【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物活性肽，尤其涉及一种具有抗遗忘活性的肽及其制备方法和应用。
技术介绍
1、记忆是指信息在脑内储存和提取的过程，而记忆减退是大脑对过往经验和事物的识记、保持和再现能力变弱的感觉，属于记忆障碍类型中的一种，记忆减退进一步发展可导致阿尔茨海默症的发生。目前，记忆减退的产生机制尚不明确，据报道，神经元损伤、线粒体功能障碍、神经递质的传递与释放、蛋白质稳态失调以及钙离子通道等机制均与其相关。
2、天麻为兰科植物gastrodia elata bl.的干燥块茎。早在中国最早的药学典籍《神农本草经》中就以“赤箭”之名被列为上品。现代研究表明，天麻的活性物质主要为天麻素和天麻苷元(对羟基苯甲醇)和巴利森苷，其具有抗癫痫、抗疲劳、改善学习记忆能力、脑保护、镇静催眠、益智、镇痛、保护神经作用、抗肿瘤、降压、降血脂、保肝、增强免疫力、抗氧化等药理活性作用，其中天麻苷元作为天麻素的主要的代谢产物具有巩固改善记忆和调节中枢神经系统的作用。
3、核桃富含蛋白质、脂肪、膳食纤维、微量元素和维生素等，其富含氨基酸组成全面的优质植物蛋白，其中包括8种人体必需氨基酸，是一种可为人体提供丰富氨基酸的植物源蛋白原料。核桃肽作为一种新型核桃深加工产品，相关研究表明具有抗氧化、改善记忆等功能，其富含典型的谷氨酸具有健脑作用，可以促进脑细胞进行呼吸，有利于脑组织中氨的排除，精氨酸对心脑血管疾病等老年慢性疾病有显著的保健作用，因此具有广阔的应用前景和市场潜力。
4、目前现有的技术中，中国专利cn106039305b公开了一
5、中国专利cn111000944a公开了一种天麻提取物及其制备方法和应用，该天麻提取物的制备方法以天麻为原料，经醇提和水提后制得的天麻提取物，解决了现有技术中天麻提取物的制备方法较为简单、提取率较低、有效成份也较低的技术问题，并应用于改善学习记忆产品如片剂、硬胶囊、软胶囊、散剂、丸剂和颗粒剂等。
6、中国专利cn116196373a公开了一种天麻提取物及其制备方法，该专利技术使用新鲜采收的天麻块茎洗去泥沙和杂质，晾干表面，切片，经40℃～60℃烘干；干燥后的天麻经粉碎后用6～10倍重量的75％～95％乙醇浸泡0.5～2小时，回流提取2～3次，每次0.5～2小时，提取液经过滤减压浓缩干燥得到提取液，提供了一种在天麻提取物中天麻苷元成分明显大于天麻素的制备方法。
7、关于天麻饮品，目前主要以天麻汁调配以及利用天麻镇静催眠、保护神经和增强免疫作用来制备的饮品较多，例如中国专利cn105211981b公开了一种改善睡眠天麻饮料及其制备方法，该专利技术所公开的改善睡眠天麻饮料是将天麻汁、苹果汁、藤茶等为原料制成的天麻饮料，通过添加苹果汁改善饮料口感，添加藤茶使得饮料的安神保健功效得到增强；中国专利cn104856177b公开了一种天麻原汁及其制备方法与天麻汁饮料，该专利技术所公开的是以天麻原汁作主料，以白砂糖、蜂蜜、柠檬酸、黄原胶、羧甲基纤维素钠、维生素等作辅料调配而成，具有工艺简单、加工成本低、保鲜期长且能有效保持营养成分的优点；中国专利cn106244372b公开了一种改善睡眠的酵素化天麻养生饮品及制备工艺及应用，该专利技术所公开的是以鲜天麻为主要原料，配以鲜玫瑰、薏仁米、小麦、酸枣仁、桑葚、枸杞，采用定向酵素化工艺发酵，再经除菌过滤膜过滤后得到对改善睡眠效果显著的养生饮品，其具有风味独特、改善睡眠、镇静安神，健脑养颜，延年益寿等功效。
8、关于核桃肽饮品，中国专利cn107439876b公开了一种核桃肽饮品及其制备方法，具体地，该专利技术公开了一种通过将带皮核桃仁磨浆酶解去油与核桃肽粉用水混合调配均质过滤，加入去核红枣与党参的熬煮液与全脂乳粉后使用复合菌种发酵，得到一种具有缓解腹泻和促消化作用的核桃肽饮品；中国专利cn102754696b公开了一种冬虫夏草菌株及其制备的虫草核桃肽保健饮品，具体地，该专利技术公开了以核桃汁为原料，经冬虫夏草真菌发酵之后，采用复合酶系进行酶解，最后调配成口感适宜的保健饮品。
