【技术实现步骤摘要】
本技术涉及一种医疗器械，尤其涉及一种可测定红细胞渗透脆性的细胞分析仪。
技术介绍
1、正常的红细胞(rbc)形态呈双面凹的圆盘形。而红细胞膜属于半透膜，所谓半透膜就是水可以自由通过而其他分子和离子都不能自由通过的膜。水通过细胞膜的规律是：由低渗透压的一侧通过细胞膜进入高渗透压的一侧，经过一定时间达到渗透平衡(即两侧渗透压相等)为止。将红细胞置于低渗溶液中，因细胞内外存在渗透压差，水分子进入红细胞，红细胞会逐渐膨胀并双侧凸起，当体积增加30％时成为球形，当体积增加45％～60％则细胞膜损伤而发生破裂，这时血红蛋白逸出细胞外，竞留下一个双凹圆碟形细胞膜空壳，称为影细胞。根据已获得国家专利技术专利“黄显文.一种提高细胞分析仪参数准确度的方法及装置(专利号：201911042990.4)”中提出的红细胞渗透平衡模型可知，设低渗溶液渗透压为π、红细胞内液渗透压为π0、达到渗透平衡时平均每个红细胞流入的水总量为δv，红细胞原来的体积为v0，那么有：δv＝(1-π0/π)v0。根据这一公式可以算出达到渗透平衡时水分子进入平均每个红细胞的水总量。当水分子进入红细胞会使其发生膨胀，膨胀到一定程度时红细胞会发生破裂，破裂后红细胞内容物(血红蛋白,hgb)会释出，血红蛋白本身有颜色它在波长540nm有很高的吸收峰，此时可用光电比色计或生化分析仪测出它的吸光度，吸光度的大小与溶液中血红蛋白的量成正相关，根据这些特征，可以设计出红细胞渗透脆性的不同测定方法。
2、目前临床上红细胞渗透脆性的测定方法主要有以下三种：
3、1、红细胞渗
4、
5、
6、准确配制0.68％、0.64％、0.60％、0.56％、0.52％、0.48％、0.44％、0.40％、0.36％、0.32％、0.28％、0.24％共12个不同浓度的氯化钠溶液管(例如配制0.68％：用分析天平称取经100℃烘干的分析纯氯化钠0.6800g于100ml溶量瓶中，加适量双蒸馏水或高纯水溶解后，再加高纯水至刻度混匀即可)，每管1ml，抽取患者肝素锂抗凝血约1.5ml，立即滴于各管中，每管一滴(一滴约50微升，贫血患者可加2滴)，轻轻摇匀，室温静置2小时观察结果。每次试验均应同时作正常对照。观察结果：从高浓度管开始观察，上层溶液开始出现透明红色且管底有红细胞者为开始溶血管；溶液透明红色，管底完全无红细胞者为完全溶血管。参考值：开始溶血：4.2～4.6g/l(即0.42～0.46％或71.8～78.6mmol/l)。完全溶血：3.2～3.4g/l(即0.32～0.34％或54.7～58.1mmol/l)，患者与正常对照，溶血管的nacl浓度相差0.4g/l具有诊断价值(叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[m].第三版.南京：东南大学出版社，2006：168－169.)。传统法优点：是红细胞渗透脆性经典的筛查方法，操作简单。缺点：①操作时间过长；②判定结果采用目测观察，因检测人员的主观判断会导致人为因素的偏差，结果可能会影响临床的诊断；③传统法仅能观察到溶血的大致情况，不能量化评判红细胞破裂的程度，缺乏客观的标准化依据。
7、2、红细胞渗透脆性试验(一管法)：一管法是在红细胞渗透脆性试验(传统法)的基础上改良的一种方法。原理：是通过测定rbc在特定浓度的nacl溶液中的溶血率来判定红细胞的渗透脆性。主要成份有a液(用于红细胞渗透脆性检测)、b液(用于终止红细胞溶血)和c液(皂素，用于红细胞溶解)。一管法主要操作：购买商品红细胞渗透脆性试验(一管法)试剂盒，按说明书操作即可。例如配制a液：用一个100毫升容量瓶，放上一个小漏斗，将a母液倒进漏斗中，用双蒸馏水或高纯水洗净装a母液瓶和盖，将洗液倒进水容量瓶内，然后加双蒸馏水至刻度，混匀即可。配制b液、c液：参照a液按说明书配制100毫升b液和100毫升c液。