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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种碱蓬根系菌种的提取技术,尤其涉及一种对植物有促生作用的碱蓬根系菌种的提取方法,属于菌种提取。
技术介绍
1、碱蓬(suaeda glauca(bunge))常见于我国盐碱滩涂,是一种盐生植物。本方法的菌种分离自盐碱滩涂的碱蓬根内,在超净台中将采样获得的碱蓬根系切成小段并消毒,将小段根系放在pda培养基中央,待菌落萌发,挑取其中一个单菌落分离培养,后进行纯化。新菌落分离出的菌命名为s1-j-a14。经接种培养,测试其对于植物是否具有促生作用。
2、本方法从开展“种养一体化”试验的沿海滩涂田埂边生长的盐地碱蓬根样品中分离出一种具有显著的真菌,基于形态学特征比较和多基因联合系统发育树,将其鉴定为球壳孢目球壳孢科茎点霉属的一个种。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种一种对植物有促生作用的碱蓬根系菌种的提取方法。
2、本专利技术所要解决的技术问题是通过以下技术方案实现的:所述方法的菌种取自于盐碱滩涂的碱蓬根内,在超净台中将采样获得的碱蓬根系切成小段并消毒,将小段根系放在pda培养基中央,待菌落萌发,挑取其中一个单菌落分离培养,后进行纯化,新菌落分离出的菌命名为s1-j-a14,将供试菌株s1-j-a14接种于pda培养基上,3~5d后用直径为6mm的无菌打孔器切取菌落边缘菌丝团块,转接于pda,每升加入200ml土豆汁,加25g琼脂,加20g葡萄糖,加800ml h2o),加mea麦芽浸粉琼脂培养基,每升加入36.5g麦芽糖浸膏琼脂粉末,
3、在超净工作台上将拟南芥种子置于2ml离心管中加入70%酒精浸泡15min,然后用无菌水冲洗3次,将消毒好的拟南芥种子平铺在1/2ms培养基上,用封口膜将培养皿密封,在4℃冰箱放置2d,再放入光照培养箱中培养,1/2ms培养基l的配置方法为:用大量元素25ml、微量元素5ml、有机氮5ml、铁盐溶液5ml、蔗糖20g、ph5.8、琼脂4g/500ml进行混合,进行拟南芥的培养。
4、在超净工作台上在干净的培养基的中心滴几滴无菌水,将地钱的胞芽杯中的孢芽转移到培养基中,用无菌镊子将固体培养基表面的孢芽摊涂开来,封上保鲜膜,放入光照培养箱中进行地钱的培养。
5、用10xgamborg’s b5原液50ml、mes0.5g、加dh2o定容至1000ml,10xgamborg’s b5原液的配置:准备0.7x体积的dh2o,搅拌,依次加入一下试剂:nah2po4-2h2o为1.75g,kno3为25g,(nh4)2so4为1.34g,mgso4-7h2o为2.5g,cacl2-2h2o为1.5g,edta-nafe(ⅲ)为400mg,gamborg’s b5微量元素为10ml,0.075%ki溶液为10ml,加sh2o定容至1000ml,得到gamborg’s b5培养基。
6、将s1-j-a14菌株接种于ms培养基上,待3天后后接种拟南芥幼苗,地钱接种于pda培养基上,待3天后接种a14菌株,s1-j-a14的鲜重相较于对照提高了82%的地上鲜重p<0.05,通过实验观察和具体测量可知,s1-j-a14菌株对于盐碱地植物拟南芥和地钱有显著促生作用。
7、由于采用上述技术方案,本专利技术所具有的优点和积极效果是:所述方法提取的菌株对于沿海盐碱地植物拟南芥和地钱有显著促生作用,可用于滩涂盐碱地的改良和促进滩涂植被的生长。
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1.一种对植物有促生作用的碱蓬根系菌种的提取方法,其特征在于:本菌种取自于盐碱滩涂的碱蓬根内,在超净台中将采样获得的碱蓬根系切成小段并消毒,将小段根系放在PDA培养基中央,待菌落萌发,挑取其中一个单菌落分离培养,后进行纯化,新菌落分离出的菌命名为S1-J-A14,将供试菌株S1-J-A14接种于PDA培养基上,3~5d后用直径为6mm的无菌打孔器切取菌落边缘菌丝团块,转接于PDA,每升加入200ml土豆汁,加25g琼脂,加20g葡萄糖,加800ml H2O),加MEA麦芽浸粉琼脂培养基,每升加入36.5g麦芽糖浸膏琼脂粉末,加1LH2O)、加燕麦OA培养基,每升加入18.125g燕麦琼脂,加250ml H2O,在25℃保温箱中培养10天后,菌株S1-J-A14即具有促生作用;
【技术特征摘要】
1.一种对植物有促生作用的碱蓬根系菌种的提取方法,其特征在于:本菌种取自于盐碱滩涂的碱蓬根内,在超净台中将采样获得的碱蓬根系切成小段并消毒,将小段根系放在pda培养基中央,待菌落萌发,挑取其中一个单菌落分离培养,后进行纯化,新菌落分离出的菌命名为s1-j-a14,将供试菌株s1-j-a14接种于pda培养基上,3~5d后用直径为6mm的无菌...
【专利技术属性】
技术研发人员:唐伯平,袁志林,刘秋宁,王刚,张华彬,汪正飞,李超峰,杨丽,陈露露,
申请(专利权)人:盐城师范学院,
类型:发明
国别省市:
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