本发明专利技术提供了一种盐酸贝那普利对映异构体的检测方法，涉及药物分析检测技术领域。本发明专利技术采用纤维素衍生物涂敷型手性色谱柱，以硫酸铵‑磷酸缓冲液（缓冲液中硫酸铵的浓度为10~30mmol/L，40~60v/v%）‑乙腈（20~40v/v%）‑异丙醇为流动相，流动相中盐浓度低，能够显著降低系统堵塞风险；本发明专利技术采用的流动相中有机相与色谱柱填料相匹配，显著延长了色谱柱使用寿命。而且，本发明专利技术采用反相色谱法结合手性色谱柱对盐酸贝那普利中对映异构体（RR‑异构体，杂质A）的含量进行检测分析，能够实现杂质A与盐酸贝那普利快速、有效分离，分离度大，检测结果准确度高、精确度高、灵敏度高，操作简便快捷，适宜推广应用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析检测，具体涉及一种盐酸贝那普利对映异构体的检测方法。
技术介绍
1、盐酸贝那普利是cba-geigy公司开发的一种不含巯基的竞争性血管紧张素转化酶（ace）抑制剂，化学名为(1's,3s)-3-{[1'-(乙氧羰基)-3'-苯丙基]-氨基}-2,3,4,5-四氢-2-氧代-1h-1-苯并氮䓬-1-乙酸单盐酸盐。盐酸贝那普利分子中有两个手性中心，有4个光学异构体，其中，ss-异构体的药物活性最强，是sr-异构体的30倍，是rs-异构体的160倍，而rr-异构体（杂质a）即使在3×10-5mol/l也无活性。通过对原料药中杂质a的研究，以及对制剂生产过程中杂质的产生、转化或清除过程研究，了解药品质量风险的过程，为优化、确认处方、工艺、包装、贮藏条件提供支持性信息，并据此建立杂质a的控制策略—揭示产品的质量，了解产品的质量风险，实现对杂质a全过程风险管理。因此检测盐酸贝那普利中杂质a的含量对于控制盐酸贝那普利的质量具有重要的意义。
2、美国药典（usp）以及英国药典（bp）公开了一种盐酸贝那普利中杂质a的高效液相色谱检测方法，采用球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相的色谱柱，以磷酸盐缓冲溶液（ph值=6.0，磷酸二氢钾浓度为71mmol/l，磷酸氢二钠七水合物浓度为10mmol/l）和甲醇（体积比为80:20）的混合溶液为流动相，以流动相为稀释剂。然而，上述检测方法使用的流动相中盐浓度高会堵塞色谱柱，且其色谱柱填料与有机相比例不匹配会对色谱柱造成极大的损坏，导致色谱柱基本是一次性的，色谱柱使用寿命短。</p>
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种盐酸贝那普利对映异构体的检测方法。本专利技术提供的检测方法采用纤维素衍生物涂敷型手性色谱柱，采用的流动相的盐浓度低，流动相中有机相与色谱柱填料相匹配，色谱柱使用寿命长。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种盐酸贝那普利对映异构体的检测方法，包括以下步骤：
4、将待测盐酸贝那普利样品溶解于乙腈水溶液中，得到待测样品液；
5、将所述待测样品液进行反相色谱检测，记录色谱图，得到待测盐酸贝那普利样品中对映异构体的含量检测结果；
6、所述反相色谱检测的色谱柱为纤维素衍生物涂敷型手性色谱柱，流动相为硫酸铵-磷酸缓冲液、乙腈和异丙醇的混合溶液，所述硫酸铵-磷酸缓冲液中硫酸铵的浓度为10~30mmol/l；所述流动相中硫酸铵-磷酸缓冲液的体积分数为40~60%，乙腈的体积分数为20~40%；
7、所述对映异构体包括rr-异构体。
8、优选的，所述待测样品液中盐酸贝那普利的浓度为0.5~2mg/ml。
9、优选的，所述乙腈水溶液中乙腈的体积分数为30~50%。
10、优选的，所述硫酸铵-磷酸缓冲液的ph值为3~3.4。
11、优选的，所述反相色谱检测的洗脱方式为等度洗脱。
12、优选的，所述反相色谱检测的流动相流速为0.3~0.7ml/min。
13、优选的，所述反相色谱检测的柱温为10~35℃。
14、优选的，所述反相色谱检测的检测波长为235~245nm。
15、优选的，所述反相色谱检测的进样体积为5~20μl。
16、优选的，所述待测盐酸贝那普利样品包括盐酸贝那普利原料药。
17、本专利技术采用纤维素衍生物涂敷型手性色谱柱，以硫酸铵-磷酸缓冲液（缓冲液中硫酸铵的浓度为10~30mmol/l，40~60v/v%）-乙腈（20~40v/v%）-异丙醇为流动相，流动相中盐浓度低，能够显著降低系统堵塞风险；本专利技术采用的流动相中有机相与色谱柱填料性质相匹配，显著延长了色谱柱使用寿命，色谱柱无需再生，使用寿命在两年以上。而且，本专利技术采用反相色谱法结合手性色谱柱对盐酸贝那普利中对映异构体（rr-异构体，杂质a）的含量进行检测分析，能够实现杂质a与盐酸贝那普利快速、有效分离，分离度大，检测结果准确度高、精确度高、灵敏度高，操作简便快捷，适宜推广应用。
18、系统适用性验证结果：系统适用性溶液色谱图中，杂质a峰和盐酸贝那普利峰分离度为4.29，5针对照溶液盐酸贝那普利峰面积rsd为1.4%，系统适用性和进样精密度满足要求。
19、专属性验证结果：空白溶液和其他杂质不干扰杂质a和盐酸贝那普利检测，专属性满足要求。
