来自葡萄酒发酵醪液的具有免疫调节作用的乳酸菌制造技术

本发明专利技术涉及具有免疫调节作用的乳杆菌属菌、含有该菌的组合物及具有免疫调节作用的乳酸菌的高效分离方法。本发明专利技术的乳杆菌属菌具有免疫调节作用，如摄取本发明专利技术的组合物等，则可通过赋活免疫功能来抑制免疫功能下降。且根据本发明专利技术，可高效获得具有免疫调节作用的乳酸菌。

【技术实现步骤摘要】
本申请是中国专利申请第200680040623.5号的分案申请，第200680040623.5号的专利申请其申请日是2006年10月31日，专利技术名称是“来自葡萄酒发酵醪液的具有免疫调节作用的乳酸菌”。
本专利技术涉及具有免疫调节作用的乳杆菌属菌、含有该菌的组合物及具有免疫调节作用的乳酸菌的高效分离方法。
技术介绍
已知乳酸菌具有整肠作用、免疫赋活作用等有益的生理活性，且是具有健康功能的原材料，所以一般消费者对其的认知度也很高。此种具有有益生理活性的乳酸菌的大多数是从发酵乳制品、肠道分离的来自动物原材料的乳酸菌。另外，在以植物原材料为分离源的植物性乳酸菌中也发现了具有免疫赋活作用的菌株。例如，日本特开平10-167972号公报(公开日：平成10年6月23日)中记载了具有免疫赋活作用的乳酸菌植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)L-137株。且已知从京都传统的腌菜类“酸萝卜咸菜”(日语原名：「すぐき」)中分离的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)Labre株，从“紫苏淹”(日语原名：「しば漬け」)中分离的戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)DA74N株等也具有免疫赋活作用[参照：(1)日本特公平7-55908号公报(公开日：平成6年7月26日)，(2)Pasken Journal 15.21-26，2002，岸惇子、小久保AOI(日语原名：ぁおい)、赤谷薰、扇谷ERI子(日语原名：ぇり子)、藤田哲也、岸田纲太郎：用于有用乳酸菌选定的筛选1)(日语原名：有用乳酸菌選定のためのスクリ一ニング1))人体末梢血液中植物性乳酸菌的体外(in vitro)免疫赋活作用，(3)第6次肠内细菌学会(2002.05.30-31)要旨，赤谷薰、岸惇子、扇谷ERI子(日语原名：ぇり子)、小久保AOI(日语原名：ぁぉい)、藤田哲也、岸田纲太郎)]。已知以植物原材料为分离源的植物性乳酸菌与腌菜类、酒类的酿造有密切的关系，可从酿造工序中分离大量的菌。除上述以外，还存在具有免疫赋活作用等有价值的生理活性的菌株，例如，从酒类酿造工序的葡萄酒酿造工序中分离的、分离频率高的菌株中可列举植物乳杆菌。但是，对于该种从酒类酿造工序中分离的菌，主要进行的研究是有关其在酿造过程中的作用、其对香味等所起的作用，对于菌本身对生物体所产生的作用基本未加以研究。因此，希望从酒类酿造工序中分离的乳酸菌中找到具有有价值的生理活性的菌株。此外，使用植物性乳酸菌时有时会产生独特的发酵味，所以根据制造的食品种类，有时需考虑感官方面的问题。
技术实现思路
本专利技术鉴于上述现状，以提供具有免疫调节作用的乳酸菌、含有该菌的组合物及分离具有免疫调节作用的乳酸菌的方法为目的。-->本专利技术者为解决所涉及的课题，对于从酒类酿造工序的产物中分离的乳酸菌测定了其免疫调节作用，对于从其中选择的属于植物乳杆菌及短乳杆菌的乳酸菌，更加详细地测定了其免疫调节作用。其结果发现，该乳酸菌具有强免疫调节作用，且使用该乳酸菌的发酵产物呈现出良好的香味，从而完成了本专利技术。具体地说，对于从酒类酿造工序的产物中分离的乳酸菌来说，Th1型细胞因子白细胞介素12(以下简写为“IL-12”)诱导能力的比较结果，发现可高效分离具有免疫调节作用的乳酸菌，特别是还发现了用属于植物乳杆菌及短乳杆菌的菌株对由小鼠制备的腹腔巨噬细胞进行体外处理时，可使IL-12的产生增加。且还证实了向小鼠腹腔内进行加热菌液的体内给药，也可诱导Th1型细胞因子IL-12的产生。即本专利技术涉及酒类制造工序中的含有微生物的成分中所含有的具有免疫调节作用的乳杆菌属菌，特别是含有微生物的成分是发酵醪液，酒类制造工序是葡萄酒的酿造工序。此外，本专利技术涉及具有免疫调节作用的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)或短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。