【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种猪流行性腹泻病毒毒株、其灭活方法及其应用，属于病毒研究及应用。
技术介绍
1、猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，pedv)引起的一种感染猪以呕吐、腹泻、脱水、厌食和迅速消瘦为主要特征的高度接触性肠道传染病。在自然条件下，pedv通过口鼻途径进入猪体内，各种年龄和品种的猪都有易感性，但对哺乳仔猪和育肥猪的危害更大，尤其对哺乳仔猪危害最为严重，发病率可达100％，病死率为30％～80％，给养猪业造成了严重的经济损失。
2、据文献报道自2010年以来，尽管大部分猪场都进行过pedv疫苗的免疫，但猪流行性腹泻(ped)仍在中国许多省份的猪场中流行。ped现有疫苗在不同地区的免疫保护力存在一定差异，可能是pedv流行多年出现变异，以致于疫苗株与流行毒株的基因同源性较低以及关键免疫位点发生突变有关，也与pe d临床免疫防控程序有关。因此有关于pedv疫苗的研发、应用和免疫效果评估等均值得进一步研究。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足，本专利技术的第一个目的在于提供一种猪流行性腹泻病毒毒株，该毒株有高增殖滴度、可稳定传代，具有优良的免疫原性。
2、本专利技术的第二个目的在于提供针对上述猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，对于该猪流行性腹泻病毒毒株，可在缩短灭活时间的条件下能够保留抗原的结构完整性及免疫原性，大大提高了制苗效率。
3、本专利技术的第三个目的在于提供上述猪流行性腹
4、实现本专利技术的第一个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种猪流行性腹泻病毒毒株，猪流行性腹泻病毒毒株于2023年11月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为：中国武汉武汉大学，保藏编号为cctcc no.v2023106，分类命名：porcine epidemicdiarrhea virus pedv maj-2。
5、进一步地，猪流行性腹泻病毒毒株包括如序列如seq id no.1所示的特异性片段。
6、实现本专利技术的第二个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，以甲醛作为灭活剂，对猪流行性腹泻病毒毒株进行灭活处理12-15h；猪流行性腹泻病毒毒株于2023年11月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no.v2023106。
7、进一步地，甲醛的浓度为0.05-0.2％v/v。
8、进一步地，甲醛的浓度为0.1-0.15％v/v。
9、进一步地，灭活的温度为37℃。
10、实现本专利技术的第三个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种灭活疫苗，灭活疫苗包括经灭活的猪流行性腹泻病毒毒株；猪流行性腹泻病毒毒株为于2023年11月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no.v2023106。
11、进一步地，灭活疫苗还包括佐剂，经灭活的猪流行性腹泻病毒毒株和佐剂按照质量比1:1混合并乳化。
12、进一步地，灭活疫苗的病毒量为107.5tcid50/ml，对于仔猪的接种量为1-4.5ml/头。
13、进一步地，灭活疫苗的免疫效果评估方法包括：将灭活疫苗免疫妊娠母猪，然后在母猪分娩后5-7天对哺乳仔猪进行攻毒保护效果的评估。
14、相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：
15、1、本专利技术pedv毒株与近1年以来临床流行毒株的s1序列进行对比，同源性达99.2％以上；
16、2、本专利技术pedv毒株有高增殖滴度、可稳定传代，具有优良的免疫原性；
17、3、本专利技术pedv毒株的灭活方法，可在缩短灭活时间的条件下能够保留抗原的结构完整性及免疫原性，大大提高了制苗效率；
18、4、本专利技术pedv毒株制备的灭活疫苗，对断奶仔猪进行接种的安全性高，诱导产生的pedvigg elisa抗体明显高于市售的变异株灭活苗，具有较好的免疫原性；
19、5、本专利技术pedv毒株制备的灭活疫苗，通过免疫怀孕母猪、通过母猪乳汁使仔猪获得被动保护的效果，为哺乳仔猪提供强保护力。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，所述猪流行性腹泻病毒毒株于2023年11月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No.V2023106。
2.如权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，所述猪流行性腹泻病毒毒株包括如序列如SEQ ID NO.1所示的特异性片段。
3.一种猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，其特征在于，以甲醛作为灭活剂，对猪流行性腹泻病毒毒株进行灭活处理12-15h；所述猪流行性腹泻病毒毒株于2023年11月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNo.V2023106。
4.如权利要求3所述的猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，其特征在于，所述甲醛的浓度为0.05-0.2％v/v。
5.如权利要求4所述的猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，其特征在于，所述甲醛的浓度为0.1-0.15％v/v。
6.如权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，其特征在于，所述灭活的温度为37℃。
7.一种灭活疫苗，其特征在于，所述灭活疫苗包括经灭活的猪流行性腹泻
8.如权利要求7所述的灭活疫苗，其特征在于，所述灭活疫苗还包括佐剂，所述经灭活的猪流行性腹泻病毒毒株和佐剂按照质量比1:1混合并乳化。
9.如权利要求7所述的灭活疫苗，其特征在于，所述灭活疫苗的病毒量为107.5TCID50/mL，对于仔猪的接种量为1-4.5mL/头。
10.如权利要求7所述的灭活疫苗，其特征在于，所述灭活疫苗的免疫效果评估方法包括：将灭活疫苗免疫妊娠母猪，然后在母猪分娩后5-7天对哺乳仔猪进行攻毒保护效果的监测。
...【技术特征摘要】
1.一种猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，所述猪流行性腹泻病毒毒株于2023年11月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no.v2023106。
2.如权利要求1所述的猪流行性腹泻病毒毒株，其特征在于，所述猪流行性腹泻病毒毒株包括如序列如seq id no.1所示的特异性片段。
3.一种猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，其特征在于，以甲醛作为灭活剂，对猪流行性腹泻病毒毒株进行灭活处理12-15h；所述猪流行性腹泻病毒毒株于2023年11月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctccno.v2023106。
4.如权利要求3所述的猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，其特征在于，所述甲醛的浓度为0.05-0.2％v/v。
5.如权利要求4所述的猪流行性腹泻病毒毒株的灭活方法，其特征在于，所述甲醛的浓度为0.1-0.15％...
【专利技术属性】
技术研发人员：何玲，钟采灵，王萱，梁桂益，孙华，陈瑞爱，
申请(专利权)人：广东温氏大华农生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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