【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学合成，尤其涉及帽类似物及其合成方法和mrna。
技术介绍
1、“帽”结构(m7g[5']ppp[5']n，其中n为任意核苷酸）它通常由7-甲基鸟苷部分组成，通过5-5三磷酸桥连接到rna链的5位核苷上。独特的帽结构在提供对5 ' -外切酶的抗性中起着至关重要的作用，这有助于保护mrna免受5 ' -外切酶活性的快速降解。目前对于帽类似物研究较多，但是目前合成帽类似物的过程中中间产物不稳定，使得获得的帽类似物产量较低。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决相关技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提供一种帽类似物的合成方法，在合成过程中各个中间体稳定性较强，获得的帽类似物产品产量较高，将本专利技术的帽类似物应用于mrna中，利于提高mrna 稳定性，进一步提高转录效率和加帽率。
2、在本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种帽类似物的合成方法，包括以下步骤：
3、s1、以为原料，通过上甲基反应合成；
4、s2、以为原料，通过磷酸化反应合成；
5、s3、使与咪唑反应获得中间产物，将所述中间产物和反应，得到所述帽类似物。
6、进一步地，步骤s1包括：
7、在0-10℃条件下，将碘甲烷添用n,n-二甲基甲酰胺稀释三倍，于0.5-1h的时间内加至与n,n-二甲基甲酰胺的混合体系中，后在28~32℃下进行上甲基反应16-24h。
8、进一步地，与碘甲烷的摩尔比为1：（1.4~1.6）
9、进一步地，步骤s2包括：
10、s21、在惰性气体保护下，在-5~5℃条件下，将亚甲基双氯化磷添加至与亚磷酸三甲酯的混合体系中，后在室温下进行磷酸化反应1~3h；
11、s22、使用饱和碳酸氢铵水溶液在0~10℃条件下对步骤s21得到的产物进行淬灭反应，直至体系ph为7后保温持续搅拌0.5h。
12、进一步地，步骤s21中，与亚甲基双氯化磷的摩尔比为（1~3）：（2~4）；
13、的摩尔量与亚磷酸三甲酯的体积比为1mol：（1.5~2.5）l。
14、进一步地，步骤s3包括：
15、s31、使与咪唑反应，步骤如下：
16、在惰性气体保护下，将三乙胺、咪唑、三苯基膦和二硫二吡啶添加至与n,n-二甲基甲酰胺的混合体系中，搅拌反应1~3h。
17、进一步地，与咪唑的摩尔比为1：（2~4）；
18、三乙胺、咪唑、三苯基膦和二硫二吡啶的摩尔比为（2~4）：（2~4）：（1~3）：（1~3）。
19、进一步地，步骤s3还包括：
20、s32：在8~12℃条件下，在步骤s31得到的产物中添加和氯化锌，后在室温搅拌反应16-24h，得到所述帽类似物；
21、和氯化锌的摩尔比为1：（4~6）。
22、在本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种利用前面所述的合成方法合成得到的帽类似物。
23、在本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种mrna，包括如前面所述的帽类似物。
24、本专利技术实施例中的上述一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果之一：
25、本专利技术帽类似物的合成方法中，起始原料为核苷，先对核苷进行上甲基反应，再对上甲基反应后的产物进行磷酸化反应，在核苷接磷酸之前上甲基，避免了二磷酸结构不稳定而造成物料的损坏，且先上甲基会使得甲基在产品中更加稳定，在进行磷酸化反应时不会造成甲基脱落。
26、本专利技术产品中，二磷酸结构中使用c原子连接两个磷酸基团，增加了二磷酸结构的稳定性，使其在后续合成纯化过程中更加稳定，不易损坏。进一步地，最终帽类似物产品中，三磷酸桥的结构中使用c原子进行连接磷酸基团的结构，将本专利技术的帽类似物应用于mrna中，利于提高mrna 稳定性，进一步提高转录效率和加帽率。
27、本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种帽类似物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤S1包括：
3.根据权利要求2所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，与碘甲烷的摩尔比为1：（1.4~1.6）。
4.根据权利要求1所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤S2包括：
5.根据权利要求4所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤S21中，
6.根据权利要求1所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤S3包括：
7.根据权利要求6所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，与咪唑的摩尔比为1：（2~4）；
8.根据权利要求6或7所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤S3还包括：
9.一种利用权利要求1~8任一项所述的合成方法合成得到的帽类似物。
10.一种mRNA，其特征在于，包括如权利要求9所述的帽类似物。
【技术特征摘要】
1.一种帽类似物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤s1包括：
3.根据权利要求2所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，与碘甲烷的摩尔比为1：（1.4~1.6）。
4.根据权利要求1所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤s2包括：
5.根据权利要求4所述的帽类似物的合成方法，其特征在于，步骤s21中，
...【专利技术属性】
技术研发人员：李静简，张健，贺青鹏，宋艳民，
申请(专利权)人：天津全和诚科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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