控制流式细胞计型测量系统的一个或多个参数的方法技术方案

本发明专利技术提供用于控制流式细胞计型测量系统的一个或多个参数的各种方法。一个实施例包括在对样本微球体进行测量时监测测量系统的参数。该方法还包括基于所述的监测实时地改变所述参数。另一种方法包括对最接近于测量系统的温度进行监测。一个这样的方法包括利用经验数据响应于所述温度而改变雪崩光电二极管的偏置电压。一种不同的此类方法包括利用特征曲线响应于所述温度而改变光电倍增管的输出。某些方法包括对将流经流式细胞计型测量系统的液体的温度进行监测，其中样本微球体被置于所述液体中。该方法还包括根据所述温度下液体的粘度来确定样本微球体的速度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术大致涉及用于。某些 实施例涉及包括基于参数监视而实时地改变流式细胞计型测量系统的一个或多个参数的 方法。
技术介绍
以下的说明和范例并不因其包含于该部分之内而被认为是现有技术。通常，流式细胞计在激光激发的聚苯乙烯小珠或者细胞线性地通过流动室的时候 提供对其荧光强度的测量。不过，流式细胞计同样可以被用于提供对其它粒子的一个或多 个特性的测量。某些系统被配置为用于测量由粒子所散射的与激发源成90°或者180° 的光的级别，两个或更多个荧光测量被用于确定分类，也就是粒子的“身份”，被称为“指示 器”(importer)的另外的荧光测量往往被用于量化所关注的化学反应。各荧光测量是在不 同的波长下作出的。由于流式细胞计型测量仪器的测量能力已有所改进，流式细胞计可以提供有用的 测量的应用领域大大地增加了。例如，对于诸如生物化验(例如，置换或竞争化验、非竞争 化验、酶化验)、核酸分析、以及组合化学等应用，流式细胞计已经变得越来越有助于提供数 据。特别是，由于进行化验的速度(特别是与其他化验方法(例如常规的酶联免疫吸附分 析“ELISA”形式)相比较)的原因，流式细胞计越来越普及。在通常环境下，为了确保精确可靠的化验结果，作为准备仪器以用于适当的用途 和测量的一个或多个初始步骤，进行流式细胞计的校准。此外，除非每个流式细胞计的荧光 通道都被校准为进行相同的读取，否则对于样本间的变化源，就没有保证。如果没有采用 完整而稳固的校准方法的话，很有可能同一个仪器在不同的几天里对同一个样本给出不同 的读取结果。类似地，如果任意两个仪器即使在被正确地设置的前提下仍然不能保证给出 相同的结果，尽管流式细胞计可能对样本中的细胞进行识别和区分的测量效果要好一些， 但其作为医疗仪器的用途可能是不大的。因此，已经开发了许多不同的用于校准流式细胞计的方法。起先，进行了有效的研 究，开发出降低在校准时操作者的涉及程度的方法，从而提高了校准的精度。这一成果很大 程度上使得流式细胞计的校准中的很多步骤实现了自动化。此外，进行了有效的研究以在 其它方面提高校准的精度。例如，该成果已导致校准中的进步，诸如使用具有统一而恒定的 特性的校准标准。特别是，由于生物样本的特性会随时间而变化，用于流式细胞计的生物校 准标准基本上被具有更加稳定的特性的综合校准标准(例如，聚合微球体或粒子)所取代。 此外，通常情况下，校准微球体具有与测试微球体的特性基本相似(即，尽可能地相近)的3特性(例如，尺度、体积、表面特性、粒度特性、折射率、荧光性等)。人们确信，通过将对与在 测试中预期的值尽可能接近的值进行校准，此类校准微球体提高了流式细胞计的精度。改进流式细胞计的校准的努力同时也导致了与校准有关的流式细胞计的参数的 数量的增加。例如，流式细胞计测量系统的激光激发、探测器、以及电子会随时间变化，从而 影响最终测量结果。因此，流式细胞计的这些参数，以及在某些场合下的其它参数，往往与 校准方法有关。其它的一些更加难以控制的参数同样影响流式细胞计的测量。样本速度就是一个 这样的参数。Ortyn等人的编号为6，532，061美国专利就描述了一个用于测量样本速度的 方法的例子，该专利通过被引用而结合于此，如同在这里完整提出那样。在该方法中，对象 夹带在流过感应或者测量空间的液体流中。在这些实施例的每一个中，具有大致统一的节 距的光栅被用于调制从移动的对象接收到的光。该调制光被转换为电信号，电信号被数字 化，然后进行快速傅利叶变换(FFT)以确定对象的速度。