【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术部分涉及核酸提取和纯化的新的组合物和方法。
技术介绍
1、大多数的核酸提取系统遵循某些基本的步骤。这些系统必须裂解生物样品和释放核酸，使核酸结合一些类型的表面，去除污染物，并且优选地以更浓缩的形式洗脱核酸。一些系统使用固体基质例如玻璃纤维或过滤器来结合核酸，其他系统使用磁性颗粒。一些不需要高水平的敏感性的系统可能有更简单的过程，但全部都必须有将核酸靶标呈给可以鉴定它的测定的方法。也使用预加载的筒来简化自动化。使用预加载的系统，仪器就不需要精细的泵送机制和移液机制来移动流体。然而，预加载的筒本身是复杂的设备，制造成本高，并且可能仍需要步骤例如机械混合。
技术实现思路
1、根据本公开内容的一方面，提供了用于从生物样品中提取和分离核酸的多层组合物，该多层组合物包含：a)反应容器，在该反应容器中组装多层组合物的层；b)反应容器内的最上层，其包括浓缩的半固体裂解糊剂；c)中间层，其包含低温可熔化的蜡；和d)较低的洗涤层，其包含水性凝胶。在一些方面，反应容器包含基本上为环状横截面的管，该管具有顶部和底部。在一些方面，将管的顶部和底部可逆地密封。在某些方面，管为j形或u形。在一些方面，生物样品是液体生物样品。在一些方面，液体生物样品是血清样品、血液样品、血浆样品、唾液样品或其他类型的生物样品。在一些方面，低温可熔化的蜡在室温下是固体。在一些方面，低温可熔化的蜡在高于50-55摄氏度的温度下开始转变为液体。在某些方面，多层组合物进一步包含邻近层，其包含与洗涤层流体连通的洗脱缓冲液。在一些
2、根据本公开内容的另一方面，提供用于从生物样品中提取和纯化核酸的方法，该方法包括：a)提供用于从生物样品中提取和分离核酸的多层组合物，该多层组合物包含：i)反应容器，在该反应容器中组装多层组合物的层；ii)反应容器内的最上层，其包含浓缩的半固体裂解糊剂；iii)中间层，其包含低温可熔化的蜡；和iv)较低的洗涤层，其包含水性凝胶；b)将生物样品在最上层上面成层，从而形成溶解的裂解糊剂，其中溶解的裂解糊剂进一步包含多个金属氧化物包覆的磁性颗粒；c)加热反应容器以启动中间层的熔化，这导致密度反转，其特征为中间层熔化并且上升穿过溶解的浓缩的半固体糊剂，从而将生物样品、溶解的浓缩的半固体裂解糊剂以及多个金属氧化物包覆的磁性颗粒进行混合，从而导致生物样品内的核酸与金属氧化物包覆的颗粒的结合；c)在反应容器周围或邻近放置磁体，从而吸引金属氧化物包覆的颗粒和结合的核酸；和d)移动磁体，从而驱动所吸引的金属氧化物包覆的颗粒和结合的核酸至少部分迁移穿过水性凝胶，从而去除提取污染物。在一些方面，低温可熔化的蜡在室温下为固体。在一些方面，低温可熔化的蜡在高于50-55摄氏度的温度下开始转变为液体。在某些方面，多层组合物进一步包含与洗涤层流体连通的洗脱缓冲液，和移动磁体，从而驱动所吸引的金属氧化物包覆的颗粒和结合的核酸迁移穿过水性凝胶以及进入洗脱缓冲液。在一些方面，洗脱缓冲液是低离子强度的洗脱缓冲液，任选地进一步其中低离子强度的洗脱缓冲液是磷酸盐缓冲液。在一些方面，多层组合物的中间层包含多个低温可熔化的蜡层，其中多个低温可熔化的蜡层的每层都通过插入密封层来分隔。在一些方面，分离多个低温可熔化的蜡层的每层的多层组合物的插入密封层包含较低温可熔化的蜡，与紧靠其下的层相比，所述较低温可熔化的蜡在更低的温度下熔化。在其他方面，分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的多层组合物的插入密封层包含矿物油。在一些方面，分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的多层组合物的插入密封层包含琼脂糖。在一些方面，将多个低温可熔化的蜡层成层使得，在使用中，随着反应容器被加热，多个低温可熔化的蜡层的每层从最上面到最下面顺序地熔化。在一些方面，多个金属氧化物包覆的颗粒是钛氧化物颗粒。在一些方面，钛氧化物颗粒是铜钛(cuti)包覆的颗粒。在某些方面，在提供要素a)的多层组合物之后提供多个金属氧化物包覆的颗粒。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种用于从生物样品中提取和分离核酸的多层组合物，所述多层组合物包含：
2.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述反应容器包含基本上为环状横截面的管，所述管具有顶部和底部。
3.根据权利要求2所述的多层组合物，其中将所述管的顶部和底部可逆地密封。
4.根据权利要求2所述的多层组合物，其中所述管为J形或U形。
5.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述生物样品是液体生物样品。
6.根据权利要求5所述的多层组合物，其中所述液体生物样品是血清样品、血液样品、血浆样品、唾液样品或其他类型的生物样品。
7.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述低温可熔化的蜡在室温下为固体。
8.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述低温可熔化的蜡在高于50-55摄氏度的温度下开始转变为液体。
9.根据权利要求1所述的多层组合物，其进一步包含邻近层，所述邻近层包含与洗涤层流体连通的洗脱缓冲液。
10.根据权利要求9所述的多层组合物，其中所述洗脱缓冲液是低离子强度的洗脱缓冲液。
1
12.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述中间层包含多个低温可熔化的蜡层，其中所述多个低温可熔化的蜡层的每层通过插入密封层来分隔。
13.根据权利要求12所述的多层组合物，其中分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的所述插入密封层包含较低温可熔化的蜡，与紧靠其下的层相比，所述较低温可熔化的蜡在更低的温度下熔化。
14.根据权利要求12所述的多层组合物，其中分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的所述插入密封层包含矿物油。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的多层组合物，其中将多个低温可熔化的蜡层成层使得，在使用中，多个低温可熔化的蜡层的每层从最上面到最下面顺序地熔化。
