System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种同时检测氯雷他定和地氯雷他定的半抗原、人工抗原及其制备方法和应用技术_技高网

一种同时检测氯雷他定和地氯雷他定的半抗原、人工抗原及其制备方法和应用技术

技术编号:40364962 阅读:10 留言:0更新日期:2024-02-20 22:12
本发明专利技术公开了一种同时检测氯雷他定和地氯雷他定的半抗原、人工抗原及其制备方法和应用,利用所述半抗原制备得到人工抗原,并进一步免疫动物制备得到抗体,建立了同时检测氯雷他定和地氯雷他定的方法,氯雷他定最低检测限LOD为0.30ng/mL,半抑制浓度IC50为3.01ng/mL,定量检测范围为0.71ng/mL~12.81ng/mL,地氯雷他定最低检测限LOD为0.14ng/mL,半抑制浓度IC50为1.43ng/mL,定量检测范围为0.39ng/mL~5.19ng/mL,对氯雷他定和地氯雷他定的类似物均无交叉反应,可对样品中的氯雷他定和地氯雷他定进行快速的定性和定量检测,操作简便,检测结果准确可靠。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品检测,更具体地,涉及一种同时检测氯雷他定和地氯雷他定的半抗原、人工抗原及其制备方法和应用


技术介绍

1、氯雷他定(loratadine)又称开瑞坦、克敏能等,呈白色结晶状粉末,味微苦,无特殊气味,易溶于水及乙醇;地氯雷他定(desloratadine)呈白色结晶状粉末,无臭,易溶于乙醇。氯雷他定和地氯雷他定分别是一种第二代和第三代抗组胺药,被广泛应用于医药领域,对过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、荨麻疹及其他过敏性皮肤病有良好医治效果,但也有一定副作用,长期大量服用抗过敏类药物,会引起嗜睡、眩晕、口干、体质量增加、室性心律不齐、心室颤动等不良反应。因此为了加强对氯雷他定和地氯雷他定药物的监管,有必要建立一种准确、便捷的氯雷他定和地氯雷他定的快速检测方法。

2、目前氯雷他定和地氯雷他定的检测主要集中在化妆品、药品、和食品等样品中。分析方法主要有气相色谱法(gc)、气相色谱-质谱联用法(gc-ms)、高效液相色谱法等。在药品、食品中尚未有相关标准对其含量进行限量,仅仅在《化妆品安全技术规范》中,氯雷他定和地氯雷他定均属于禁用组分,检出限为1ng/ml,所用方法为液相色谱-串联质谱法,存在设备昂贵、需要专业操作人员、无法用于现场检测等缺点。

3、免疫检测技术具有高灵敏、特异性强、快速、操作简便等优点在药物残留检测领域已被广泛应用,比起仪器等检验方法有很多优势。但目前,较少有关于氯雷他定、地氯雷他定半抗原合成结构的报道,也缺少可用于检测的抗体。所以,目前仍缺少特异性好且灵敏度高的氯雷他定和地氯雷他定快速检测方法。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是为了克服现有技术的不足,提供一种同时检测氯雷他定和地氯雷他定的半抗原、人工抗原及其制备方法和应用。

2、本专利技术的第一个目的是提供一种氯雷他定和地氯雷他定半抗原。

3、本专利技术的第二个目的是提供结构式如式(ⅰ)所示化合物的制备方法。

4、本专利技术的第三个目的是所述氯雷他定和地氯雷他定半抗原在制备氯雷他定和地氯雷他定人工抗原中的应用。

5、本专利技术的第四个目的是提供一种氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原。

6、本专利技术的第五个目的是提供所述氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原在制备氯雷他定和地氯雷他定的抗体中的应用。

7、本专利技术的第六个目的是提供一种氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原的组合物。

8、本专利技术的第七个目的是提供所述氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原的组合物在制备检测氯雷他定和地氯雷他定的试剂盒中的应用。

9、本专利技术的第八个目的是提供一种检测氯雷他定和地氯雷他定的试剂盒

10、为了实现上述目的,本专利技术是通过以下技术方案予以实现的:

11、本专利技术针对氯雷他定和地氯雷他定的免疫学检测,设计并合成了氯雷他定和地氯雷他定的半抗原dlltd-nc,具体包含结构式如式(ⅰ-1)所示的dlltd-2c、结构式如式(ⅰ-2)所示的dlltd-4c、和结构式如式(ⅰ-3)所示的dlltd-6c,相应人工抗原免疫动物后产生的抗体可同时检测氯雷他定和地氯雷他定。

12、因此本专利技术要求保护一种氯雷他定和地氯雷他定半抗原,其结构式如式(ⅰ)所示,

13、

14、其中,n=1、3或5。

15、进一步要求保护结构式如式(ⅰ)所示化合物的制备方法,包括以下步骤:

16、地氯雷他定的乙腈溶液、溴代脂肪酸酯类化合物和碳酸钾充分混合反应,所得反应物在碱性条件下充分水解,纯化之后将ph调节至酸性,即得。

17、优选地,所述纯化的方法为,将水解产物利用柱层析分离纯化,其中固定相为硅胶粉,流动相为体积为30:2:1的乙酸乙酯、甲醇和氨水的混合物,将所得纯化产物溶解于甲醇,然后与氢氧化钠水混合充分反应。

