【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开提供可用于治疗和/或预防听力损失的组合物和方法。更具体地，本公开提供可用于治疗和/或预防由strc基因的基因突变所引起的听力损失的组合物和方法。序列表本申请含有序列表，该序列表已经以ascii格式电子提交并且通过引用以其整体并入本文。所述ascii复本创建于2022年5月14日，命名为bn00002_0051_sl_st25.txt，并且大小为56kb。
技术介绍
1、听力损失是人类最常见的感官缺陷。根据世界卫生组织(who)发布的2018年致残性听力损失严重程度估计，全球有4.66亿人患有致残性听力损失(4.32亿成年人和3400万儿童)。到2030年，患有致残性听力损失的人数将增长至6.3亿，并且到2050年将超过9亿。患有致残性听力损失的人中有90％以上(4.2亿)居住在世界低收入地区(who全球听力损失盛行率估计，预防耳聋，who 2018)。
2、研究已经证明，超过50％的习语前聋是遗传性的。此类先天性听力损失和耳聋可能是传导性的、感音神经性的或两者结合的；综合征性的(与外耳或其他器官的畸形相关联或者与涉及其他器官系统的医学问题相关联)或非综合征性的(与外耳的可见异常或任何相关医学问题不相关联)；以及习语前的(在语言发育之前)或习语后的(在语言发育之后)。此外，研究已经显示，超过70％的先天性听力损失是非综合征性的。针对非综合征性耳聋的不同基因座被指定为dfn(针对deafness(聋人))。基于遗传模式来命名基因座：dfna(常染色体显性)、dfnb(常染色体隐性)和dfnx(x染色体连锁)。上述命
3、目前，针对那些患有致残性听力损失的人的治疗选项是听力辅助或人工耳蜗。人工耳蜗植入是一种常见的治疗方案，其相关医疗费用高，每位患者的终身费用超过1,000,000美元。人工耳蜗和听力辅助的终身费用对大多数人，并且特别是对于那些居住在低收入地区(患有致残性听力损失的人中大多数居住在那里)的人而言是令人望而却步的。遗憾的是，目前没有批准的治疗剂用于预防或治疗听力损失或耳聋。因此，亟需治疗性选项来提供针对听力损失的人工耳蜗和听力辅助的成本有效替代方案。
技术实现思路
1、本公开至少部分地基于以下发现：全长或接近全长的硬纤毛蛋白(stereocilin)(strc)可以在内耳特异性启动子(例如，小鼠或人myo7a启动子)的控制下被并入慢病毒载体中以在内耳细胞中产生strc的强劲表达，这能够拯救与strc失能突变相关联的表型。本文的技术提供经由基因疗法来拯救哺乳动物(例如，人)的strc失能突变的能力。本公开向罹患由strc突变所致的疾患的患者提供用于恢复strc功能的组合物和方法。
2、一方面，本公开提供一种慢病毒表达载体，其包括编码硬纤毛蛋白(strc)的核酸序列或其一部分；和可操作地链接至所述核酸序列的启动子。
3、在实施方案中，慢病毒表达载体是第三代自灭活(sin)慢病毒载体。在实施方案中，sin慢病毒载体缺乏野生型慢病毒长末端重复序列(ltr)增强子和启动子元件。
4、在实施方案中，启动子选自由strc启动子、myo7a启动子、人巨细胞病毒(hcmv)启动子、巨细胞病毒/鸡β-肌动蛋白(cba)启动子和pou4f3启动子组成的组。在实施方案中，启动子是myo7a。在实施方案中，启动子与seq id no:4或seq id no:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。任选地，myo7a启动子进一步包括myo7a增强子。任选地，myo7a启动子进一步包括myo7a增强子。在其中启动子与seq id no:4或seq id no:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的实施方案中，启动子可任选地进一步包括与seq id no:5为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的myo7a增强子。
5、在实施方案中，核酸与seq id no:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。在实施方案中，核酸编码与seq id no:2为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的多肽。
6、一方面，本公开提供一种在治疗或预防听力损失的方法中使用的药物组合物，该药物组合物包含慢病毒表达载体，所述慢病毒表达载体包含与seq id no:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的核酸，其中该核酸序列可操作地链接至与seq id no:4或seq id no:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的核酸。
7、一方面，本公开提供一种细胞，其包含：慢病毒表达载体，所述慢病毒表达载体包含seq id no:1的核酸序列；和可操作地链接至该核酸的启动子。
8、在实施方案中，核酸与seq id no:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
9、在实施方案中，启动子选自由strc启动子、myo7a启动子、人巨细胞病毒(hcmv)启动子、巨细胞病毒/鸡β-肌动蛋白(cba)启动子或pou4f3启动子组成的组。
10、在实施方案中，启动子是myo7a。在实施方案中，启动子与seq id no:4或seq idno:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
11、在一些实施方案中，细胞是干细胞。在实施方案中，干细胞是诱导多能干细胞。
12、一方面，本公开提供一种用于治疗或预防听力损失的方法，该方法包括向有此需要的受试者给药有效量的根据权利要求1所述的慢病毒载体的步骤。
13、在实施方案中，启动子选自由strc启动子、myo7a启动子、人巨细胞病毒(hcmv)启动子、巨细胞病毒/鸡β-肌动蛋白(cba)启动子或pou4f3启动子组成的组。在实施方案中，启动子是myo7a。在实施方案中，启动子与seq id no:4或seq id no:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
14、在实施方案中，表达载体通过注射至所述受试者的内耳中来给药。
15、在实施方案中，注射方法选自由耳蜗造口术、圆窗膜、内淋巴囊、中阶、小管切开术、经由内淋巴囊的中阶、或其组合组成的组。
16、在实施方案中，受试者具有与听力损失相关联的一种或多种遗传风险因素。
17、在实施方案中，遗传风险因素中的一种选自由strc基因中的突变组成的组。
18、在实施方案中，受试者不表现出听力损失的任何临床指标。
19、一方面，本公开提供一种转基因小鼠，其包括引起听力损失的突变/变异，所述突变/变异选自由人的strc基因中的突变/变异组成的组。
20、本文公开一种表达载体，其包括seq id no:1或seq id本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种慢病毒表达载体，其包含：
2.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述慢病毒表达载体是第三代自灭活(SIN)慢病毒载体。
3.根据权利要求2所述的慢病毒表达载体，其中所述SIN慢病毒载体缺乏野生型慢病毒长末端重复序列(LTR)增强子和启动子元件。
4.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子选自由STRC启动子、Myo7a启动子、人巨细胞病毒(HCMV)启动子、巨细胞病毒/鸡β-肌动蛋白(CBA)启动子和Pou4f3启动子组成的组。
