【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种鉴别皂角米与滇皂角米的方法，特别是一种皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法。
技术介绍
1、皂角米来源于皂荚(gleditsia sinensis lam.)种子的外胚乳，俗称皂角精、雪莲子、皂角仁，是食品添加剂皂角多糖胶的来源。皂角米主要含蛋白质、总糖、维生素、氨基酸、微量元素等成分，具有补肾、润肺、祛痰开窍、利尿、养心通脉、清肝明目、提神补气的功效；总能量为3.36千卡/克，总碳水化合物为61％，氨基酸总量为3.13％。中国的皂荚属植物有8种，主产于山东、河南、四川、贵州、云南等省。经调研发现，市场上销售的皂角米还来源于滇皂荚(gleditsia japonica var.delavayi)种子外胚乳的加工品，习称滇皂角米，其含有丰富的微量元素、氨基酸，符合高钾低钠饮食结构的食物。市场上将皂角米、滇皂角米均作为皂角米销售，没有区分品种，且二者性状较为相似，不易区分，目前缺乏相关定性鉴别的质量评价方法。
2、目前尚未有文献报道皂角米和滇皂角米指纹图谱鉴别的研究。本专利技术方法简便、快速、所需药材量少，测得的指纹图谱特征及差异明显，重复性高，可用于皂角米和滇皂角米的快速、准确鉴别与质量控制。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供了一种皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法。该方法采用50％甲醇为提取溶剂,采用超声辅助萃取提取制备供试品溶液，用hplc方法在一定条件下测得指纹图谱并用于皂角米与滇皂角米的鉴别。该方法简便、快速、所需药材量少，测得的指纹图谱
2、本专利技术的技术方案：
3、一种皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，所述指纹图谱鉴别方法是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：
4、(1)皂角米供试品溶液制备：取适量皂角米粉末，加甲醇提取，过滤，取续滤液，得皂角米供试品溶液；
5、(2)滇皂角米供试品溶液制备：取适量滇皂角米粉末，加甲醇提取，提取液过滤，取续滤液，得滇皂角米供试品溶液；
6、(3)分别吸取皂角米供试品溶液和滇皂角米供试品溶液进行高效液相色谱进样检测，记录色谱图；
7、(4)指纹图谱的建立：测定13批不同产地皂角米与滇皂角米hplc指纹图谱,应用2004年a版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》对图谱的数据进行分析对比，计算得出皂角米与滇皂角米的hplc指纹图谱的共有模式，作为皂角米与滇皂角米的鉴别用标准指纹图谱；根据特征指纹峰位及主要特征峰面积的大小，即可确定药材的品种与质量；
8、(5)相似度的评价：将皂角米和滇皂角米的指纹图谱，导入2004年a版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》进行相似度分析，考察色谱峰的一致性，进行相似度评价。
9、前述步骤(1)中，皂角米供试品溶液制备：取皂角米粉末过5号筛，精密称定0.95-1.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10ml，密塞，称重，超声30-60min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
10、具体的说，前述步骤(1)中，皂角米供试品溶液制备：取皂角米粉末过5号筛，精密称定1.00g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10ml，密塞，称重，超声30min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
11、前述步骤(2)中，滇皂角米供试品溶液制备：取滇皂角米粉碎成粉末过5号筛，精密称定0.95-1.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10ml，密塞，称重，超声30-60min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得；
12、具体的说，前述步骤(2)中，滇皂角米供试品溶液制备：取滇皂角米粉末过5号筛，精密称定1.00g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10ml，密塞，称重，超声30min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
13、前述步骤(3)中，所述色谱条件如下：
14、色谱柱为diamnonsil c18色谱柱，规格为250mm×4.6mm，5μm，柱温为30℃，进样量20μl，流速为1ml/min，检测波长为254nm，流动相a为乙腈，流动相b为0.01％的磷酸水溶液，洗脱方式为梯度洗脱，
15、前述步骤(3)中，所述梯度洗脱条件如下：0～5min，5％～13％ a；5～15min，13％～14.8％ a；15～17min，14.8％～16％ a；17～18min，16％～20％ a；18～19min，20％～25％ a；19～22min，25％～25％ a；22～25min，25％～30％a；25～32min，30％～100％ a。
16、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
17、本法操作简便，过程简单且易于控制，方法重复性及准确性好，特征性强，只需通过共有峰的个数与相似度便可进行快速鉴别，结果更加客观准确。
18、在仪器精密度考察中各共有峰相对峰面积的rsd值为0.18～2.57％，相对保留时间的rsd值为0.05～0.88％；在方法重复性考察中各共有色谱峰相对峰面积的rsd值为0.18～2.90％，相对保留时间的rsd值为0.05～0.17％；在稳定性考察中各共有色谱峰相对峰面积的rsd值为0.18～2.57％，相对保留时间的rsd值为0.05～0.88％。
19、将皂角米、滇皂角米图谱，导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004年a版进行相似度分析，考察色谱峰的一致性，进行相似度评价。10批皂角米的相似度大于0.850；3批滇皂角米的相似度大于0.940；皂角米与滇皂角米相比，皂角米相似度均高于0.900，滇皂角米的相似度均低于0.700。
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1.一种皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述指纹图谱鉴别方法是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(1)中，皂角米供试品溶液制备：取皂角米粉末过5号筛，精密称定0.95-1.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10mL，密塞，称重，超声30-60min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
3.根据权利要求2所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(1)中，皂角米供试品溶液制备：取皂角米粉末过5号筛，精密称定1.00g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10mL，密塞，称重，超声30min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
4.根据权利要求1所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(2)中，滇皂角米供试品溶液制备：取滇皂角米粉碎成粉末过5号筛，精密称定0.95-1.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10mL，密塞，称重，超声30-60min
5.根据权利要求4所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(2)中，滇皂角米供试品溶液制备：取滇皂角米粉末过5号筛，精密称定1.00g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10mL，密塞，称重，超声30min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
6.根据权利要求1所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述色谱条件如下：
7.根据权利要求6所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述梯度洗脱条件如下：0～5min，5％～13％A；5～15min，13％～14.8％A；15～17min，14.8％～16％A；17～18min，16％～20％A；18～19min，20％～25％A；19～22min，25％～25％A；22～25min，25％～30％A；25～32min，30％～100％A。
...【技术特征摘要】
1.一种皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述指纹图谱鉴别方法是采用高效液相色谱法检测，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(1)中，皂角米供试品溶液制备：取皂角米粉末过5号筛，精密称定0.95-1.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10ml，密塞，称重，超声30-60min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
3.根据权利要求2所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(1)中，皂角米供试品溶液制备：取皂角米粉末过5号筛，精密称定1.00g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇10ml，密塞，称重，超声30min，冷却，补足失重，过滤，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
4.根据权利要求1所述皂角米与滇皂角米的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：所述步骤(2)中，滇皂角米供试品溶液制备：取滇皂角米粉碎成粉末过5号筛，精密称定0.95-1.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入50％...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴红梅，王祥培，徐锋，秦苹，丁芹，张艳焱，刘米艳，吴登莉，廖玉兰，杨贤友，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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