【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于农业集约化，涉及一种防控白芷根腐病的拮抗菌le395及其在防控白芷根腐病的应用，以及采用加拿大一枝黄花秸秆和/或玉米秸秆堆肥生产有机肥，并将其与拮抗菌le395发酵液混合的生物有机肥，该生物有机肥可用于防控白芷土传病害问题。
技术介绍
1、白芷(angelica dahurica)是多年生草本植物，喜湿润、不耐干旱。白芷具有解表散寒、祛风止痛、通鼻窍、消肿排脓、祛风止痒的功效，其含有的主要化学成分还有抗肿瘤和保肝的作用。由于可利用土地资源不断减少，导致白芷轮作周期短，种植白芷具有连作障碍，且生态群落结构组成比较单一，物种多样性较低，为病害优势种群的出现创造了有利条件，严重制约了白芷产业的发展。研究表明，白芷土传病害是由多种病原菌引起的土传根部病害，其中主要是由镰刀菌(fusarium oxysporun)引起的根腐病。目前缺乏防治白芷根腐病的有效手段，利用土壤微生物防治病害是综合防治土传病害的重要措施之一。生物防治技术满足了现代农业对环境保护、食品安全等的要求，是实现农业可持续的有效方法之一。
2、相比于蔬菜瓜果等农作物，生物有机肥在中药材种植中可应用的产品种类较少。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种防控白芷根腐病的拮抗菌。
2、一种防控白芷根腐病的拮抗菌le395，分类命名为产酶溶杆菌(lysobacterenzymogenes)，于2023年9月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为cgmcc n
3、拮抗菌le395主要生物学特性为在tsa培养基上最佳的生长温度28℃，培养1～2天，形成2～4mm的菌落。
4、本专利技术的另一个目的是提供所述的拮抗菌le395在防控白芷根腐病的应用。
5、本专利技术的另一个目的是提供所述的拮抗菌le395在制备防控白芷根腐病的生物有机肥中的应用。
6、本专利技术的另一目的在于提供一种生物有机肥，所述的生物有机肥是将拮抗菌le395接种到加拿大一枝黄花秸秆和/或玉米秸秆为主要原料堆肥制得的有机肥中得到的，生物有机肥中拮抗菌le395孢子数≥108个/g。
7、本专利技术的另一目的在于提供一种生物有机肥的制备方法，包括以下步骤：
8、步骤(1)、制备发酵液：将拮抗菌le395接种到液体培养基中，摇床培养得到种子液；将种子液倒入装有灭菌的液体培养基的发酵桶中，通入无菌空气，28℃～30℃发酵2d，得到发酵液；
9、步骤(2)、制备生物有机肥：以加拿大一枝黄花秸秆和/或玉米秸秆为主要原料，进行堆肥，制得有机肥；将有机肥和步骤(1)制得的发酵液混合均匀，制得生物有机肥，生物有机肥中拮抗菌le395孢子数≥108个/g。
10、步骤(1)中，所述的液体培养基的配方为：蛋白胨15g/l，大豆蛋白胨5g/l，氯化钠5g/l，ph 7.1～7.5。
11、优选的，所述的种子液的培养：拮抗菌le395单菌落接种到100ml液体培养基中，置于摇床中，在温度28～30℃下，以转速180r/min培养24h，得到种子液。
12、优选的，所述的发酵液的制备：将按照接种量2.5％，将种子液倒入装有灭菌的液体培养基的发酵桶中，通入无菌空气，28℃～30℃发酵2d，得到发酵液。
13、优选的，所述的发酵液中拮抗菌le395的孢子数为108～109个/ml。
14、步骤(2)中，优选的，所述的有机肥是由以下方法制得的：将加拿大一枝黄花秸秆或玉米秸秆破碎、烘干后，加入秸秆质量1％～5％的尿素，调节水分至60％～65左右，堆制成发酵堆，前三天每天翻动一次，增加发酵堆与空气的接触面积，使发酵堆升温，第四天开始每天测量发酵堆温度，当发酵堆温度高于70℃时，加大翻堆频率，发酵25d左右，当发酵堆颜色变深，水分含量下降至30％～40％左右、温度降至35℃～40℃左右时，停止发酵，得到有机肥。
15、优选的，按照发酵液和有机肥的用量比1:10ml/g，将有机肥和发酵液混合均匀。
16、本专利技术的另一个目的是提供所述的生物有机肥在防控白芷根腐病和/或促进白芷生长的应用。
17、本专利技术的有益效果：
18、1、本专利技术生防菌株le395对引起白芷根腐病害的病原菌镰刀菌(fusariumoxysporun)有较好的抑制作用。
19、2、利用生防菌株le395将秸秆尤其是加拿大一枝黄花开发成更高附加值的生物有机肥，孢子数量至少达到108个/g；且以加拿大一枝黄花作为生产原料，其量大、价廉、易得，可满足生物有机肥生产的营养需求，且生产成本仅有常规生物有机肥的1/2～1/3，有利于产酶溶杆菌生物有机肥的推广应用。同时，也能够防控加拿大一枝黄花。因此，采用加拿大一枝黄花生产溶杆菌生物有机肥是一种低成本高效的生产方法。