16.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述中间层进一步包含内部对照。
17.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述浓缩的半固体裂解糊剂包含GITC、Tris-HCl、Tris碱和Tween-20。
18.根据权利要求17所述的多层组合物，其中所述浓缩的半固体裂解糊剂具有少于10％的残留水分并且不流动。
19.根据权利要求18所述的多层组合物，其中所述浓缩的半固体裂解糊剂具有少于5％的残留水分。
20.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述水性凝胶包含琼脂糖或聚丙烯酰胺。
21.根据权利要求31所述的多层组合物，其中所述多个金属氧化物包覆的颗粒以相对于计算的存在于生物样品中的核酸的量，预计代表摩尔过量的量存在。
22.一种用于从生物样品中提取和纯化核酸的方法，所述方法包括：
23.根据权利要求22所述的方法，其中所述低温可熔化的蜡在室温下为固体。
24.根据权利要求22所述的方法，其中所述低温可熔化的蜡在高于50-55摄氏度的温度下开始转变为液体。
25.根据权利要求22所述的方法，其中所述多层组合物进一步包含与洗涤层流体连通的洗脱缓冲液，并且移动磁体，从而驱动所吸引的金属氧化物包覆的颗粒和结合的核酸迁移穿过水性凝胶并进入洗脱缓冲液中。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述洗脱缓冲液是低离子强度的洗脱缓冲液，任选地进一步其中所述低离子强度的洗脱缓冲液是磷酸盐缓冲液。
27.根据权利要求22所述的方法，其中所述多层组合物的中间层包含多个低温可熔化的蜡层，其中多个低温可熔化的蜡层的每层通过插入密封层来分隔。
28.根据权利要求27所述的方法，其中分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的所述多层组合物的插入密封层包含较低温可熔化的蜡，与紧靠其下的层相比，所述较低温可熔化的蜡在更低的温度下熔化。
29.根据权利要求27所述的方法，其中分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的所述多层组合物的插入密封层包含矿物油。
30.根据权利要求27所述的方法，其中将所述多个低温可熔化的蜡层成层使得，在使用中，随着反应容器被加热，多个低温可熔化的蜡层的每层从最上面到最下面顺序地熔化。
31.根据权利要求1所述的多层组合物，其中要素b)的最上层进一步包含多个金属氧化物包覆的磁性颗粒。
32.根据权利要求31所述的多层组合物，其中所述金属氧化物包覆的颗粒是钛氧化物颗粒。
33.根据权利要求31所述的多层组合物，其中所述钛氧化物包覆的颗粒是铜钛(CuTi)包覆的颗粒。
<...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于从生物样品中提取和分离核酸的多层组合物，所述多层组合物包含：
2.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述反应容器包含基本上为环状横截面的管，所述管具有顶部和底部。
3.根据权利要求2所述的多层组合物，其中将所述管的顶部和底部可逆地密封。
4.根据权利要求2所述的多层组合物，其中所述管为j形或u形。
5.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述生物样品是液体生物样品。
6.根据权利要求5所述的多层组合物，其中所述液体生物样品是血清样品、血液样品、血浆样品、唾液样品或其他类型的生物样品。
7.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述低温可熔化的蜡在室温下为固体。
8.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述低温可熔化的蜡在高于50-55摄氏度的温度下开始转变为液体。
9.根据权利要求1所述的多层组合物，其进一步包含邻近层，所述邻近层包含与洗涤层流体连通的洗脱缓冲液。
10.根据权利要求9所述的多层组合物，其中所述洗脱缓冲液是低离子强度的洗脱缓冲液。
11.根据权利要求10所述的多层组合物，其中所述低离子强度的洗脱缓冲液是磷酸盐缓冲液。
12.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述中间层包含多个低温可熔化的蜡层，其中所述多个低温可熔化的蜡层的每层通过插入密封层来分隔。
13.根据权利要求12所述的多层组合物，其中分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的所述插入密封层包含较低温可熔化的蜡，与紧靠其下的层相比，所述较低温可熔化的蜡在更低的温度下熔化。
14.根据权利要求12所述的多层组合物，其中分隔多个低温可熔化的蜡层的每层的所述插入密封层包含矿物油。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的多层组合物，其中将多个低温可熔化的蜡层成层使得，在使用中，多个低温可熔化的蜡层的每层从最上面到最下面顺序地熔化。
16.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述中间层进一步包含内部对照。
17.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述浓缩的半固体裂解糊剂包含gitc、tris-hcl、tris碱和tween-20。
18.根据权利要求17所述的多层组合物，其中所述浓缩的半固体裂解糊剂具有少于10％的残留水分并且不流动。
19.根据权利要求18所述的多层组合物，其中所述浓缩的半固体裂解糊剂具有少于5％的残留水分。
20.根据权利要求1所述的多层组合物，其中所述水性凝胶包含琼脂糖或聚丙烯酰胺。
21.根据...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。