9、虽然现有技术中对于天麻提取物的制备方法研究较多，但在食品饮品方面的应用还有所不足；且关于天麻相关食品饮品的开发，现有技术主要以利用天麻镇静催眠、保护神经和增强免疫作用的较多，在改善记忆能力方面的相关应用产品还有待进一步开发。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题提供一种具有抗遗传活性的单链多肽，可与天麻提取物配合使用，在改善记忆功效方面具有协同增效作用。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
2、第一方面，本专利技术提供一种单链多肽，其氨基酸序列为seq id no.1表示的如下序列：gvapgplw。
3、在本专利技术的一个实施方式中，所述单链多肽的分子量为795.434da。
4、第二方面，本专利技术提供上述单链多肽的制备方法，包括如下步骤：依次采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解得到酶解液，将酶解液灭酶后经分离纯化得到所述单链多肽；
5、在本专利技术的一个实施方式中，上述制备方法中，碱性蛋白酶酶解的ph为8.2-9.2，优选为8.6-9.2；和/或，
6、碱性蛋白酶酶解温度为50-65℃，优选酶解反应时间为0.5-1.5h；
7、进一步优选，以核桃蛋白干基的质量计，碱性蛋白酶的添加量为1.5wt％-3.5wt％；
8、和/或，
9、木瓜蛋白酶酶解的ph为8.2-9.2，优选为8.6-9.2；和/或，
10、木瓜蛋白酶酶解温度为50-65℃，优选酶解反应时间为4-6h；
11、进一步优选，以核桃蛋白干基的质量计，木瓜蛋白酶的添加量为1wt％-3wt％；
12、和/或，
13、所述灭酶包括将酶解液升温至80-100℃，保温10-20min。
14、在本专利技术的一个实施方式中，上述制备方法中，所述分离纯化包括如下步骤：
15、a.依次采用纳滤和超滤对酶解液进行过滤得到膜透过液，
16、b.采用反渗透对膜透过液进行浓缩，然后干燥得到核桃肽；
17、c.将核桃肽制成核桃肽溶液，采用高效液相色谱(hplc)分离纯化得到单链多肽；
18、在本专利技术的一个实施方式中，上述分离纯化方法中，步骤a所述纳滤采用陶瓷膜，优选陶瓷膜的孔径为10-100nm，更优选为50nm；
19、和/或，步骤a超滤膜的截留分子量为2000-10000da，优选为5000da；
20、和/或，步骤b反渗透浓缩温度为40-50℃，优选为45℃；
21、进一步优选地，步骤c中hplc纯化条件为：流动相a(按体积比计)含有：3％二甲基亚砜，96.9％超纯水和0.1％甲酸；流动相b(按体积比计)含有：3％二甲基亚本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种单链多肽，其特征在于，其氨基酸序列为SEQ ID NO.1表示的如下序列：GVAPGPLW。
2.根据权利要求1所述的单链多肽，其特征在于，所述单链多肽的分子量为795.434Da。
3.权利要求1或2所述的单链多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：依次采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解得到酶解液，将酶解液灭酶后经分离纯化得到所述单链多肽；
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述分离纯化包括如下步骤：
5.一种含有权利要求1或2所述单链多肽的核桃肽，其特征在于，所述核桃肽中肽含量为75-85wt％，优选地，GVAPGPLW肽段占比为0.3-0.5wt％。
6.根据权利要求5所述的核桃肽，其特征在于，所述核桃肽通过包括如下步骤制得：依次采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解得到酶解液，将酶解液灭酶后经分离得到所述核桃肽；
7.权利要求1或2所述单链多肽或权利要求5或6所述核桃肽在制备改善记忆能力的产品中的应用，优选地，所述产品为固体饮料。
