【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于安全检测领域，涉及妥布霉素、链霉素的检测技术，尤其是涉及一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方法。
技术介绍
1、氨基糖苷类抗生素(abs)是一类广谱抗生素，过去80年中常用于革兰氏阴性菌引起的感染治疗。abs一般包含两个或两个以上氨基糖结构，氨基糖通过糖苷键与氨基环醇连接组成其分子结构。abs多阳离子结构能抑制30s核糖体亚单位的肽延伸，干扰蛋白质合成，从而达到杀菌的目的。由于经常引起肾毒性和耳毒性的副作用，近年来氨基糖苷类抗生素的使用在逐步减少。目前，欧盟规定动物源性食品中妥布霉素、链霉素的最大残留限量严格规定为200μg/kg(louca christodoulou d,et al.pesticide residues analysis inhoney using ethyl acetate extraction method:validation and pilot survey inreal samples[j].international journal of environmental analytical chemistry,2015,95(10):894-910.)。
2、目前，对该类抗生素的检测有薄层色谱-火焰法(tlc-fid)、光电化学传感器法(pec)和表面增强拉曼技术(sers)。薄层色谱-火焰法(anyakudo f,et al.analysis ofamikacin,gentamicin and tobramycin by thin layer chromato
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方法，通过妥布霉素或链霉素与银纳米粒子间的静电作用诱导银纳米粒子团聚，静电吸附妥布霉素或链霉素在银纳米聚集体的sers增强的热点上，在优化的量比、ph条件下，实现妥布霉素或链霉素的定量分析。妥布霉素的线性检测范围为10-5～10-9m/l，检测限为6×10-10m/l；链霉素的线性检测范围为10-5～10-9m/l，检测限为6.4×10-10m/l。
2、本专利技术首先合成银溶胶，优化银溶胶与样品溶液的量比、ph值，通过建立sers特征峰的强度与浓度的标准曲线，实现对待测样品的分析检测。
3、本专利技术包括以下两个步骤：
4、1)柠檬酸钠还原硝酸银制备银溶胶：于容器中先加入硝酸银溶液，在磁力搅拌下加热回流至沸腾，然后加柠檬酸钠，至溶液变为略带绿色的不透明液体，继续加热回流一段时间，反应后自然冷却至室温，密封避光保存；通过控制反应物的浓度、搅拌速度、反应温度、反应时间，制得粒径均一、稳定的银溶胶；
5、2)样品溶液在sers基底上的定量分析检测：将不同浓度的样品溶液与银溶胶按照最佳结合量比混合，调节至最优的ph，用最佳激发波长激发，进行表面增强拉曼检测，在最佳检测时间内采集sers谱图；随着样品溶液的浓度增加，其sers特征峰强度会增强，利用样品的sers特征峰的强度与浓度之间关系建立标准曲线，对待测样品溶液进行定量分析检测，由于妥布霉素和链霉素的sers特征峰的不同，对二者分别进行定量分析检测。
6、在步骤1)中，所述柠檬酸钠的质量百分浓度分数可为0.8％～1.5％，柠檬酸钠与硝酸银溶液的体积比可为30～50；所述硝酸银溶液的浓度可为1～3mmol/l。
7、在步骤1)中，所述磁力搅拌的速度可为1000～1500r/min；所述反应温度可为90～100℃，反应时间可为30～80min；所述继续加热回流的时间可为50～60min。
8、在步骤1)中，所述柠檬酸钠还原硝酸银制备银溶胶的具体步骤可为：取100ml硝酸银溶液于单口圆底烧瓶中，用磁力搅拌器搅拌同时用电热套加热至沸腾回流状态，迅速加入预先配制好的柠檬酸钠，加入之后约1min左右，溶液由无色变成乳白，再变成略带绿色的不透明液体，继续搅拌加热微沸50～60min，再撤离加热套停止加热，自然冷却至室温，再用铝箔纸覆盖圆底烧瓶，密封避光保存。
9、在步骤1)中，所述银溶胶可为球形银纳米粒子或椭圆形银纳米粒子，所述球形纳米粒子的粒径可为50±10nm。
10、在步骤1)中，所述稳定的银溶胶是表示纳米溶胶在冰箱里放置1～2个月，银纳米粒子不团聚且仍能作为基底得到稳定的sers信号。
11、在步骤2)中，所述不同浓度的样品溶液是指用水作为溶剂配制样品溶液。
12、在步骤2)中，所述最佳激发波长是指785nm激发波长；所述最佳结合量比是在控制固定银溶胶为合成原液浓度，样品溶液的浓度为10-5m/l的情况下，银溶胶与样品溶液体积比可为0.6～0.7；所述最佳的ph是调节银溶胶与样品溶液的混合溶液的ph值在3.0～4.0；所述最佳检测时间是指所有物质混合后在0～1min内进行检测；所述样品的sers特征峰，妥布霉素在特定波长处的sers特征峰为妥布霉素在1020cm-1处的sers特征峰；所述链霉素在特定波长处的sers特征峰为链霉素素在970cm-1处的sers特征峰。
13、在步骤2)中，所述定量分析检测，以标准品的系列浓度的对数值为横坐标，以测定的最强sers特征峰处的峰强为纵坐标，建立标准曲线，用于待测样品定量分析检测；妥布霉素的线性检测范围为10-5～10-9m/l，检测限为6.0×10-10m/l；链霉素的线性检测范围为10-5～10-9m/l，检测限为6.4×10-10m/l。
