各种待测a29l抗原区间和检测抗体进行分析研究，获得了能够用于a29l检测的a29l抗原区域组合。
3、在一些实施方案中，本专利技术可以包括下述一项或多项：
4、1.一种猴痘病毒抗体，其特征在于，其包括结合猴痘病毒a29l蛋白的19-25aa的第一抗体。
5、2.
6、3.如项目2所述的猴痘病毒抗体组合,其特征在于，第一抗体为标记抗体时第二抗体为包被抗体；或第二抗体为标记抗体时第一抗体为包被抗体。
7、4.如项目2-3中任一项所述的抗体组合，其特征在于，其中所述标记抗体用可检测标记物和/或结合配偶体标记。
8、5.如项目4中任一项所述的抗体组合，其特征在于，所述可检测标记物选自金属粒子，荧光标记，发色团标记，电子致密标记，化学发光标记，放射性标记，或酶标记；例如可以是罗丹明，荧光素，荧光微球，胶体金，吖啶酯，荧光素酶，辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶，β-半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖氧化酶，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶标记；所述结合配偶体选自生物素/抗生物素蛋白，生物素/链霉抗生物素蛋白；例如标记抗体通过结合配偶体与可检测标记物进行标记。
9、6.如项目2-3中任一项所述的抗体组合，其特征在于，其中所述包被抗体连接至固相和/或结合配偶体，固相例如是磁性颗粒，胶乳粒子、微量滴定板、硝酸纤维素膜或微流控芯片；结合配偶体例如是生物素/抗生物素蛋白，生物素/链霉抗生物素蛋白；例如包被抗体通过结合配偶体与固相进行连接。
10、7.一种试剂盒，其特征在于，包括第一抗体；任选地，还包括第二抗体；其中，第一抗体、第二抗体根据项目1-6中任一项所定义。
11、8.如项目1所述的猴痘病毒抗体或权利要求2-6中任一项所述抗体组合的在制备检测猴痘病毒的试剂盒中的用途。
12、9.如项目8所述的用途，其特征在于，其中所述试剂盒用于对猴痘病毒含量进行检测。
13、10.一种制备项目1所述抗体或项目2所述的抗体组合的方法，其特征在于，所述方法包括：
14、1)使用含有下述片段1和/或片段2的肽段作为抗原或半抗原免疫动物：
15、片段1：猴痘病毒a29l蛋白氨基酸片段19-25aa；
16、片段2：猴痘病毒a29l蛋白氨基酸片段81-110aa；
17、和
18、2)从所述动物获得分别结合所述片段1或片段2的抗体。
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1.一种猴痘病毒抗体，其特征在于，其包括结合猴痘病毒A29L蛋白的19-25aa的第一抗体。
2.一种猴痘病毒抗体组合，其特征在于，其包括权利要求1所述的第一抗体，并且包括结合猴痘病毒A29L蛋白的81-110aa的第二抗体。
3.根据权利要求2所述的猴痘病毒抗体组合，其特征在于，第一抗体为标记抗体时第二抗体为包被抗体；或第二抗体为标记抗体时第一抗体为包被抗体。
4.如权利要求2-3中任一项所述的抗体组合，其特征在于，其中所述标记抗体用可检测标记物和/或结合配偶体标记。
5.如权利要求4所述的抗体组合，其特征在于，所述可检测标记物选自金属粒子，荧光标记，发色团标记，电子致密标记，化学发光标记，放射性标记，或酶标记；例如可以是罗丹明，荧光素，荧光微球，胶体金，吖啶酯，荧光素酶，辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶，β-半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖氧化酶，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶或葡萄糖-6-磷酸脱氢酶标记；所述结合配偶体选自生物素/抗生物素蛋白，生物素/链霉抗生物素蛋白。
6.如权利要求2-3中任一项所述的抗体组合，其特征在
7.一种试剂盒，其特征在于，包括第一抗体；任选地，还包括第二抗体；其中，第一抗体、第二抗体根据权利要求1-6中任一项所定义。
8.如权利要求1所述的猴痘病毒抗体或权利要求2-6中任一项所述抗体组合的在制备检测猴痘病毒的试剂盒中的用途。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，其中所述试剂盒用于对猴痘病毒含量进行检测。
10.一种制备权利要求1所述的抗体或权利要求2所述的抗体组合的方法，其特征在于，所述方法包括：
...【技术特征摘要】
1.一种猴痘病毒抗体，其特征在于，其包括结合猴痘病毒a29l蛋白的19-25aa的第一抗体。
2.一种猴痘病毒抗体组合，其特征在于，其包括权利要求1所述的第一抗体，并且包括结合猴痘病毒a29l蛋白的81-110aa的第二抗体。
3.根据权利要求2所述的猴痘病毒抗体组合，其特征在于，第一抗体为标记抗体时第二抗体为包被抗体；或第二抗体为标记抗体时第一抗体为包被抗体。
4.如权利要求2-3中任一项所述的抗体组合，其特征在于，其中所述标记抗体用可检测标记物和/或结合配偶体标记。
5.如权利要求4所述的抗体组合，其特征在于，所述可检测标记物选自金属粒子，荧光标记，发色团标记，电子致密标记，化学发光标记，放射性标记，或酶标记；例如可以是罗丹明，荧光素，荧光微球，胶体金，吖啶酯，荧光素酶，辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶，β-半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖氧化酶，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶或葡萄糖...
【专利技术属性】
技术研发人员：李瑞净，张翼，秦汤，周俊，文飘，刘春艳，
申请(专利权)人：广东菲鹏生物有限公司，
类型：发明
国别省市：
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