从紫色马铃薯中提制花色苷的方法技术

一种从紫色马铃薯中提制花色苷的方法，包括采用柠檬酸酸化乙醇安全无毒地提取紫色马铃薯花色苷粗提物，及以ＡＢ－８大孔吸附树脂分离纯化紫色马铃薯花色苷，该方法采用天然产物化学及中药现代化生产技术提取，及分离纯化紫色马铃薯主要活性成分花色苷，将其制成１０～１５％纯度规格的紫色马铃薯花色苷提取物，安全有效、简便、合理、经济地实现马铃薯资源的高值化利用和系列产品的工业化生产，充分体现了绿色化学生产的理念。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种提取、分离纯化园艺植物中生理活性成分的绿色化学工艺技术， 尤指一种采用柠檬酸酸化乙醇提取、及以AB-8大孔吸附树脂分离纯化紫色马铃薯花色苷 的绿色提取、及分离纯化方法。
技术介绍
花色苷是植物次生代谢过程中产生的类黄酮物质，具有抗氧化、抗衰老、防止血管 硬化等多种生理作用，可作为食品、药品和化妆品等领域的天然原料。自20世纪50年代以 来，随着对合成花色苷安全性问题的深入认识，许多国家大幅度减少甚至完全禁止合成花 色苷用于食品、药品和化妆品等领域，使得天然花色苷成为了当前天然产物研究开发的热点o紫色马铃薯(Solanum tuberosum L.)营养丰富，是一种富含花色苷的园艺植物资 源。2000年以来，国内各研究机构对其进行了大量的栽培改良研究，如云南省农业科学院马 铃薯研发中心改良筛选的200多份不同品系的彩色马铃薯，黑龙江省牡丹江市蔬菜科学研 究所培育的高淀粉黑色马铃薯品系，青海的青薯168、宁夏的宁薯1号和宁薯3号等。目前 在新疆、四川、青海、广西、陕西等地均已开始大面积种植。Gisela Jansen等研究认为，紫色 马铃薯花色苷的含量最高可达2. 704g/kg，花色苷平均含量可达0. 65g/kg鲜薯。研究表明，花色苷不稳定，易受温度、光、pH等的影响而发生颜色和性质的变化，但 紫色马铃薯花色苷是以酰化为主的花色苷，能在加工、储藏及应用过程中保持较好的稳定 性。紫色马铃薯花色苷主要为锦葵色素、牵牛花色素、芍药色素、飞燕草色素的酰化衍生物。 然而，目前国内外对紫色马铃薯的开发利用主要集中于淀粉品质成分上，而花色苷等生理 活性成分大多作为副产物而被浪费。目前提取、分离纯化花色苷及马铃薯花色苷的主要技术方法有提取针对花色苷的提取，国内外主要有溶剂提取法、发酵法、酶法提取法、超临界 C02提取法、微波辅助提取法、液态静高压辅助提取法、高压脉冲电场辅助提取法等。李知敏 研究认为采用体积分数75%的酸化乙醇、料液比(质量浓度)1 10、50°C下浸提60min的 提取技术，所得蓝莓花色苷含量最高。霍琳琳等研究认为采用体积分数30%的酸化乙醇、 料液比1 10、60°C下提取60min的提取技术，所得桑椹花色苷得率最高。Revilla等研 究认为，采用的HC1甲醇溶液提取葡萄花色苷，效果最好。韩永斌等利用发酵法对紫甘 薯花色苷的提取进行了研究，结果表明，酵母接种量为10%时，发酵温度27°C，初始pH值 为3. 0，发酵72h，花色苷产量达到66. 6g/ml。李颖畅等采用纤维素酶、果胶酶及两者复合 对蓝莓花色苷进行了提取，发现纤维素酶效果较好，且采用酶用量5mg/g、料液比(质量浓 度)1 8、pH5.0、提取时间60min、酶解温度45°C的操作参数，花色苷提取率最高。时海香 等研究了超临界C02萃取常山胡柚天然色素的工艺，认为最佳工艺条件为萃取时间2h、萃 取压力25MPa、原料与乙醇(体积分数95%)比(质量浓度)1 3、萃取温度35°C，花色苷 提取率可达96. 87%。许正虹等以甘薯粉为原料，在微波条件下萃取其花色苷，认为最佳萃3取工艺参数为微波辐射功率700W、温度70°C、辐射时间6. 37min、固液比1 15、HC1体积 分数为0. 3%。Corrales等采用液态静高压辅助提取的方法从葡萄皮中提取花色苷，认为 最优工艺参数为100%乙醇，温度50°C，压力600MPa，花色苷产率提高23%。张燕等研究了 高压脉冲电场处理对红梅花色苷提取过程的影响，结果表明，用3.0kV/cm PEF处理420个 脉冲后，用酸化甲醇提取15min，可使花色苷的提取率达到54. 24%。分离纯化目前花色苷分离纯化的方法主要是层析法，包括纸层析(PC)、薄层层 析(TLC)、柱层析(CC)、高效液相色谱法(HPLC)以及高速逆流色谱法(HSCCC)等。卢其能 等对紫色马铃薯Chieflmn和YNZH两个品种采用正己烷萃取纯化，再用薄层层析花色苷进 行分离。Fiorini采用制备型高效液相色谱对草莓、接骨木、茄子、萝卜等的花色苷进行了分 离纯化，结果表明HPLC是分离单糖基或酰化的二糖基和三糖基花色苷的一种有效的方法。 