5.根据权利要求4所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子是Myo7a，任选地进一步包含Myo7a增强子。
6.根据权利要求5所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子与SEQ ID NO:4或SEQ IDNO:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同，任选地进一步包含与SEQ ID NO:5为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的Myo7a增强子。
7.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述核酸与SEQ ID NO:1为95％、
8.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述核酸编码与SEQ ID NO:2为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的多肽。
9.一种在治疗或预防听力损失的方法中使用的药物组合物，所述药物组合物包含慢病毒表达载体，所述慢病毒表达载体包含与SEQ ID NO:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的核酸，其中所述核酸序列可操作地链接至与SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的核酸。
10.一种细胞，其包含：慢病毒表达载体，所述慢病毒表达载体包含SEQ ID NO:1的核酸序列；和可操作地链接至所述核酸的启动子。
11.根据权利要求10所述的细胞，其中所述核酸与SEQ ID NO:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
12.根据权利要求10所述的细胞，其中所述启动子选自由STRC启动子、Myo7a启动子、人巨细胞病毒(HCMV)启动子、巨细胞病毒/鸡β-肌动蛋白(CBA)启动子或Pou4f3启动子组成的组。
13.根据权利要求12所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子是Myo7a。
14.根据权利要求13所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子与SEQ ID NO:4或SEQ IDNO:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
15.根据权利要求10所述的细胞，其中所述细胞是干细胞。
16.根据权利要求15所述的细胞，其中所述干细胞是诱导多能干细胞。
17.一种用于治疗或预防听力损失的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给药有效量的根据权利要求1所述的慢病毒载体。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述启动子选自由STRC启动子、Myo7a启动子、人巨细胞病毒(HCMV)启动子、巨细胞病毒/鸡β-肌动蛋白(CBA)启动子或Pou4f3启动子组成的组。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述启动子是Myo7a。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述启动子与SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
21.根据权利要求17所述的方法，其中所述表达载体通过注射至所述受试者的内耳中来给药。
22.根据权利要求21所述的方法，其中所述注射方法选自由耳蜗造口术、圆窗膜、内淋巴囊、中阶、小管切开术、经由内淋巴囊的中阶、或其组合组成的组。
23.根据权利要求17所述的方法，其中所述受试者具有与听力损失相关联的一种或多种遗传风险因素。
24.根据权利要求23所述的方法，其中所述遗传风险因素中的一种选自由STRC基因中的突变组成的组。
25.根据权利要求23所述的方法，其中所述受试者不表现出听力损失的任何临床指标。
26.一种转基因小鼠，其包括引起听力损失的突变/变异，所述突变/变异选自由人的STRC基因中的突变/变异组成的组。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种慢病毒表达载体，其包含：
2.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述慢病毒表达载体是第三代自灭活(sin)慢病毒载体。
3.根据权利要求2所述的慢病毒表达载体，其中所述sin慢病毒载体缺乏野生型慢病毒长末端重复序列(ltr)增强子和启动子元件。
4.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子选自由strc启动子、myo7a启动子、人巨细胞病毒(hcmv)启动子、巨细胞病毒/鸡β-肌动蛋白(cba)启动子和pou4f3启动子组成的组。
5.根据权利要求4所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子是myo7a，任选地进一步包含myo7a增强子。
6.根据权利要求5所述的慢病毒表达载体，其中所述启动子与seq id no:4或seq idno:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同，任选地进一步包含与seq id no:5为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的myo7a增强子。
7.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述核酸与seq id no:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
8.根据权利要求1所述的慢病毒表达载体，其中所述核酸编码与seq id no:2为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的多肽。
9.一种在治疗或预防听力损失的方法中使用的药物组合物，所述药物组合物包含慢病毒表达载体，所述慢病毒表达载体包含与seq id no:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的核酸，其中所述核酸序列可操作地链接至与seq id no:4或seq id no:6为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的核酸。
10.一种细胞，其包含：慢病毒表达载体，所述慢病毒表达载体包含seq id no:1的核酸序列；和可操作地链接至所述核酸的启动子。
11.根据权利要求10所述的细胞，其中所述核酸与seq id no:1为95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。
12.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：H·斯特雷克，
申请(专利权)人：援救听觉股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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