14、本专利技术提出一种利用银溶胶团聚效应检测妥布霉素或链霉素的方法，银溶胶的合成简单，方便且稳定。通过调节本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于包括以下步骤：
2.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述柠檬酸钠的质量百分浓度分数为0.8％～1.5％，柠檬酸钠与硝酸银溶液的体积比为30～50；所述硝酸银溶液的浓度为1～3mmol/L。
3.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述磁力搅拌的速度为1000～1500r/min；所述反应温度为90～100℃，反应时间为30～80min；所述继续加热回流的时间为50～60min。
4.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述柠檬酸钠还原硝酸银制备银溶胶的具体步骤为：取100mL硝酸银溶液于单口圆底烧瓶中，用磁力搅拌器搅拌同时用电热套加热至沸腾回流状态，迅速加入预先配制好的柠檬酸钠，加入之后约1min左右，溶液由无色变成乳白，再变成略带绿色的不透明液体，继续搅拌加热微沸50～60min，再撤离加热套停止加热，自然冷
5.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述银溶胶为球形银纳米粒子或椭圆形银纳米粒子，所述球形纳米粒子的粒径为50±10nm。
6.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述稳定的银溶胶是表示纳米溶胶在冰箱里放置1～2个月，银纳米粒子不团聚且仍能作为基底得到稳定的SERS信号。
7.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述不同浓度的样品溶液是指用水作为溶剂配制样品溶液。
8.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述最佳激发波长是指785nm激发波长；所述最佳结合量比是在控制固定银溶胶为合成原液浓度，样品溶液的浓度为10-5M/L的情况下，银溶胶与样品溶液体积比为0.6～0.7；所述最佳的pH是调节银溶胶与样品溶液的混合溶液的pH值在3.0～4.0；所述最佳检测时间是指所有物质混合后在0～1min内进行检测；所述样品的SERS特征峰，妥布霉素在特定波长处的SERS特征峰为妥布霉素在1020cm-1处的SERS特征峰；所述链霉素在特定波长处的SERS特征峰为链霉素素在970cm-1处的SERS特征峰。
9.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的SERS检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述定量分析检测，以标准品的系列浓度的对数值为横坐标，以测定的最强SERS特征峰处的峰强为纵坐标，建立标准曲线，用于待测样品定量分析检测；妥布霉素的线性检测范围为10-5～10-9M/L，检测限为6.0×10-10M/L；链霉素的线性检测范围为10-5～10-9M/L，检测限为6.4×10-10M/L。
...【技术特征摘要】
1.一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方法，其特征在于包括以下步骤：
2.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述柠檬酸钠的质量百分浓度分数为0.8％～1.5％，柠檬酸钠与硝酸银溶液的体积比为30～50；所述硝酸银溶液的浓度为1～3mmol/l。
3.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述磁力搅拌的速度为1000～1500r/min；所述反应温度为90～100℃，反应时间为30～80min；所述继续加热回流的时间为50～60min。
4.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述柠檬酸钠还原硝酸银制备银溶胶的具体步骤为：取100ml硝酸银溶液于单口圆底烧瓶中，用磁力搅拌器搅拌同时用电热套加热至沸腾回流状态，迅速加入预先配制好的柠檬酸钠，加入之后约1min左右，溶液由无色变成乳白，再变成略带绿色的不透明液体，继续搅拌加热微沸50～60min，再撤离加热套停止加热，自然冷却至室温，再用铝箔纸覆盖圆底烧瓶，密封避光保存。
5.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述银溶胶为球形银纳米粒子或椭圆形银纳米粒子，所述球形纳米粒子的粒径为50±10nm。
6.如权利要求1所述一种基于银纳米的妥布霉素及链霉素的sers检测方...
【专利技术属性】
技术研发人员：张芹，林浩，贾志清，倪文静，胡龙宇轩，陈宏炬，林惠真，曾勇明，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。