促尿钠排泄化合物、轭合物及其用途制造技术

本发明专利技术公开了修饰的促尿钠排泄化合物及其轭合物。尤其是，本发明专利技术提供了ｈＢＮＰ的轭合形式，且其包括至少一种与其相连的修饰部分。所述修饰的促尿钠排泄化合物保留了刺激ｃＧＭＰ产生、结合于ＮＰＲ－Ａ受体的活性；在一些实施方案中，与未修饰的对应促尿钠排泄化合物相比，本发明专利技术所公开的促尿钠排泄化合物在循环中具有改善的半衰期。可将所述化合物和轭合物的口服、肠胃外、经肠、皮下、经肺和静脉内形式制备成适于心脏疾病尤其是充血性心力衰竭的治疗剂和／或治疗方法。本发明专利技术还公开了含有具有不同长度和构象的寡聚结构的修饰部分。本发明专利技术还公开了促尿钠排泄化合物的类似物，其具有不同于天然序列的氨基酸序列。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】1.相关申请本申请基于递交日为2004年5月26日，未决的，题为“促尿钠排泄化合物、轭合物及其用途”的美国临时专利申请第60/574,436号，并要求其优先权。本申请将该申请中全部公开内容都全文引用作为参考，与此同时，出于这些权利要求合法主张的全部目的，本申请还要求该专利申请中递交日所主张的权益。2.政府支持声明本专利技术是在NIH拨款#1 R43 HL074529-01资助的研究计划下申请的。美国政府对本专利技术拥有某些权利。3.专利
本专利技术涉及促尿钠排泄化合物轭合物和促尿钠排泄化合物变体，及其在治疗充血性心脏病和与该病症相关病症中的用途。例如，本专利技术的所述组合物提供了具有药理活性的促尿钠排泄剂和原药，其可适用于口服、经鼻、静脉内或皮下给药的制剂中。本专利技术还提供了制备所述促尿钠排泄化合物轭合物，化合物以及含有这些化合物和轭合物的制剂制剂的方法，同时还提供了使用这些轭合物和化合物的方法。例如，所述促尿钠排泄化合物轭合物包含如下的促尿钠排泄肽该肽包括NPR-A结合基序，至少一个修饰部分轭合位点，同时还包括与所述修饰部分轭合位点连接的至少一个修饰部分。在一些实施方案中，所述化合物轭合物保留了天然促尿钠排泄肽的药理活性，与此同时，还具有改进的特征，例如改进的生物利用率，对蛋白水解活性提高的抗性，和/或在血液中延长的活性。在其他实施方案中，所述化合物轭合物被作为可水解原药提供，与天然促尿钠排泄肽相比，原药形式其药理活性有所降低，并且当所述原药在体内水解后，可以释放出具有活性的促尿钠排泄化合物。本专利技术还涉及重组肽和蛋白领域，以及制备这些重组肽和蛋白的方法。尤其是，本申请在此公开了促尿钠排泄肽和蛋白质的类似物。在一些实施方案中，本专利技术所述促尿钠排泄化合物的类似物被描述成具有如下的氨基酸序列与所述对应的促尿钠排泄肽的天然序列相比，该序列具有至少一个取代的氨基酸。在一些实施方案中，本专利技术所述的促尿钠排泄化合物的类似物被描述成具有以下肽的天然形式的药理活性脑型促尿钠排泄肽(BNP)，尤其是人BNP(hBNP)，尿扩张素，犬脑促尿钠排泄肽(cBNP)，心房促尿钠排泄肽(ANP)，尤其是人ANP(hANP)，树眼镜蛇促尿钠排泄肽(DNP)，或C-型促尿钠排泄肽(CNP)，尤其是人CNP(hCNP)。4.专利技术背景无论性别或种族如何，心血管疾病是美国人的头号死亡原因。在这些疾病当中，充血性心力衰竭(CHF)是唯一一类呈普遍上升趋势的疾病(Massie and Shah 1997；Packer and Cohn 1999)。根据美国心脏协会的报道，从1979年到1999年，由于CHF出院和死亡的患者数量都大约升高了2.5倍。目前，大约有5百万美国人被诊断患有CHF，并且每年还会新增大约550,000个病例(美国心脏协会2001)。这种致命的疾病总是伴随着巨大的金钱花费。事实上，这是最大的单项医疗保险开销(Kayser 2002)。据估计，治疗CHF的直接和间接费用高达560亿美元(Hussar 2002)。用于治疗HF的医院花费甚至比那些治疗所有类型癌症费用合起来的两倍还多(O’Connell and Bristow 1994)。CHF是一种常见的死亡原因，其通常都伴随有高额的间接治疗费用以及较高的死亡率。一旦患者被诊断患有CHF，一年内的死亡率为约20％(美国心脏协会2001)。由于相同病症的再次入院可能性也非常高，近来也进行了若干关于再次入院的研究(Chin and Goldman 1997；Krumholz，Parent et al.1997；Krumholz，Chen et al.2000)。