20、3、本专利技术生物有机肥的作用机制在于生物有机肥中的拮抗菌le395能很好的定殖在白芷的根际，并产生拮抗物质，抑制白芷根际病原微生物的生长，也提高了作物的抗逆能力。试验结果表明，在白芷根腐病的土壤上施用生物有机肥后，对白芷根腐病害的生物防治率达80％以上，确保集约化农业的顺利发展，对防控白芷根腐病，提高中药材品质，保护环境有重要意义。
21、4、溶杆菌生物有机肥是生物菌肥，没有因为化学农药的使用带来一系列问题，因而有利于白芷的无公害生产，农民可以减少其他防治土传病害化学农药的使用量，这不仅可以为农民节省开支，而且有利于提高中药材的质量，从而增加农民的收入。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种防控白芷根腐病的拮抗菌Le395，分类命名为产酶溶杆菌(Lysobacterenzymogenes)，于2023年9月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.28570。
2.权利要求1所述的拮抗菌Le395在防控白芷根腐病的应用。
3.权利要求1所述的拮抗菌Le395在制备防控白芷根腐病的生物有机肥中的应用。
4.一种生物有机肥，其特征在于：所述的生物有机肥是将权利要求1所述的拮抗菌Le395接种到加拿大一枝黄花秸秆和/或玉米秸秆为主要原料堆肥制得的有机肥中得到的，生物有机肥中拮抗菌Le395孢子数≥108个/g。
5.一种权利要求4所述的生物有机肥的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的生物有机肥的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的液体培养基的配方为：蛋白胨15g/L，大豆蛋白胨5g/L，氯化钠5g/L，pH 7.1～7.5。
7.根据权利要求5所述的生物有机肥的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的种子液的培养：拮
8.根据权利要求5所述的生物有机肥的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的发酵液中拮抗菌Le395的孢子数为108～109个/mL。
9.根据权利要求5所述的生物有机肥的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述的有机肥是由以下方法制得的：将加拿大一枝黄花秸秆或玉米秸秆破碎、烘干后，加入秸秆质量1％～5％的尿素，调节水分至60％～65％，堆制成发酵堆，前三天每天翻动一次，第四天开始每天测量发酵堆温度，当发酵堆温度高于70℃时，加大翻堆频率，当发酵堆颜色变深，水分含量下降至30％～40％、温度降至35℃～40℃时，停止发酵，得到有机肥。
10.权利要求4所述的生物有机肥在防控白芷根腐病和/或促进白芷生长的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种防控白芷根腐病的拮抗菌le395，分类命名为产酶溶杆菌(lysobacterenzymogenes)，于2023年9月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为cgmcc no.28570。
2.权利要求1所述的拮抗菌le395在防控白芷根腐病的应用。
3.权利要求1所述的拮抗菌le395在制备防控白芷根腐病的生物有机肥中的应用。
4.一种生物有机肥，其特征在于：所述的生物有机肥是将权利要求1所述的拮抗菌le395接种到加拿大一枝黄花秸秆和/或玉米秸秆为主要原料堆肥制得的有机肥中得到的，生物有机肥中拮抗菌le395孢子数≥108个/g。
5.一种权利要求4所述的生物有机肥的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的生物有机肥的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的液体培养基的配方为：蛋白胨15g/l，大豆蛋白胨5g/l，氯化钠5g/l，ph 7.1～7.5。
【专利技术属性】
技术研发人员：王孝芳，游川，张驰，梁睿，梁青青，韦中，徐阳春，沈其荣，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
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