【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物制药领域，更具体地，涉及一种人胰岛素类似物，即德谷胰岛素晶体的制备方法。
技术介绍
1、糖尿病是全球范围内威胁人类健康的一大疾病。随着人民生活水平的提高、生活方式的改变以及老龄化进程的加快，糖尿病的患病率呈快速上升趋势。糖尿病的急、慢性并发症，尤其是慢性并发症累及多个器官，致残、致死率高，严重影响患者的身心健康，并给个人、家庭和社会带来沉重的负担。
2、胰岛素治疗是治疗糖尿病并使血糖得到良好控制的重要手段。上世纪70年代，人们通过基因工程技术开发出了重组人膜岛素。后来，为了获得速效或长效等不同作用时间曲线的药物，人们又相继开发出了一系列的胰岛素类似物。目前己知的胰岛素类似物有速效的赖脯胰岛素、门冬胰岛素，长效的甘精胰岛素、地特胰岛素、德谷胰岛素。
3、其中德谷胰岛素是一种新型超长效胰岛素，其分子结构特点是人胰岛素去掉b链30位苏氨酸，通过1个谷氨酸分子将16c脂肪二酸侧链连接在b29位赖氨酸残基。德谷胰岛素的药效学曲线波动很小，可在24h内保持平稳。
4、结晶是胰岛素类物质原料药生产的重要环节。结晶后的德谷胰岛素晶体具有颗粒大、沉降快、易于上清分离、冷冻干燥时间短的特点，更适合工业化生产；并且以固态晶体形式存在的原料药，相比较于无定型固体粉末，产品稳定性更好。
5、cn 104892749 a专利提供了一种德谷胰岛素的结晶方法。专利中制备德谷胰岛素晶体的方法为：(1)配制含有0.05～0.27m组氨酸、1～8g/l德谷胰岛素、体积百分比为8％～15％的有机溶剂、质
6、因此本领域需要专利技术一种回收率高、操作方便、成本低、晶体稳定性高的德谷胰岛素结晶制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的就是提供一种回收率高、操作方便、成本低、晶体稳定性高的德谷胰岛素结晶方法。
2、在本专利技术的第一方面，提供了一种德谷胰岛素晶体的制备方法，所述方法包括以下步骤：
3、(1)提供结晶液，所述结晶液由德谷胰岛素、盐类物质、酚类物质、锌盐、ph调节剂和溶剂组成；
4、所述德谷胰岛素以含有德谷胰岛素的层析收集液的形式加入所述结晶液中；所述德谷胰岛素的层析收集液中包括乙腈；
5、(2)结晶得到所述德谷胰岛素晶体。
6、应当理解，本专利技术中德谷胰岛素晶体的制备方法的步骤并不限于上述步骤，在步骤(1)之前，步骤(1)和(2)之间，步骤(2)之后还可以包括其他额外的步骤，且均在本专利技术的保护范围之内。在另一优选例中，所述德谷胰岛素层析收集液通过反相层析柱洗脱得到。
7、在另一优选例中，所述结晶液在15～28℃下配制，优选18-25℃。
8、在另一优选例中，所述德谷胰岛素层析收集液为制备德谷胰岛素过程中得到的纯化收集液。
9、在另一优选例中，所述德谷胰岛素层析收集液中包括德谷胰岛素、乙腈、乙酸铵和少量的杂质。
10、在另一优选例中，所述德谷胰岛素层析收集液中基本由德谷胰岛素、乙腈、乙酸铵和少量的杂质组成。
11、在另一优选例中，所述德谷胰岛素层析收集液包括选自下组的一个或多个特征：
12、(a)德谷胰岛素的浓度为0.5～15mg/ml，优选2～10mg/ml；
13、(b)乙腈的体积分数为10％～40％，优选22％～35％，更优选24％～30％。
14、在另一优选例中，所述德谷胰岛素层析收集液中，德谷胰岛素的浓度为0.5～15mg/ml，优选2～10mg/ml。
15、在另一优选例中，所述德谷胰岛素层析收集液中，乙酸铵的含量为3.5～4.0mol/l。
16、在另一优选例中，所述步骤(s1)还包括：将所述德谷胰岛素层析收集液浓缩或稀释，再加入所述结晶液中。
17、在另一优选例中，所述结晶液包括一个或多个选自下组的特征：
18、(a)所述酚类物质选自下组：苯酚、邻苯甲酚、间苯甲酚、对苯甲酚、间乙基苯酚，或其组合，优选苯酚；
19、(b)所述盐类物质选自下组：氯化钠、氯化钾、乙酸铵、乙酸钠、柠檬酸铵、柠檬酸钠，或其组合，优选氯化钠；
20、(c)所述锌盐选自下组：氯化锌、溴化锌、碘化锌、乙酸锌、氧化锌、硫酸锌，或其组合，优选为无机锌盐，更优选氯化锌；
21、(d)所述ph调节剂为碱性调节剂或酸性调节剂，其中所述碱性调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、氨水，优选氢氧化钠；所述酸性调节剂选自盐酸、乙酸、柠檬酸，优选盐酸；
22、(e)所述结晶液的ph为6.6-8，优选6.6～7.5，更优选6.8～7.2，例如6.8、7.0、7.05、7.1、7.15；
23、(f)所述溶剂包括水和乙腈。
24、在另一优选例中，所述结晶液由德谷胰岛素或其溶液、盐类物质溶液、酚类物质溶液、补充溶剂、ph调节剂溶液和锌盐溶液组成。
