【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于检测液体保存，具体涉及一种干血浆采集装置及其应用。
技术介绍
1、游离核酸是存在于人体各种体液及外周血中的非细胞核酸，主要包括来自于人体细胞代谢的片段化核酸，肿瘤细胞代谢的核酸，病原微生物感染的核酸产物，孕妇外周血液中胎儿的核酸产物以及由手术，输血等植入性的外源的核酸产物。借助于不断发展的测序技术的，针对血液中的游离核酸的检测成为肿瘤筛查，产前诊断，病原微生物检测工作的重要对象。然而，血液中的游离核酸通常为不超过200bp的核酸片段产物，在血液循环过程及体外，大部分的游离核酸会被各种酶消化降解，常规的edta静脉采血管设备无法实现对血液中游离核酸的长时间稳定保存和运输。采用edta静脉采血管设备在采血后通常需要在6小时内完成样本的处理。
2、现有针对血液中游离核酸的保存主要依赖于游离核酸保存管,通过静脉采血后，需要进行静脉全血样本的保存和运输。该保存运输方法常受到保存温度，运输条件等因素引起溶血，漏液，破损等问题，样本存在比较大的保存运输安全隐患。同时，液体样本的跨境或长途运输也存在重大的生物污染和传染威胁。
3、在血浆样本保存试剂或者保存卡的开发过程中，现有技术主要集中在甲醛，防腐剂等固定剂以及核酸酶抑制剂上的使用研发，其存在一定的毒性威胁或者保存效果及稳定性较差的局限性问题。
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的是提高对血浆样本中游离核酸的长效保存，且一定程度上解决现有游离核酸保存技术上的局限性问题。为此，本专利技术提出能够更简便，长效的
2、具体的本专利技术提供以下技术方案：
3、一种用于干血浆采集的预处理缓冲液，所述预处理缓冲液的主要成分包括：2-3m异硫氰酸胍盐(gitc)，10-15mm tris-hcl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐),100-150mm edta(乙二胺四乙酸)和1.5-3m(nh4)2so4(硫酸氨)，且所述预处理缓冲液ph为5-5.5。
4、优选的，所述gitc的含量为2.5m,(nh4)2so4的含量为1.5m。
5、本专利技术还提供了一种干血浆采集装置，包括外套，外套内置推杆，推杆一端设置按手，另一端设置橡胶活塞，外套靠近活塞一端设置有样本吸孔，所述橡胶活塞与样本吸孔之间依次设置有吸附滤膜、吸附滤纸，所述吸附滤膜靠近橡胶活塞一侧与吸附滤纸靠近样本吸孔一侧均设置有卡环状固定夹，所述吸附滤膜和吸附滤纸上含有预处理缓冲液。
6、进一步的，所述吸附滤膜为硅胶基质膜。
7、进一步的，所述吸附滤纸为采血滤纸。
8、进一步的，所述吸附滤膜和吸附滤纸进行预处理缓冲液浸泡湿润30分钟，55摄氏度烘干过夜处理。
9、进一步的，所述吸附滤膜采用15层的硅胶基质膜，叠加1层吸附滤纸相匹配，血浆吸附量为1.5-2ml，所述硅胶基质膜的型号为y-sm-bc-2，吸附滤纸型号为whatman 903。
10、本专利技术还提供了一种使用干血浆采集装置进行血浆游离核酸提取的方法，包括以下步骤：
11、(1)样本采集：排空干血浆采集装置内的空气，抽拉橡胶活塞，抽取血浆样本浸透吸附滤膜，室温静置30-60min至采集装置血浆干燥固定；
12、(2)保存或运输：干燥后，排空采集装置内空气，封住样本吸孔，即可进行样本的保存和运输；
13、(3)核酸提取纯化：打开样本吸孔，轻轻抽吸游离核酸提取试剂盒液体，完成样本裂解，纯化，洗脱；
14、(4)检测。
15、本专利技术提供的预处理缓冲液、干血浆采集装置可应用在血浆游离核酸吸附保存或检测中，具体的，所述检测为基因检测；所述基因检测包括产前诊断或亲缘鉴定。
16、相较于现有技术，本专利技术的优势在于：
17、1、本专利技术介绍的血浆保存卡主要针对血浆中游离核酸的长效保存。通过全新测试的处理缓冲溶液及核酸采集装置的制备，相比于现有dna采血卡等产品对于核酸样本的保存，本专利技术介绍的血浆游离核酸保存卡能更有效的对200bp以下的短片短核酸的富集。
18、2、本专利技术针对血浆样本进行采集，干血浆生成与保存，和传统静脉采血管相比，减少了采血管在长时间保存运输过程中容易产生的溶血问题，基因组核酸泄露污染问题，大大提高了游离核酸的保存和提取的纯度。