18、所述溴代脂肪酸酯类化合物为溴乙酸乙酯,所述结构式如式(ⅰ)所示化合物,n=1,即结构式如式(ⅰ-1)所示

19、

20、其系统命名法命名为:2-(4-(8-氯-5,6-二氢-11h-苯并[5,6]环庚并[1,2-b]吡啶-11-亚基)哌啶-1-亚基)乙酸,即

21、2-(4-(8-chloro-5,6-dihydro-11h-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-ylidene)piperidin-1-yl)acetic acid;

22、所述溴代脂肪酸酯类化合物为溴丁酸乙酯,所述结构式如式(ⅰ)所示化合物,n=3,即结构式如式(ⅰ-2)所示

23、

24、其系统命名法命名为:4-(4-(8-氯-5,6-二氢-11h-苯并[5,6]环庚并[1,2-b]吡啶-11-亚基)哌啶-1-亚基)丁酸,即

25、4-(4-(8-chloro-5,6-dihydro-11h-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-ylidene)piperidin-1-yl)butan oic acid;

26、所述溴代脂肪酸酯类化合物为溴己酸乙酯,所述结构式如式(ⅰ)所示化合物,n=5,即结构式如式(ⅰ-3)所示

27、

28、其系统命名法命名为:6-(4-(8-氯-5,6-二氢-11h-苯并[5,6]环庚并[1,2-b]吡啶-11-亚基)哌啶-1-亚基)己酸,即6-(4-(8-chloro-5,6-dihydro-11h-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-ylidene)piperidin-1-yl)hexan oic acid。

29、还要求保护所述氯雷他定和地氯雷他定半抗原在制备氯雷他定和地氯雷他定人工抗原中的应用。

30、优选地,所述地氯雷他定、溴代脂肪酸酯类化合物和碳酸钾的摩尔比为1:(1~3):(4~6)。

31、更优选地,所述地氯雷他定、溴代脂肪酸酯类化合物和碳酸钾的摩尔比为1:2:6。

32、作为一个具体是实施例,所示制备方法为:将地氯雷他的乙腈溶液,与溴代脂肪酸酯类化合物和碳酸钾混合,充分反应,得到反应物;柱层析(固定相为硅胶粉,流动相为乙酸乙酯:甲醇:氨水=30:2:1)分离纯化反应物,得到纯化产物;将纯化产物的甲醇溶液与氢氧化钠水溶液充分反应,反应结束后调节ph为6~7,即得。

33、以及,一种氯雷他定和地氯雷他定人工抗原,由所述氯雷他定和地氯雷他定半抗原偶联载体蛋白得到,其结构式如式(ⅱ)所示,

34、

35、其中,n=1、3或5,p为载体蛋白。

36、优选地,所述载体蛋白为乳铁蛋白和鸡卵白蛋白。

37、具体的,其制备的方法包括以下步骤:

38、作为一个具体的实施例,一种氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原,结构式如式(ⅱ)所示,其中,n=1,所述载体蛋白为乳铁蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种氯雷他定和地氯雷他定的半抗原,其特征在于,其结构式如式(Ⅰ)所示,

2.结构式如式(Ⅰ)所示化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,

4.权利要求1所述氯雷他定和地氯雷他定的半抗原在制备氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原中的应用。

5.一种氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原,其特征在于,由权利要求1所述氯雷他定和地氯雷他定的半抗原偶联载体蛋白得到,其结构式如式(Ⅱ)所示,

6.根据权利要求5所述的氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原,其特征在于,所述载体蛋白为乳铁蛋白或鸡卵白蛋白。

7.权利要求5所述氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原在制备氯雷他定和地氯雷他定的抗体中的应用。

8.一种氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原的组合物,其特征在于,包含免疫原和包被原,所述免疫原由权利要求5所述氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原偶联乳铁蛋白得到;所述包被原由权利要求5所述氯雷他定和地氯雷他的定人工抗原偶联鸡卵白蛋白得到。

9.权利要求8所述氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原的组合物在制备检测氯雷他定和地氯雷他定的试剂盒中的应用。

10.一种检测氯雷他定和地氯雷他定的试剂盒,其特征在于,利用权利要求8所述氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原的组合物在制备得到;或含有权利要求8中所述免疫原免疫动物制备得到的抗体和所述包被原。

...

【技术特征摘要】

1.一种氯雷他定和地氯雷他定的半抗原,其特征在于,其结构式如式(ⅰ)所示,

2.结构式如式(ⅰ)所示化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,

4.权利要求1所述氯雷他定和地氯雷他定的半抗原在制备氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原中的应用。

5.一种氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原,其特征在于,由权利要求1所述氯雷他定和地氯雷他定的半抗原偶联载体蛋白得到,其结构式如式(ⅱ)所示,

6.根据权利要求5所述的氯雷他定和地氯雷他定的人工抗原,其特征在于,所述载体蛋白为乳铁蛋白或鸡卵白蛋白。

7.权利要求5所述氯雷他...

【专利技术属性】
技术研发人员:雷红涛陈彩燕刘志威陈佳虹关甜徐振林吴青陈新文孟曼
申请(专利权)人:利诚检测认证集团股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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