【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物栽培，具体涉及一种兰花蕉组织培养快速繁殖方法。
技术介绍
1、兰花蕉(orchidantha chinensis t.l.wu)，兰花蕉科多年生草本，仅分布于广东和广西十万大山等地，十分稀有，是国家二级保护植物，在《世界自然保护联盟濒危物种红色名录》(iucn)中被列入易危种(vu)，其外部形态特征像芭蕉科植物，花单朵或排成聚伞花序自根状茎生出，花两性，左右对称，花瓣3枚，深紫色，中央一枚唇瓣大而有色彩，侧生2枚小，又极似兰花。兰花蕉对中国植物区系及芭蕉科分类系统具有重要的研究价值；同时，由于兰花蕉的叶片翠绿，花具香气，是一种优美的观赏植物，可盆栽或园林栽培；另外，其根茎在民间常用作清热药。兰花蕉的的常规繁殖可进行分株，但繁殖系数低，繁殖种苗数量十分有限。本专利技术专利采用兰花蕉的嫩芽茎尖为外植体进行组织培养，能在短时间内繁殖出大量的试管苗以满足市场的需要。
2、目前，国内外还没有兰花蕉组织培养种苗繁殖的报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对上述不足，提供一种兰花蕉组织培养快速繁殖方法。本专利技术技术简单实惠，切实可行，应用价值高，实施本专利技术只需有简单的植物组织培养设备即可进行。
2、本专利技术采取的技术方案如下：
3、一种兰花蕉组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
4、(1)外植体的获得和消毒：将兰花蕉的根状茎洗净后种植于以河沙为基质的盆中，放入温室培养，期间进行杀菌培养并直至根状茎产生嫩芽；将刚冒出
5、(2)不定芽诱导和继代培养：将诱导出的顶芽切成小块，接种于增殖培养基中进行不定芽增殖培养，所述的增殖培养基为：改良的ms培养基+2.0～3.0mg/l 6-ba+2.0～3.0mg/l 6-kt+50～100ml/l椰子水+20～30g/l蔗糖+5.8～6.2g/l琼脂，ph 5.8-6.0；
6、(3)生根培养：当芽高2～3cm时，切下接种到生根培养基中培养，得到生根试管苗；所述的生根培养基为：改良的1/2ms培养基+0.5～1.0mg/l iba+1.0～2.0g/l活性炭+15～20g/l蔗糖+5.8～6.2g/l琼脂，ph 5.8-6.0；
7、(4)试管苗移栽：当生根试管苗长至4～5cm时，在自然光下炼苗7～10天，然后打开瓶塞，用镊子把试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入基质中培养。
8、上述，步骤(1)中温室培养期间进行消毒处理，具体为：先用70％代森锰锌可湿性粉剂500～700倍液浇灌一次并喷施叶片，7天后用72％农用链霉素可溶性粉剂3000～4000倍液浇灌一次并喷施叶片，然后再过7天，重复上述步骤，共处理4次，最后1次浇灌链霉素后7天取根状茎产生的嫩芽进行组织培养。
9、步骤(1)中将2～3厘米的小芽进行消毒，剔除多余组织处理，具体为：将小芽先在75％酒精中浸泡10～30秒，再用0.1％升汞溶液消毒5～10分钟，无菌水冲洗4～6次后，再剥除里面的嫩叶，再放入0.1％升汞溶液消毒2～4分钟，无菌水冲洗4～6次后，切除生长点周围的一些组织。
10、步骤(1)和步骤(2)中改良的ms培养基为普通ms培养基配方中的硝酸胺浓度由1650mg/l调整为2000mg/l、硝酸钾浓度由1900mg/l调整为1500mg/l，其余成分不变。所述的普通ms培养基为国际通用的培养基，其成分和配制方法参看书籍(谭文澄、戴策刚主编，观赏植物组织培养技术.北京：中国林业出版社，1991.)