且本专利技术中，具有免疫调节作用的植物乳杆菌是植物乳杆菌SAM2446株(FERM ABP-10438)或短乳杆菌是短乳杆菌SAM2447株(FERM ABP-10439)。本专利技术还涉及具有免疫调节作用的组合物，其含有酒类制造工序中的含有微生物的成分中所含有的具有免疫调节作用的乳杆菌属菌。特别是所述组合物是饮食品或医药品。本专利技术还进一步涉及分离具有免疫调节作用的乳酸菌的方法，其包括从酒类制造工序中的含有微生物的成分中分离微生物的工序、测定所分离的各微生物的免疫调节作用的工序及筛选免疫调节作用强的乳酸菌的工序。特别是含有微生物的成分是发酵醪液，酒类制造工序是葡萄酒的酿造工序。附图说明图1表示测定将12种乳酸菌向小鼠腹腔内给药后血清IL-12浓度的结果。图2表示经解读的SAM2446株的16SrRNA基因序列。下线部表示与植物乳杆菌JCM1149T(ATCC14917)的序列不同的部分。图3表示经解读的SAM2447株的16SrRNA基因序列。下线部表示与短乳杆菌JCM1059T(ATCC14869)的序列不同的部分。图4表示NK活性的测定结果。图5表示IFN-γ浓度的测定结果。具体实施方式<乳杆菌属菌>乳杆菌属菌是乳酸菌的一种，本专利技术涉及酒类制造工序中的含有微生物的成分中所含有的具有免疫调节作用的乳杆菌属菌。乳杆菌属菌优选属于植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)或短乳杆菌(Lactobacillus brevis)的乳杆菌属菌。乳杆菌属菌的菌学性质如《伯杰氏系统细菌学手册》(BERGEY’S MANUAL of--> Systematic Bacteriology)(第1卷1984年、第2卷1986年、第3卷1989年、第4卷1989年)中所记载。本专利技术涉及的乳酸菌的代表菌可为植物乳杆菌SAM2446株及短乳杆菌SAM2447株。本菌保藏于独立行政法人产业技术综合研究所、专利生物保藏中心(日本国茨城县筑波市东1丁目1番地1中央第6)，其保藏号为FERMABP-10438及FERM ABP-10439。植物乳杆菌SAM2446株(FERM ABP-10438)的菌学性质如表1所示，短乳杆菌SAM2447株(FERM ABP-10439)的菌学性质如表2所示。表1植物乳杆菌SAM 2446株(FERM ABP-10438)表2短乳杆菌SAM 2447株(FERM ABP-10439)-->本专利技术中，“具有免疫调节作用”是指在通常状态或免疫功能下降时，具有免疫活化的作用(免疫赋活作用)、或免疫功能过度亢进时免疫抑制从而形成适当的免疫状态的作用(免疫抑制作用)、使细胞免疫和体液免疫的平衡最佳化的作用中的至少任一种作用。免疫调节作用，例如可为细胞因子产生的促进或抑制作用、淋巴细胞活化作用、NK(自然杀伤细胞)活性增强作用、Th1/Th2平衡改善作用、免疫降低抑制作用、抗过敏作用等，但不限于此。本专利技术的乳杆菌属菌，可通过从酒类制造工序中的含有微生物的成分中分离微生物、测定所分离的各微生物的免疫调节作用、筛选免疫调节作用强的菌来获得。本专利技术中，“酒类制造工序”是指与酒类制造有关的一系列工序。在此，“酒类”中也包括葡萄酒等的果实酒，啤酒、发泡酒等的麦芽发酵饮料，清酒、威士忌等的蒸馏酒等。含有微生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有免疫调节作用的短乳杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｂｒｅｖｉｓ），其含有于葡萄酒酿造工序的发酵醪液中。

【技术特征摘要】
JP 2005-10-31 2005-3177341.具有免疫调节作用的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)，其含有于葡萄酒酿造工序的发酵醪液中。2.权利要求1中所述的菌，其中，短乳杆菌不具有D-木糖同化性。3.权利要求1中所述的菌，其中，短乳杆菌是短乳杆菌(Lactobacillus brevis...

【专利技术属性】
技术研发人员：山村孝子，饭野妙子，芦刈匡子，阿部圭一，
申请(专利权)人：三得利控股株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]