【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体涉及一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法。
技术介绍
1、随着人们对发酵乳需求的逐渐增大，市场上发酵乳的品类也越来越多。活性乳饮料是一种牛奶经乳酸菌发酵且含有活性乳酸菌的乳饮料，活性乳饮料中的牛乳经乳酸菌发酵后，可使乳中的蛋白质及脂肪结构发生变化，有利于人体的吸收。活性乳饮料制品种类多、营养全面、风味独特、比牛乳更易被人体吸收利用，具有抑制肠道腐败菌的生长繁殖、促进胃肠蠕动和胃液分泌、克服乳糖不耐症、提高人体免疫力等功效。活性乳饮料是近几年创新出的产品，与普通发酵乳相比主要的不同点是色泽和风味，这种发酵乳在不投放任何色素的情况下，仅通过工艺和配料，使基料发生美拉德反应，而呈现出诱人的暖色调，并具有独特风味。
2、γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid，简称gaba)，是一种非蛋白氨基酸，广泛分布于自然界、动植物及微生物中。在生物体内由l-谷氨酸(l-glu)或者l-谷氨酸钠(l-msg)经过谷氨酸脱羧酶的作用，脱去一分子羧基而形成。在上世纪八十年代，robert小组首先在动物脑部浸提液中发现γ-氨基丁酸的存在。而后日本厚生省、欧洲食品安全局(efsa)和美国食品药品管理局(fda)承认乳酸菌发酵生产的gaba为天然食品添加剂。2009年9月，我国卫生部批准γ-氨基丁酸为新资源食品。
3、γ-氨基丁酸是具有较高活性的天然存在的氨基酸，其生理功能包括血压的调节、情绪的控制、加强记忆、抗应激等，天然γ-氨基丁酸人体每日摄入量30-100mg为宜，每日摄入量应≤
4、目前合成γ-氨基丁酸的方法分为两大类化学法和生物法。化学法主要是采用吡咯烷酮在剧烈的化学反应条件下，环状键被打开，与其它原料开环、结合得到的化学合成gaba，过程繁琐，药品添加量多，能得到食品级gaba较少。生物法包括植物法和微生物法，生物法主要是发芽的糙米和豆类，含有大量的γ-氨基丁酸；微生物法，微生物由于生长周期短，繁殖速度快，近些年广泛被应用于生产γ-氨基丁酸。目前发酵法生产的gaba产品多成黄色，有气味，纯度不高于90％，天然菌株在发酵乳中产γ-氨基丁酸少，发酵性能差。
5、现有技术中公开了一种提高发酵乳中γ-氨基丁酸含量的发酵剂及富含γ-氨基丁酸的发酵乳的制备方法(专利申请号：202010636459.6，公开号：cn111733105a)，该专利在发酵剂中，主发酵菌利用谷氨酸钠代谢合成γ-氨基丁酸，大幅提高发酵产物中γ-氨基丁酸的含量，协同共生菌促进主发酵菌的生长，间接提高γ-氨基丁酸产量，同时缩短发酵时间，加速酸化，降低发酵产物的ph值。将谷氨酸钠溶解于原料乳，使终浓度不低于10g/l，杀菌后接种发酵剂发酵48h～72h，主发酵菌的接种量均为0.5～1×106cfu/ml，协同共生菌接种量为主发酵菌的0.5～2倍。但现有的微生物发酵法都要通过发酵菌利用谷氨酸钠代谢合成γ-氨基丁酸，因此必须添加谷氨酸钠或其它一些能代谢合成γ-氨基丁酸的物质。由于在发酵时添加了谷氨酸钠类的代谢物质，容易造成产品的沉淀离心率较高，一般超过1.0％，不利于产品保藏期间的稳定性，而且影响产品口感，谷氨酸钠作为γ-氨基丁酸的反应物，发生反应对γ-氨基丁酸的纯度会受到影响。
6、因此研究开发一种富含天然γ-氨基丁酸活性乳饮料，兼具酸度稳定，保质期内活菌数≥106cfu/ml，产品沉淀离心率小于1.0％，不添加转化因子就能使γ-氨基丁酸满足人体每日安全摄入量，对开发安全健康的γ-氨基丁酸功能性活性乳饮料具有十分重要的意义。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的上述不足，本专利技术要解决的技术问题是利用高产γ-氨基丁酸的德氏乳杆菌保加利亚亚种lsr-l-l4菌株，通过富集培养和两次发酵后，制得富含γ-氨基丁酸的活性乳饮料，而且零脂肪，产品终点酸度稳定在64-68°t，产品沉淀离心率≤0.47％，有较好的稳定性，产品中γ-氨基丁酸含量，满足人体每日所需，产品具有较好的风味。
2、为实现上述专利技术目的，本专利技术采用下述技术方案：
3、一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：
4、1)活化菌株：在mrs液体培养基上将德氏乳杆菌保加利亚亚种lsr-l-l4菌株活化复壮至第3～12代，所述lsr-l-l4菌株保藏编号为cgmccno.14752；