8.一种用于改善记忆
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述天麻提取物通过包括将天麻经水提取、分离得到；优选地，以天麻质量计，天麻提取物中天麻素含量为0.2％～0.5wt％，优选对羟基苯甲醇含量为0.1％～0.4wt％。
10.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述水提取的温度为80-100℃，优选水提取时间为1-3h，优选地，水提取料液比为1:20-1:60。
11.根据权利要求8-10中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括可食用或药用辅料；优选地，所述组合物是片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、微丸剂、滴丸剂、糖浆剂、散剂、浸膏剂、煎膏剂或口服液体制剂。
12.一种固体饮料，其特征在于，含有权利要求8-11中任一项所述的组合物，优选地，所述固体饮料还包括蔗糖1-4份和/或柠檬酸0.03-0.06份。
13.权利要求1或2所述单链多肽的合成方法，其特征在于，包括如下步骤制得：于固相载体上先合成得到载有第一个Fmoc保护氨基酸的树脂，茚三酮法检测为阴性后脱去Fmoc保护基得到载有第一个氨基酸残基的树脂；再进入下一个偶联循环，按照相应的肽序用不同的保护氨基酸重复偶联和脱保护的步骤，依次延长所需的氨基酸序列，合成得到载有相应多肽的树脂，最后用裂解剂将多肽从树脂上切割下来得到多肽粗品，粗品经高效液相色谱纯化，冻干得到该单链多肽。
14.根据权利要求13所述的合成方法，其特征在于，所述固相载体为2-Cl(Trt)-Clresin树脂；
15.根据权利要求13或14所述的合成方法，其特征在于，脱除Fmoc保护基团是通过使用载有Fmoc保护氨基酸的树脂和哌啶溶液进行反应；
...【技术特征摘要】
1.一种单链多肽，其特征在于，其氨基酸序列为seq id no.1表示的如下序列：gvapgplw。
2.根据权利要求1所述的单链多肽，其特征在于，所述单链多肽的分子量为795.434da。
3.权利要求1或2所述的单链多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：依次采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解得到酶解液，将酶解液灭酶后经分离纯化得到所述单链多肽；
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述分离纯化包括如下步骤：
5.一种含有权利要求1或2所述单链多肽的核桃肽，其特征在于，所述核桃肽中肽含量为75-85wt％，优选地，gvapgplw肽段占比为0.3-0.5wt％。
6.根据权利要求5所述的核桃肽，其特征在于，所述核桃肽通过包括如下步骤制得：依次采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解得到酶解液，将酶解液灭酶后经分离得到所述核桃肽；
7.权利要求1或2所述单链多肽或权利要求5或6所述核桃肽在制备改善记忆能力的产品中的应用，优选地，所述产品为固体饮料。
8.一种用于改善记忆能力的组合物，其特征在于，按重量份计，所述组合物包括3-5份天麻提取物和15-20份权利要求5或6所述的核桃肽。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述天麻提取物通过包括将天麻经水提取、分离得到；优选地，以天麻质量计，天麻提取物中天麻素含量为0.2％～0.5wt％，优选对羟基苯甲...
【专利技术属性】
技术研发人员：谈亚丽，李啸，付育臣，李泊远，黄蓉，
申请(专利权)人：安琪生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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