Torgils Fossen采用XAD-7离子交换树脂层析对一种挪威马铃薯品种的花色苷进行纯化， 再用流动相为甲酸-水(1 19，体积比)㈧和甲酸水甲醇(1 4 5，体积比)(B) 的制备型HPLC来进一步分离，使其中花色苷组分得到很好的分离。Eichhorn等采用XAD-7 树脂及洗脱剂甲醇乙酸(19 1，体积比)对马铃薯花色苷进行纯化.再用高速逆流色谱法 对其组分进行了分离。Rodriguez-Saona等采用丙酮和氯仿提取马铃薯花色苷，然后采用氯 仿丙酮(2 1，体积比)过夜萃取，收集水相，在40°C下使残余的丙酮蒸发，分离得到了 花色苷。显然，上述有关马铃薯花色苷提取及植物源性花色苷分离纯化方法虽能制备具有 一定纯度和得率的马铃薯花色苷提取物，但由于受到技术手段的限制以及加工过程中使用 了大量的有毒有机溶剂或化学制剂，使得产品明显存在安全性欠佳或者纯度与得率不高、 生产量小、易吸湿、功效不明显、产品的品质和市场竞争力不足等缺陷。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术的不足，提供一种高效、绿色安 全、低成本、高得率、较高纯度、适用于工业生产的，为以 柠檬酸酸化乙醇提取、及AB-8大孔吸附树脂分离纯化紫色马铃薯花色苷的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案是一种从紫色马铃薯中提制 花色苷的方法，该方法包括如下步骤a、以柠檬酸酸化乙醇提取紫色马铃薯花色苷粗提物将新鲜紫色马铃薯遮光切碎 打浆，用体积浓度为60 95%并经柠檬酸调节pH值为1. O 3. O的乙醇，按1公斤紫色马 铃薯浆加10 30升乙醇的比例在30 70°C下提取60 120分钟，得到的粗滤液过200 目尼龙布，离心，取澄清液，离心转速为3000 5000转/分，离心时间为5 15min ；将澄 清液在-0. 05 -0. 09MPa、40 45°C下浓缩，回收乙醇溶剂后真空冷冻干燥，即得紫色马铃 薯花色苷粗提物；b、将上述花色苷粗提物以AB-8大孔吸附树脂分离纯化按1 3克上述花色苷粗 提物加10 30毫升水的比例溶解花色苷粗提物，得溶解液；在室温下，将溶解液上样，使 AB-8大孔吸附树脂吸附至饱和，上样体积2 4BV，上样流速1 3BV/h，然后先采用1 3BV的水以1 3BV/小时的流速冲洗杂质，再用2 6BV的50 90%体积浓度的食用乙 醇以1. 0 3BV/小时的流速洗脱花色苷，收集洗脱液，并将洗脱液在-0. 05 -0. 09MPa、40 70°C条件下浓缩回收乙醇，真空冷冻干燥，即得紫色马铃薯花色苷提取物。AB-8大孔吸附树脂的处理试验所用新购树脂需先用体积浓度为80 95%食用 乙醇浸泡20 30小时，充分溶胀后装柱，用体积浓度为80 95%的食用乙醇清洗至流 出液加等量蒸馏水无白色浑浊为止，再用蒸馏水洗至无醇味即可。已使用过树脂则需采用 1 5% NaOH浸泡1 5小时后水洗至中性，再用1 5%柠檬酸浸泡1 5h后水洗至本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从紫色马铃薯中提制花色苷的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：　　ａ、以柠檬酸酸化乙醇提取紫色马铃薯花色苷粗提物：将新鲜紫色马铃薯遮光切碎打浆，用体积浓度为６０～９５％并经柠檬酸调节ｐＨ值为１．０～３．０的乙醇，按１公斤紫色马铃薯浆加１０～３０升乙醇的比例在３０～７０℃下提取６０～１２０分钟，得到的粗滤液过２００目尼龙布，离心，取澄清液；将澄清液在－０．０５～－０．０９ＭＰａ、４０～４５℃下浓缩，回收乙醇溶剂后真空冷冻干燥，即得紫色马铃薯花色苷粗提物；　　ｂ、将上述花色苷粗提物以ＡＢ－８大孔吸附树脂分离纯化：按１～３克上述花色苷粗提物加１０～３０毫升水的比例溶解花色苷粗提物，得溶解液；在室温下，将溶解液上样，使ＡＢ－８大孔吸附树脂吸附至饱和，上样体积２～４ＢＶ，上样流速１～３ＢＶ／ｈ，然后先采用１～３ＢＶ的水以１～３ＢＶ／小时的流速冲洗杂质，再用２～６ＢＶ的５０～９０％体积浓度的食用乙醇以１．０～３ＢＶ／小时的流速洗脱花色苷，收集洗脱液，并将洗脱液在－０．０５～－０．０９ＭＰａ、４０～７０℃条件下浓缩回收乙醇，真空冷冻干燥，即得紫色马铃薯花色苷提取物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖文军，刘仲华，龚志华，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]