5、2)一次发酵：将脱脂奶粉稀释至蛋白质含量为3.6～3.8％后，灭菌冷却，将活化后lsr-l-l4菌株按质量比为1～3％的添加量接种到稀释制备好的脱脂奶粉中，35～45℃下发酵14～16h，发酵到酸度为114～118°t时停止发酵，制得中间发酵剂；
6、3)制备活性乳饮料基料：将制备活性乳饮料基料用的脱脂奶粉，稀释至蛋白质含量为4.1～4.3％，向其添加质量比为1～2％的果葡糖浆，灭菌冷却备用；
7、4)二次发酵：将步骤2)制备好的中间发酵剂，按质量比为2％～4％的添加量添加至活性乳饮料基料中，35～45℃发酵86～90h，发酵到酸度为214～218°t时停止发酵，均质冷却，制得活性乳饮料发酵液；
8、5)配制调配液：在水中加入蔗糖和果葡糖浆，蔗糖的质量浓度为9～10％，果葡糖浆的质量浓度为2～3％，灭菌冷却，制得调配液；
9、6)调配、均质：将步骤4)制得的活性乳饮料发酵液，用步骤5)制得的调配液稀释成活性乳饮料，活性乳饮料发酵液与调配液的体积比为1：2.5～3.0；
10、优选地，在所述的步骤2)一次发酵中，lsr-l-l4菌株的添加量为按质量比2％的添加量；
11、优选地，在所述的步骤2)一次发酵中，发酵温度为40℃，时间为15h；
12、优选地，在所述的步骤4)二次发酵中，中间发酵剂的添加量为按质量比3％的添加量；
13、优选地，在所述的步骤4)二次发酵中，发酵温度为40℃，时间为88h；
14、优选地，在所述的步骤4)二次发酵中均质的压力为15mpa，在步骤6)调配、均质中的压力为20mpa。
15、本专利技术使用的德氏乳杆菌保加利亚亚种lsr-l-l4菌株的保藏编号为cgmccno.14752，其保藏说明如下：
16、分类命名：德氏乳杆菌保加利亚亚种；
17、拉丁名：lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus；
18、参椐的生物材料(株)：lsr-l-l4；
19、保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；
20、保藏机构简称：cgmcc；
21、地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；
22、保藏日期：2017年09月26日；...
【技术保护点】
1.一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：
2.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，在所述的步骤2）一次发酵中，LSR-L-L4菌株的添加量为按质量比2%的添加量。
3.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，在所述的步骤2）一次发酵中，发酵温度为40℃，时间为15h。
4.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，在所述的步骤4）二次发酵中，中间发酵剂的添加量为按质量比3%的添加量。
5.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，在所述的步骤4）二次发酵中，所述发酵温度为40℃，时间为88h。
6.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，在所述的步骤4）二次发酵中，均质的压力为15Mpa，在步骤6）调配、均质中的压力为20Mpa。
【技术特征摘要】
1.一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：
2.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，在所述的步骤2）一次发酵中，lsr-l-l4菌株的添加量为按质量比2%的添加量。
3.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基丁酸活性乳饮料的制备方法，其特征在于，在所述的步骤2）一次发酵中，发酵温度为40℃，时间为15h。
4.如权利要求1所述的一种富含γ-氨基...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵世伟，张丽波，李晓美，肖梦林，陈敏，李露梅，郝亚琴，刘雪英，字社莲，赵锦，
申请(专利权)人：大理来思尔乳业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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