25、在另一优选例中，所述结晶液的配制过程如下：向德谷胰岛素或其溶液中加入盐类物质溶液、酚类物质溶液、补充溶剂、ph调节剂溶液和锌盐溶液，得到结晶液。
26、在另一优选例中，所述盐类物质溶液包括盐类物质和第一溶剂。
27、在另一优选例中，所述第一溶剂为水。
28、在另一优选例中，所述盐类物质在盐类物质溶液中的浓度为1～4mol/l，优选2～4mol/l，例如3mol/l、4mol/l。
29、在另一优选例中，所述酚类物质溶液包括酚类物质和第二溶剂。
30、在另一优选例中，所述第二溶剂选自下组：乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇，或其组合。
31、在另一优选例中，所述酚类物质在酚类物质溶液中的浓度为30％～80％(g/ml)，优选50％～60％(g/ml)。
32、在另一优选例中，所述补充溶剂为水和乙腈。
33、在另一优选例中，当所述胰岛素以层析收集液加入结晶液时，无需补加乙腈。
34、在另一优选例中，当所述胰岛素以层析收集液加入结晶液时，所述补充溶剂为水。
35、在另一优选例中，所述ph调节剂溶液包括ph调节剂和第三溶剂。
36、在另一优选例中，所述第三溶剂为水。
37、在另一优选例中，所述锌盐溶液包括锌盐和第四溶剂。
38、在另一优选例中，所述第四溶剂为水。
39、在另一优选例中，所述结晶液包括一个或多个选自下组的特征：
40、(a)所述德谷胰岛素在所述结本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种德谷胰岛素晶体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述德谷胰岛素层析收集液中包括德谷胰岛素、乙腈、乙酸铵和少量的杂质。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述德谷胰岛素层析收集液包括选自下组的一个或多个特征：
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述结晶液包括一个或多个选自下组的特征：
5.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述结晶液包括一个或多个选自下组的特征：
6.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述结晶在0～10℃静置进行4～24h，优选6～20h，更优选12～20h。
7.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述方法包括：在15～28℃条件下配制结晶液，所述结晶液包括2～8g/L德谷胰岛素、0.05％～1.0％g/ml酚类物质、0.5～1.5mol/L盐类物质、10％～20％(ml/ml)有机溶剂、锌盐与德谷胰岛素摩尔比(0.5～5)：1；调节pH至6.6～8，然后降
8.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述结晶液包括一个或多个选自下组的特征：
9.一种德谷胰岛素晶体，其特征在于，所述德谷胰岛素晶体由权利要求1所述的方法制备得到，优选的，所述德谷胰岛素晶体为棒状晶体。
10.如权利要求9所述的德谷胰岛素晶体，其特征在于，所述德谷胰岛素晶体具有选自下组的一个或多个特征：
...【技术特征摘要】
1.一种德谷胰岛素晶体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述德谷胰岛素层析收集液中包括德谷胰岛素、乙腈、乙酸铵和少量的杂质。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述德谷胰岛素层析收集液包括选自下组的一个或多个特征：
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述结晶液包括一个或多个选自下组的特征：
5.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述结晶液包括一个或多个选自下组的特征：
6.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述结晶在0～10℃静置进行4～24h，优选6～20h，更优选12～20h。
7.如权利要求1-4中任一项所...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨接运，瞿书雄，宋成宇，
申请(专利权)人：宁波鲲鹏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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