然而，Ortyn等人的用于测量样本 速度的方法和系统有一些缺陷。例如，这些方法需要相当复杂的光栅和软件。此外，由于光 栅所要求的精密度以及其制造的复杂性，光栅可能相当昂贵。而且，由于诸如移动的对象造 成所检测的光的光学畸变，可能会导致样本速度测量不那么精确。然而，流式细胞计测量的最大误差通常是由温度变化造成的。此外，已经发现，现 有的可行的校准方法不能够充分地说明温度变化对流式细胞计进行的测量的影响。例如， Ortyn等人所描述的方法和系统尽管其试图校准一些参数，但并未考虑温度变化，以及这 些变化将如何影响流式细胞计的测量。因此，尽管已经有很多不同的可行的校准方法，但还 是可以通过更加精确地考虑在不同的流式细胞计测量中或是在单个的流式细胞计测量中 的温度变化来对这些方法作出进一步的改进。因此，发展用于对流式细胞计测量系统的至少主要的误差因素进行控制的方法应 该是有益的，这些方法可以被整合从而产生实时的校准方案。
技术实现思路
如前所细述的那样，通常最流式细胞计的最显著的误差因素是温度变化。由于温 度可以是一个可测量的量，而且其效应背后的物理机理是已知的，因此有可能降低甚至是 完全消除这些误差源中最关键的一环。已经识别了一些测量误差的原因和对于这些测量误差原因的实时校正技术。此 外，已经创建了一种使用校准微球体进行实时微调节的方法，其中校准微球体因直径与可 能包含于微球体样本混合物中的待测物略有不同而可被识别。微调节过程的额外特征包括 系统健康状态的实时识别、一个或多个通道中的非线性性的校正、和/或流式细胞计测量 系统的有用的指示器动态范围的显著扩展。所描述的实施例可用于补偿主要由温度导致的 系统变化，从而扩展了操作的校准范围。此外，需要指出的是，此处描述了用于控制流式细胞计测量系统的一个或多个参 数的方法的若干不同的实施例。要理解，每个方法都可单独被使用和执行。另外，两个或更 多的方法可以被结合使用，这取决于例如测量系统的各种组件的可变性和/或测量系统的 期望精度。本专利技术的一个实施例涉及一种。该方法包括在测量系统进行样本微球体的测量时，监测流式细胞计型测量系统的一 个或多个参数。该方法还包括基于监测实时地改变所述一个或多个参数。在一个实施例中，监测一个或多个参数可包括使用校准微球体的测量来监测一个 或多个参数。校准微球体的直径与样本微球体的直径不同(例如，稍小)。在某些实施例 中，该一个或多个参数可包括由测量系统的探测器所产生的输出信号。输出信号响应于由 样本微球体所散射的光。在另一个实施例中，监测一个或多个参数可包括使用校准微球体的测量来监测一 个或多个参数。校准微球体的直径与样本微球体的直径不同(例如，稍小)，并且至少部分 校准微球体具有不同的光谱地址(spectral address)。在一个此类实施例中，所述一个或 多个参数包括测量系统的动态范围。在另一个实施例中，对参数的改变可包括扩展测量系 统的一个或多个通道的动态范围。在又一个实施例中，所述一个或多个参数可包括对系统 健康状态的测量。系统健康状态的测量可包括分类通道的健康状态、指示器通道的健康状 态、或者其结合。在某些实施例中，所述一个或多个参数可包括样本微球体的测量中的线性 性。在这样一个实施例中，测量可包括对分类通道的测量、对指示器通道的测量、或其组合。 在另一个此类实施例中，对参数的改变包括在测量中大致地对任何非线性性进行校正。在某些实施例中，参数可包括测量系统的雪崩光电二极管的参数。在一个此类实 施例中，其方法还可包括使用经验获得数据来确定在改变参数时所要使用的校正因子。在 另一个实施例中，参数可包括测量系统的光电倍增管的参数。在还有一个实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于控制流式细胞计型测量系统的一个或多个参数的方法，包括：对将要流经流式细胞计型测量系统的液体的温度进行监测，其中样本微球体被置于所述液体中；以及根据在所述温度下的液体的粘度来确定测量系统中的样本微球体的速度。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：WD罗斯，DE穆尔，
申请(专利权)人：卢米尼克斯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]