叶面喷施微生物提高向日葵耐铅性的方法技术

叶面喷施微生物提高向日葵耐铅性的方法，涉及一种改善土壤的方法，所述微生物为乙基绿假单孢菌（Ｃｈｌｏｒｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ?ｅｔｈｙｌｉｃａ）ＳＨⅡ－６，厌氧光照培养４－５天，获得浓度为１－２×１０８个活菌／ｍｌ的菌剂，于向日葵播种前，取菌剂稀释１０倍浸种，此后菌剂稀释２００－５００倍，在向日葵生长时期叶面喷施。本菌剂使用方法简便，生产成本低，生产过程安全，使用后环境友好，对铅污染土壤中向日葵生长有高效促进性。有效缓解因铅中毒引起的根量少，生长缓慢，地上部分弱小等现象，增产效果显著。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种改善土壤的方法，特别是涉及一种对向日葵利用促生微生物抵抗 土壤铅污染的方法。
技术介绍
铅在土壤中的溶解度小，滞留时间长，是一种不可降解的环境污染物。我国土壤铅 污染量大而广，随着高速公路建设的迅猛发展，含铅汽油的大量使用，城市污水及垃圾处理 不当，工业生产所产生的“三废”的不合理排放，农药、除草剂和化肥的使用，以及因采矿造 成的废弃地等原因，使土壤铅污染日趋严重。铅并不是动、植物生长发育的必需元素。铅被动进入植物根，皮或叶片并积累，使 植物受害。Pb对植物根系生长的影响是显著的，减少根细胞的有丝分裂速度，根量减少，根 冠膨大、变黑、腐烂，植物地上部分生物量随后下降，叶片失绿明显，严重时逐渐枯萎、死亡； 铅的积累也直接影响细胞的代谢作用，引起活性氧代谢酶系统的破坏；高浓度Pb还使种子 萌发率和胚根长度、上胚轴长度降低，甚至出现胚根组织坏死。更受关注的是，铅会进入食 物链，危及人类的健康。铅对机体损伤呈多系统性、多器官性和不可逆性，其作为中枢神经 系统毒物，对儿童的身体和智能的危害更为严重。对铅污染土壤的治理和开发利用主要包括两方面，其一是铅污染土壤的治理，其 二是充分挖掘和利用植物的耐铅遗传特性，即筛选耐铅品种和克隆抗铅相关基因。目前采 用的物理化学方法修复铅污染土壤，费用昂贵，破坏环境，容易造成二次污染，且往往并不 能达到真正清除铅的目的，近十年出现的植物修复技术在不破坏环境的条件下使土壤铅得 以清除，是一种绿色环保技术。用于修复土壤铅污染的植物包括圆叶遏蓝菜、香蒲、向日葵、 一枝黄花、羊茅、玉米、苣荬菜、东南景天等，其中经济作物因生物量相对较大和创造经济价 值而成为首选。但是，无论在铅浓度较高的污染土壤中进行植物修复，还是在铅浓度较低的 土壤中种植耐受铅的经济作物以获得产量，植株生长缓慢、长势弱、生物量小都是限制效果 的最主要因素之一。如果能探索到行之有效的处理方法，使作物在铅污染土壤中仍能快速、 大量的生长，则对于污染治理和作物增收都大有裨益。向日葵是我国乃至世界广泛栽培的经济作物之一。它的种子俗称葵瓜子，既是老 少皆宜的餐后零食，又可榨出低胆固醇的葵花油，油渣做饲料。它的花朵明亮大方，可做切 花。向日葵是铅富集植物，可通过植物萃取的方式去除土壤中的铅，然而，铅的毒害作用使 向日葵根量少，生长缓慢，生物量小。如果能提高向日葵的耐铅能力，使之保持较高富集系 数的同时，增大生物量，则增加了土壤铅的萃取总量，加快治理进程，并可收获较高的产量， 创造经济和社会价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种对向日葵利用促生微生物抵抗土壤铅污染的方法。本 方法提高可叶片叶绿素和类胡萝卜素含量，增强光合速率，并反过来促进向日葵根系的生长，从而达到提高抗性，增产增效的目的。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的，其所述微生物为乙基绿假单孢菌 (Chloropseudomonas ethylica) SH II _6，厌氧光照培养 4-5 天，获得浓度为 1-2 X IO8 个活 菌/ml的菌剂，于向日葵播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200-500倍，在向日 葵生长时期叶面喷施。所述的，其菌剂制备的培养基为=NH4Cl 1. Og, MgSO4 · 7Η20 0. 2g, NaHCO3 3. Og, K2HPO4 0. 4g, NaCl 1. 5g，蛋白胨 1. 0g，水 1000ml，PH 中性，121°C灭菌30分钟。所述的，其菌剂施用方法包括自两叶 期开始或植株刚刚显示生长缓慢、叶片较小时起，每1-2周叶面喷施1次，连续喷施4次停 止，并在典型生长期叶面喷施，直至采收结束。