一种菊糖果糖转移酶的克隆及其高效表达制造技术

一种菊糖果糖转移酶的克隆及其高效表达，属于生物工程技术领域。本发明专利技术公开了一种菊糖果糖转移酶（ＩＦＴａｓｅ）基因、其高表达重组大肠杆菌ＢＬ２１－ＩＦＴ的构建及诱导高效表达的方法。以产ＩＦＴａｓｅ的金黄节杆菌（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ?ａｕｒｅｓｃｅｎｓ）ＳＫ?８．００１的ＤＮＡ为模板，经ＰＣＲ扩增获得编码ＩＦＴａｓｅ的基因ｉｆｔ。采用特定核苷酸序列的引物进行扩增，获得重组ＤＮＡ片段，经鉴定、酶切、连接，转化入宿主细胞，构建成ＩＦＴａｓｅ高表达重组大肠杆菌ＢＬ２１－ＩＦＴ。将此阳性克隆子在含氨苄青霉素的ＬＢ培养基中活化，再接种于新鲜的含氨苄青霉素的ＬＢ液体培养基中，培养至ＯＤ６００为０．４－１．２时，加入诱导剂、表面活性剂诱导表达，ＩＦＴａｓｅ得到了高效表达。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种来源于金黄节杆菌（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｕｒｅｓｃｅｎｓ）ＳＫ　８．００１的菊糖果糖转移酶，其基因核苷酸序列为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周榴明，江波，沐万孟，赵萌，张涛，缪铭，杭华，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]