19、3、与常规的硅胶膜采集装置相比，本专利技术中经过处理的干血浆采集装置可以实现更高的游离核酸提取得率(2倍的cfdna收集效率)，同时，在常温干燥保存条件下，本专利技术介绍的干血浆采集装置可以实现更少的cfdna降解的效果，便于样本在经过常规的运输保存仍实现有效的样本检测。
20、4、本专利技术所介绍干血浆采集装置滤膜经预处理缓冲液体的处理可以很好的针对样本中潜在的病原微生物等实现灭活裂解处理，降低样本运输保存过程中的污染和威胁等安全隐患。
21、5、本专利技术全新设计干血浆采血收集柱外观，搭配自研的游离核酸裂解提取试剂和提取方案，依赖核酸吸附膜的吸附纯化释放原理，通过收集柱的橡胶塞的负压抽提裂解，漂洗，洗脱缓冲液，在收集柱中实现独立快速便捷的游离核酸提取纯化。
22、6、本专利技术的干血浆采集柱，搭配的血浆游离核酸的快速提取纯化，所获得的游离核酸样本适配于亲子鉴定，产前诊断，癌症筛查等工作。在基于游离核酸靶标的亲子鉴定，产前诊断和癌症筛查技术手段中提供有效的样本保存制备的基础支持。
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1.一种用于干血浆采集的预处理缓冲液，其特征在于，所述预处理缓冲液的主要成分包括：2-3M异硫氰酸胍盐，10-15mM Tris-hcl,100-150mM EDTA和1.5-3M(NH4)2SO4，且所述预处理缓冲液PH为5-5.5。
2.根据权利要求2所述的预处理缓冲液，其特征在于，所述异硫氰酸胍盐的含量为2.5M,(NH4)2SO4的含量为1.5M。
3.一种干血浆采集装置，包括外套，外套内置推杆，推杆一端设置按手，另一端设置橡胶活塞，外套靠近活塞一端设置有样本吸孔，其特征在于，所述橡胶活塞与样本吸孔之间依次设置有吸附滤膜、吸附滤纸，所述吸附滤膜靠近橡胶活塞一侧与吸附滤纸靠近样本吸孔一侧均设置有卡环状固定夹，所述吸附滤膜和吸附滤纸上含有权利要求1或2所述的预处理缓冲液。
4.根据权利要求3所述的干血浆采集装置，其特征在于，所述吸附滤膜为硅胶基质膜。
5.根据权利要求3所述的干血浆采集装置，其特征在于，所述吸附滤纸为采血滤纸。
6.根据权利要求3-5任一所述的干血浆采集装置，其特征在于，所述吸附滤膜和吸附滤纸进行预处
7.根据权利要求6所述的干血浆采集装置，其特征在于，所述吸附滤膜采用15层的硅胶基质膜，叠加1层吸附滤纸相匹配，血浆吸附量为1.5-2ml，所述硅胶基质膜的型号为Y-SM-BC-2，吸附滤纸型号为whatman 903。
8.一种使用权利要求3-5任一所述的干血浆采集装置进行血浆游离核酸提取的方法，其特征在于，包括以下步骤：
9.权利要求1-2任一所述的预处理缓冲液、权利要求7所述的干血浆采集装置在血浆游离核酸吸附保存或检测中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述检测为基因检测；所述基因检测包括产前诊断或亲缘鉴定。
...【技术特征摘要】
1.一种用于干血浆采集的预处理缓冲液，其特征在于，所述预处理缓冲液的主要成分包括：2-3m异硫氰酸胍盐，10-15mm tris-hcl,100-150mm edta和1.5-3m(nh4)2so4，且所述预处理缓冲液ph为5-5.5。
2.根据权利要求2所述的预处理缓冲液，其特征在于，所述异硫氰酸胍盐的含量为2.5m,(nh4)2so4的含量为1.5m。
3.一种干血浆采集装置，包括外套，外套内置推杆，推杆一端设置按手，另一端设置橡胶活塞，外套靠近活塞一端设置有样本吸孔，其特征在于，所述橡胶活塞与样本吸孔之间依次设置有吸附滤膜、吸附滤纸，所述吸附滤膜靠近橡胶活塞一侧与吸附滤纸靠近样本吸孔一侧均设置有卡环状固定夹，所述吸附滤膜和吸附滤纸上含有权利要求1或2所述的预处理缓冲液。
4.根据权利要求3所述的干血浆采集装置，其特征在于，所述吸附滤膜为硅胶基质膜。
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈洪亮，李依寒，黄志明，郭萍，祝兴强，徐欢，
申请(专利权)人：厦门志煊生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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