确诊一年内的再次入院率超过35％是很常见的(Tsuchihashi，Tsutsui et al.2001)。这样频繁的复发会导致多次急救就诊以及入院治疗(Krumholz，Parentet al.1997)。多次入院治疗和不充分的治疗就是那些患CHF的患者面对的现状。一项最近的随机研究表明，基于家庭的干涉可以极大地降低CHF患者的重新入院率，延长存活率，并且改善生活质量(Stewart，Marley etal.1999)。在一项针对社会经济因素的独立研究中，Tsuchihashi等人认为，为了降低与CHF相关的死亡率和总开销，门诊处理和基于家庭的照顾都是必要的(Tsuchihashi，Tsutsui et al.2001)。显而易见，在这一不断增长的市场中，亟需针对基于门诊病人的应用广泛的新疗法。脑型促尿钠排泄肽(BNP)是涉及心血管、肾脏和内分泌稳态的肽家族之一。它是在1988年发现的(Sudoh，Kangawa et al.1988)，几乎是在心房促尿钠排泄肽(ANP)发现之后的十年。虽然它最初是从猪脑中分离得到的，但其却以对心血管平滑肌和内皮细胞中的受体具有活性而为公众所知。BNP是一种由心脏产生的内源肽。其首先是以原前-BNP产生的，随后缩短两倍成为活性形式，即具有一个二硫键的32个氨基酸的肽。如图1所示，BNP结合于促尿钠排泄肽受体A(NPR-A)，其是细胞表面的膜结合蛋白。该结合事件引发了细胞液中由鸟苷酸环化酶导致的cGMP合成。正是通过这种第二信使，使得BNP实现了与其相关联的心血管、肾脏和内分泌效应。可以通过几种不同的方式实现对BNP的调节。可以将结合于NPR-A和刺激cGMP产生的BNP分子从循环中去除，还可以通过其他方法在不引起其他反应的条件下去除BNP。最常见的去除方式是通过与清除受体、促尿钠排泄肽受体C(NPR-C)的结合来实现。当与NPR-C结合后，所述肽即被摄入细胞并且被酶促清除。另一种主要的清除方式是采用中性肽内切酶(NEP)的降解，所述内切酶是细胞表面的一种膜结合酶。最后，通过肾滤过作用将BNP清除至较低水平。在正常情况下，在心房和心室中都能低量产生BNP。然而，当心室在心代偿过程中进行收缩时，BNP的产量急剧升高。虽然也涉及到心房，但心室依然是主要的产生位置。在CHF发病时，响应于在心代偿过程中心室的收缩，心脏产生了BNP。BNP的效应包括尿钠增多，利尿，血管舒张和舒张压降低。这些效应都是通过第二信使，即环鸟苷单磷酸(cGMP)的作用产生的。当BNP与促尿钠肽受体A(NPR-A)，即位于血管、肾脏和肺内皮细胞表面的膜结合受体相互作用时，引发了cGMP的产生。BNP的血浆浓度随着CHF严重程度的增加而增加。除了这样的增加，BNP的有益效果会在严重的CHF中受到钝化，从而在明显的CHF中提高相对缺乏状态的可能性。或者，考虑到目前采用的旨在测定BNP的血浆浓度的分析方法不能将前原-BNP和成熟形式特异性区分开来，在明显的CHF中，这种原-激素并未被充分地加工成其成熟形式。因此，无论是心脏产生的BNP量过量，或者是前原-BNP并未充分地转化成其活性形式，其有益作用都会降低。由于其产生于心脏疾病发病的早期，BNP就成了检测患者具有逐渐发展成CHF的较高风险的重要诊断标记(Yamamoto，Burnett et al.1996；McDonagh，Robbet al.1998；Richards，Nicholls et al.1998；Nagaya，Nishikimi et al.2000；Kawai，H本文档来自技高网...

【技术保护点】
促尿钠排泄化合物轭合物，包括：　　　　具有生物学活性的促尿钠排泄化合物，其包括：　　　　促尿钠排泄分子ＮＰＲ－Ａ结合位点；以及　　　　至少一个修饰部分轭合位点；以及　　　　与所述修饰部分轭合位点连接的至少一个修饰部分；　　　　其中所述促尿钠排泄化合物轭合物表现出了选自如下的一或者多种优点：与对应的未轭合促尿钠排泄化合物相比对酶降解增强的抗性、延长的循环半衰期，提高的生物利用率以及延长的持续药效。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：肯尼斯D詹姆斯，伯勒辛加姆拉达克里希南，纳瓦迪普B马尔卡，马克A米勒，瑙奇瑞N埃克沃瑞博，
申请(专利权)人：比奥孔有限公司，
类型：发明
国别省市：IN[印度]