20、定量限与检测限：检测限溶液中，主峰（盐酸贝那普利）的s/n在4.22~5.33之间，杂质a的s/n在5.34~5.99之间，均不小于3，检测限满足要求，定量限溶液中主峰的s/n在10.56~18.06之间；杂质a的s/n在12.60~21.26之间，均不小于10；6针定量限溶液中主峰峰面积rsd=3.7%，杂质a峰面积rsd=3.8%，均不小于15.0%。检测限和定量限满足要求。
21、线性与范围实验结果：盐酸贝那普利在20~200%（0.2066~2.0659μg/ml）范围内，线性方程为y=24.6912x+0.3949，相关系数r为0.9998，≥0.990；截距为1.5%，≤20%；残差平方和为0.5，线性关系良好。杂质a在20~200%（0.2036~2.0364μg/ml）范围内，线性方程为y=25.0223x+0.3598，相关系数r为0.9998，≥0.990；截距为1.4%，≤20%；残差平方和为0.6，线性关系良好。
22、精密度验证结果：样品1的6份重复性溶液中杂质a含量的rsd为5.5%；样品2的6份重复性溶液中杂质a含量的rsd为5.3%，重复性满足要求。样品1的6份中间精密度溶液中杂质a含量的rsd为0.0%;样品2的6份中间精密度溶液中杂质a含量的rsd为4.2%。样品1的12份样品溶液中，杂质a含量的rsd为5.1%；样品2的12份样品溶液中，杂质a含量的rsd为4.6%，中间精密度满足要求。
23、准确度验证结果：样品1中杂质a各浓度水平回收率在91.02~99.20%之间，rsd为3.4%；样品2中杂质a各浓度水平回收率在90.79~98.09%之间，rsd为2.4%，准确度满足要求。
24、溶液稳定性验证结果：样品1对照溶液在室温37h内，主峰峰面积与0h比较，比值在95.61~99.33%之间。样品2对照溶液在室温37h内，主峰峰面积与0h比较，比值在100.00~102.57%之间，溶液稳定。样品1供试品溶液在室温37h内，杂质a峰面积与0h比较，比值在99.34~103.73%之间。样品2供试品溶液在室温37h内，杂质a峰面积与0h比较，比值在96.33~102.71%之间，溶液稳定。
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【技术保护点】
1.一种盐酸贝那普利对映异构体的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品液中盐酸贝那普利的浓度为0.5~2mg/mL。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述乙腈水溶液中乙腈的体积分数为30~50%。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述硫酸铵-磷酸缓冲液的pH值为3~3.4。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反相色谱检测的洗脱方式为等度洗脱。
6.根据权利要求1或5所述的检测方法，其特征在于，所述反相色谱检测的流动相流速为0.3~0.7mL/min。
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反相色谱检测的柱温为10~35℃。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反相色谱检测的检测波长为235~245nm。
9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反相色谱检测的进样体积为5~20μL。
10.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述待测盐酸贝那普利样品中对映异构体的含量=对映异构体的峰面积/色谱图中所有峰的总面积×100%。
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【技术特征摘要】
1.一种盐酸贝那普利对映异构体的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品液中盐酸贝那普利的浓度为0.5~2mg/ml。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述乙腈水溶液中乙腈的体积分数为30~50%。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述硫酸铵-磷酸缓冲液的ph值为3~3.4。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反相色谱检测的洗脱方式为等度洗脱。
6.根据权利要求1或5所述的检测方...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭珊珊，王远，唐小兰，张鑫，刘杨，李秋萍，
申请(专利权)人：地奥集团成都药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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