本专利技术的优点与效果是本菌剂使用方法简便，生产成本低，生产过程安全，使用后环境友好，对铅污染土 壤中向日葵生长有高效促进性。极显著增加叶绿素、类胡萝卜素含量，株高茎粗、干重、鲜 重、光合作用均大幅度提高，丙二醛、脯氨酸、POD酶等抗性指标含量提高，使向日葵能耐受 1500mgPb/kg 土壤的铅污染土壤，有效缓解因铅中毒引起的根量少，生长缓慢，地上部分弱 小等现象，增产效果显著。具体实施例方式乙基绿假单孢菌能在有光照缺氧的环境中进行不产氧光合作用，同高等植物相 比，它也含有类似的捕光色素，但只有一个光系统，即PSI，而且原始供氢体不是水，而是 H2S(或一些有机物)。乙基绿假单孢菌在自身的同化代谢过程中，又完成了产氢、固氮、 分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。乙基绿假单孢菌的这些特征弥 补了向日葵在土壤铅污染逆境中因根系吸收营养不足而导致的地上部光合作用减弱的现 象，大大提高叶片叶绿素和类胡萝卜素含量，增强光合速率，并反过来促进向日葵根系的生 长，从而达到提高抗性，增产增效的目的。乙基绿假单孢菌厌氧光照培养，因此不需要一 般菌剂生产所需的发酵罐等大型仪器设备，生产成本很低，生产过程安全，使用后环境友 好，又高效，操作简单，是解决铅污染土壤种植向日葵问题的首选办法。高效微生物的筛 选与菌剂制备首先筛选适合于向日葵叶面喷施、增产显著的微生物群，再从该微生物群 体中逐一筛选，获得一株显著促进向日葵在铅污染土壤中生长的菌株一乙基绿假单孢菌 (Chloropseudomonas ethylica) SH II -6。菌剂制备的培养基为NH4C1 1. 0g, MgSO4 · 7H20 0. 2g, NaHCO3 3. 0g, K2HPO4O. 4g, NaCl 1.5g，蛋白胨 l.Og，水 lOOOmL，PH 中性，121°C灭菌 30 分钟。厌氧光照培养4-5天，获得浓度为1-2X108个活菌/ml的菌剂。实施例1向日葵播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释500倍，自两叶期开始，每周 叶面喷施1次，连续喷施4次停止，至初花期，仍取500倍液，每2周叶面喷施1次，直至采 收结束。注意，进入花期后，只喷施茎叶，不喷施花盘。实施例2向日葵播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200倍，于两叶期叶面喷施1 次，现蕾期叶面喷施1次，盛花期叶面喷施1次，成熟期叶面喷施1-2次。注意，进入花期后， 只喷施茎叶，不喷施花盘。实施例3在较高浓度铅污染土壤(如1500mgPb/kg土壤)中，以植株刚刚显示生长缓慢、叶 片较小时起，取菌剂稀释200倍，每周叶面喷施1次，连续喷施4次停止，至再次发生生长缓 慢时，取菌剂稀释500倍，每周叶面喷施1次，连续喷施2次停止。从盛花期开始，以200倍 液叶面喷施2次，间隔2周以上。注意，进入花期后，只喷施茎叶，不喷施花盘。其它水肥等管理正常。权利要求，其特征在于所述微生物为乙基绿假单孢菌(Chloropseudomonas ethylica)SHⅡ 6，厌氧光照培养4 5天，获得浓度为1 2×108个活菌/ml的菌剂，于向日葵播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200 500倍，在向日葵生长时期叶面喷施。2.根据权利要求1所述的，其特征在于菌剂 制备的培养基为NH4Cl 1. Og, MgSO4 · 7Η20 0. 2g，NaHCO3 3. Og, K2HPO4 0. 4g，NaCl 1. 5g，蛋 白胨 1. 0g，7K 1000ml, PH 中性，121°C本文档来自技高网...

【技术保护点】
叶面喷施微生物提高向日葵耐铅性的方法，其特征在于所述微生物为乙基绿假单孢菌（Ｃｈｌｏｒｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｅｔｈｙｌｉｃａ）ＳＨⅡ－６，厌氧光照培养４－５天，获得浓度为１－２×１０↑［８］个活菌／ｍｌ的菌剂，于向日葵播种前，取菌剂稀释１０倍浸种，此后菌剂稀释２００－５００倍，在向日葵生长时期叶面喷施。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邵双，谭淑莉，张万忠，
申请(专利权)人：沈阳化工大学，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]