11、步骤(3)中改良的1/2ms培养基为普通ms培养基配方中的大量元素用量减半，其余成分不变，并含有b5培养基的有机成分。
12、所述的b5培养基的有机成分的组成为：100mg/l肌醇+1.0mg/l烟酸+1.0mg/l盐酸吡哆醇+10.0mg/l盐酸硫铵素+2.0mg/l甘氨酸。
13、步骤(1)和步骤(2)的培养条件为：培养温度26～30℃，光照度1500～2000lx，光照12～16小时/天。
14、步骤(3)的培养条件为：培养温度26～30℃，光照度1800～2500lx，光照12～16小时/天。
15、步骤(4)的基质为泥炭土、珍珠岩和沙按体积比为(2～4):2:1混合的混合基质。
16、本专利技术的有益效果为：
17、本专利技术通过选用兰花蕉的嫩芽茎尖作为外植体，优化消毒步骤，选择改良的ms培养基、改良的1/2ms培养基代替普通ms培养基，进行外植体顶芽诱导、不定芽增殖培养及生根壮苗培养，显著提高了兰花蕉的诱导率(30％)、增殖率(45％)、幼苗的生根率可达90～100％，成活率可达95～100％，能在短时间内繁殖出大量的试管苗以满足市场的需要。本专利技术技术简单实惠，切实可行，应用价值高。实施本专利技术只需有简单的植物组织培养设备即可进行。
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1.一种兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中温室培养期间进行消毒处理，具体为：先用70％代森锰锌可湿性粉剂500～700倍液浇灌一次并喷施叶片，7天后用72％农用链霉素可溶性粉剂3000～4000倍液浇灌一次并喷施叶片，然后再过7天，重复上述步骤，共处理4次，最后1次浇灌链霉素后7天取根状茎产生的嫩芽进行组织培养。
3.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中将2～3厘米的小芽进行消毒，剔除多余组织处理，具体为：将小芽先在75％酒精中浸泡10～30秒，再用0.1％升汞溶液消毒5～10分钟，无菌水冲洗4～6次后，再剥除里面的嫩叶，再放入0.1％升汞溶液消毒2～4分钟，无菌水冲洗4～6次后，切除生长点周围的一些组织。
4.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中改良的MS培养基为普通MS培养基配方中的硝酸胺浓度由1650mg/L调整为2000mg/L、硝酸钾浓度由1900mg/L
5.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中改良的1/2MS培养基为普通MS培养基配方中的大量元素用量减半，其余成分不变，并含有B5培养基的有机成分。
6.根据权利要求5所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述的B5培养基的有机成分的组成为：100mg/L肌醇+1.0mg/L烟酸+1.0mg/L盐酸吡哆醇+10.0mg/L盐酸硫铵素+2.0mg/L甘氨酸，区别于MS培养基的有机成分(100mg/L肌醇+0.5mg/L烟酸+0.5mg/L盐酸吡哆醇+0.1mg/L盐酸硫铵素+2.0mg/L甘氨酸)。
7.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)的培养条件为：培养温度26～30℃，光照度1500～2000lx，光照12～16小时/天。
8.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(3)的培养条件为：培养温度26～30℃，光照度1800～2500lx，光照12～16小时/天。
9.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(4)的基质为泥炭土、珍珠岩和沙按体积比为(2～4):2:1混合的混合基质。
...【技术特征摘要】
1.一种兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中温室培养期间进行消毒处理，具体为：先用70％代森锰锌可湿性粉剂500～700倍液浇灌一次并喷施叶片，7天后用72％农用链霉素可溶性粉剂3000～4000倍液浇灌一次并喷施叶片，然后再过7天，重复上述步骤，共处理4次，最后1次浇灌链霉素后7天取根状茎产生的嫩芽进行组织培养。
3.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中将2～3厘米的小芽进行消毒，剔除多余组织处理，具体为：将小芽先在75％酒精中浸泡10～30秒，再用0.1％升汞溶液消毒5～10分钟，无菌水冲洗4～6次后，再剥除里面的嫩叶，再放入0.1％升汞溶液消毒2～4分钟，无菌水冲洗4～6次后，切除生长点周围的一些组织。
4.根据权利要求1所述的兰花蕉组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中改良的ms培养基为普通ms培养基配方中的硝酸胺浓度由1650mg/l调整为2000mg/l、硝酸钾浓度由1900mg/l调整为1500mg/l，其余成分不变。
5.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：覃俏梅，吴林芳，唐健民，曹洪麟，曾宋君，朱伟光，
申请(专利权)人：广东生态工程职业学院，
类型：发明
国别省市：
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