然后按照如下操作：①取干净试管1支，加入a液1ml，放37℃水浴箱预热1-2分钟，加入抗凝全血10μl，立刻混匀，继续放在37℃保温5分钟；②加入b液1ml，混匀,于离心机3000转/分钟，离心5分钟；③吸取上清液轻轻倒入1.0cm×1.0cm的比色杯中，于分光光度计530nm波长读取光密度d1(以纯化水作空白对照)；④向试管中加入c试验液0.4ml，混匀，待血液全部溶血(透明红色)后，将比色杯中已比色的溶液倒入试管中混匀，将混匀后的溶液倒入比色杯中，再于530nm波长比色，读取光密度d2；⑤溶血率(％)＝d1/(d2×1.25)×100％，计算出溶血率百分比。参考值：溶血率>65％为正常溶血率(指红细胞渗透脆性在正常范围内)，<55％为溶血率降低(指红细胞渗透脆性降低)，55％～65％为溶血率轻度降低(指红细胞渗透脆性降低不明显，在正常与可疑贫血症之间)(广州市米基医疗器械有限公司生产的红细胞渗透脆性检测试剂盒(一管法)说明书)。一管法优点：是目前大多数医院使用的红细胞渗透脆性的测定方法，可购买商品试剂盒做试验，对于传统法，操作时间短而更简单方便。缺点：①本法对血液标本的新鲜度要求高，应采用72小时内采集的、2－8℃保存的血液进行测试；②所有母液必须放置2－8℃保存，如果有结晶析出，用时必须放37水浴箱加温溶解并混匀后才能使用，否则会影响结果。
8、3、红细胞渗透脆性试验(流式细胞术法):测定红细胞渗透脆性(流式细胞术法)主要操作：首先，将20-30ul的全血与1ml的生理盐水进行混合摇匀，之后取10ul的混合液与1.2ml的生理盐水进行混合，以此制定出红细胞悬液。其次，采用线性放大方式扩大前向角散射与侧向角散射、前向角散射与time获取散点，前向角散射与time获取散点图历时204.8s，划分为a-h8个区域。最后，在每个区域中添加无菌水，以计算残留红细胞百分比(韩雪花.流式细胞术快速测定红细胞渗透脆性的临床应用研究.世界最新医学信息文摘2018年第18卷第59期)。流式细胞术法优点：本法具有较高的敏感性及特异性，对红细胞进行直观的定量检测，耗费时间短。缺点：①仪器单价高，一台低档的流式细胞仪售价高达30多万元，几乎是一台能提供rbc-o参数的传统细胞分析仪2-5倍的价格，至今很多县级医院都没有流式细胞仪，故难以普及；②操作繁琐，需要高级技术人员操作；③无法做到自动化检测。
9、渗透脆性增加：见于遗传性球形细胞性贫血(例如遗传性球型红细胞增多症)、自身免疫性溶血性贫血伴球型红细胞增多症、椭圆型红细胞增多症、遗传性口型红细胞增多症的部分病例及ii型糖尿病、先天性溶血性黄疸(家族性溶血性黄疸)等。渗透脆性减低：见于各型地中海贫血(简称为地贫)、缺铁性贫血、镰状红细胞性贫血、血红蛋白病、脾切除术后、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.可测定红细胞渗透脆性的细胞分析仪，其特征在于：由测定网织红细胞功能的传统细胞分析仪、原装细胞稀释液、第一稀释器、第二稀释器、低渗溶液组成；所述细胞分析仪的第一稀释器经硅胶管与原装细胞稀释液相连，第二稀释器经硅胶管与低渗溶液相连。
2.根据权利要求1所述的细胞分析仪，其特征在于：测定网织红细胞功能的所述传统细胞分析仪，第一稀释器吸取一定体积的原装细胞稀释液，加入一定体积的全血标本混匀，经所述细胞分析仪测定得到RBC-O参数，设这个参数的值等于A；第二稀释器吸取一定体积的低渗溶液，加入一定体积的全血标本混匀，经所述细胞分析仪测定得到RBC-O参数，设这个参数的值等于B；(A-B)×100％/A＝R,R表示红细胞在低渗溶液破裂的红细胞百分比。
【技术特征摘要】
1.可测定红细胞渗透脆性的细胞分析仪，其特征在于：由测定网织红细胞功能的传统细胞分析仪、原装细胞稀释液、第一稀释器、第二稀释器、低渗溶液组成；所述细胞分析仪的第一稀释器经硅胶管与原装细胞稀释液相连，第二稀释器经硅胶管与低渗溶液相连。
2.根据权利要求1所述的细胞分析仪，其特征在于：测定网织红细胞功能的所述传统细胞分析...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄显文，林胜元，冯建江，林锡祥，林琦云，
申请(专利权)人：江门市妇幼保健院，
类型：新型
国别省市：
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