【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医用的配置品，尤其涉及一种富含紫杉醇的果胶胶束及其制备方法。
技术介绍
1、紫杉醇是从太平洋红豆杉的树皮中提取出的活性成分，是目前临床使用最广泛的广谱性抗肿瘤药物之一，常用于治疗乳腺肿瘤、卵巢肿瘤、头颈肿瘤、肺肿瘤等。紫杉醇可通过在肿瘤细胞的多极纺锤体上引起染色体错聚，增加了染色体不稳定性从而发挥其抗肿瘤作用。紫杉醇具有良好的抗肿瘤活性，但其水溶性较差，显著限制了其医药价值。传统的紫杉醇制剂通过增溶剂如聚氧乙烯蓖麻油(el)的作用增加其溶解性。但是由于el会引起严重的副作用，给患者造成极大的痛苦，严重影响紫杉醇的治疗效果。几十年来，研发替代el的紫杉醇新型制剂一直是国内外研究的热点。目前已有紫杉醇脂质体、紫杉醇白蛋白纳米粒、聚合物胶束等产品，代替传统的紫杉醇制剂，显著减低了治疗过程中产生的毒副作用。
2、虽然改进后的紫杉醇制剂的毒副作用显著降低，但是对正常细胞还是会产生一定的毒副作用，且不具有靶向性。提高紫杉醇的靶向性对降低紫杉醇的毒副作用具有重要意义。已有的研究表明肿瘤细胞的微环境与正常细胞的微环境有显著差异。肿瘤细胞生长所需要的能量及物质都是来自于正常细胞的供给。肿瘤细胞的异常生长使肿瘤细胞的微环境的ph小于7，呈酸性。此外肿瘤细胞的快速生长需要大量的铁元素的供给。肿瘤细胞上述特征对肿瘤细胞的靶向治疗具有重要意义。
3、另一方面，肿瘤细胞快速生长需要的是二价铁元素。来源于食物的三价铁元素会先和转铁蛋白相结合形成络合物，然后通过血液循环运送到全身各器官的细胞外环境中。该络合物与细胞膜膜表面
4、因此，针对肿瘤细胞对铁元素需求量高和肿瘤细胞微环境成酸性等特点，需要一种紫杉醇含量高、能够有效提高紫杉醇的靶向作用和定向缓释作用，且毒副作用小的紫杉醇产品。
技术实现思路
1、有鉴于现有技术的上述缺陷，在本专利技术的第一方面，提供了一种制备工艺简单、生产周期短、生产成本低的富含紫杉醇的果胶胶束的制备方法，包括如下步骤：
2、(1)调节果胶水溶液的ph为7.50～7.90，得到原始胶束溶液；
3、(2)向所述原始胶束溶液中加入氯化铁水溶液，经均质、浓缩，得到果胶浓缩液；
4、(3)所述果胶浓缩液与紫杉醇的乙醇溶液经混合，完成紫杉醇的装载，随后调节混合溶液的ph为6.95～7.05，得到封装胶束溶液；
5、(4)所述封装胶束溶液经干燥，得到胶束粗产物，胶束粗产物经纯化去除未装载的紫杉醇，得到富含紫杉醇的果胶胶束。
6、基于本专利技术的技术方案，本专利技术的核心构思在于，通过控制ph在特定范围内，并以氯化铁为密封剂，来调节果胶胶束的形态及对紫杉醇的封装。
7、步骤(1)中，通过控制溶液ph为7.50～7.90，以满足果胶胶束颗粒完整性和稳定性的要求；将ph控制在该范围的原因在于，ph值过大会对果胶的酯化度产生影响，影响果胶与氯化铁中铁离子的交联程度，进而改变果胶胶束的大小和紫杉醇的负载量；而过小会改变果胶溶液中原始胶束的形态，从而改变加入氯化铁后形成的改性胶束的颗粒稳定性和胶束中紫杉醇的含量。
8、步骤(2)中，以氯化铁作为胶束的密封剂，利用均质过程，改变胶束大小、尺寸和结构，为后续紫杉醇的负载及进一步的密封做准备。
9、步骤(3)中，紫杉醇的乙醇溶液加入到果胶浓缩液中，在混合过程中将紫杉醇装载在果胶胶束的疏水性内腔中，从而有效解决了紫杉醇难溶于水的问题。在果胶中加入氯化铁后溶液的ph会降低，此时胶束结构处于未完全封闭状态，因此可以将水溶性差的紫杉醇装载在果胶胶束的内腔内。当紫杉醇装载结束后，将溶液的ph调节为6.95～7.05即可实现果胶胶束的完全密封，进而减少后续步骤处理造成的已负载的紫杉醇含量的损失。此时应严格控制溶液ph为6.95～7.05，这是因为ph值过大会改变形成胶束结构的果胶分子的酯化度，进而改变胶束的结构特性，从而改变装载有紫杉醇的胶束的作用效果；过小会破坏胶束的密封性增加后续处理中会紫杉醇的溶出率，降低果胶胶束中紫杉醇的含量。
10、本领域中果胶的来源是多样的，例如柑橘果胶和苹果果胶等类型皆适用于本专利技术的制备方法；与来源相比，影响果胶效用的主要参数是果胶的分子量和酯化度。优选的，所述步骤(1)中，所述果胶水溶液的浓度为0.20wt.％；该溶液所采用的果胶的分子量为1.31～1.37×104，酯化度为45％～55％。在以上参数限定范围内的果胶具有低临界胶束浓度值和对外界微环境ph极度敏感等特点，能够根据细胞微环境的变化改变胶束的完整性和粘附性，进而实现紫杉醇的定点释放。
11、氯化铁的水溶液的浓度变化会直接影响果胶胶束中紫杉醇的含量和胶束中紫衫醇的定点释放效果。浓度过高会使果胶胶束形成大颗粒微凝胶，降低胶束中含有的紫杉醇含量；过低会降低胶束颗粒的密封性，在降低胶束中紫杉醇含量的同时还会影响胶束中紫衫醇的定向释放效果。因此，需要将其浓度控制在特定的合适范围内。优选的，所述步骤(2)中，所述氯化铁水溶液的浓度为0.06～0.16mm；在该浓度范围下，氯化铁水溶液的添加量等同于所述原始胶束溶液的质量。
12、实际制备过程中，氯化铁水溶液内可能存在还原态的二价铁离子，为了避免其不利影响，可以通过氧化将其转化为所需的三价铁离子。优选的，所述步骤(2)中，所述氯化铁水溶液加入前通过纯氧对其进行处理，避免溶液中存在二价亚铁离子。
13、均质过程的效果是由多因素主导的，温度过高和过低都会改变胶束形态、大小和密封特性，且温度过高造成果胶分子结构降解，进一步改变胶束结构特性。均质速率过快会在均质过程中产生大量的热能进而改变胶束结构特性，过慢会使果胶胶束与氯化铁反应不均匀，进而影响胶束的结构特性。时间过长会因均质过程中产生大量的热能进而改变胶束结构特性，过短会也会使果胶胶束与氯化铁反应不均匀，进而影响胶束的特性。优选的，所述步骤(2)中，所述均质的条件为在15～25℃下以12000～14000rpm的速率处理，在该温度及速率范围下，均质的时间为2min。
14、优选的，所述步骤(2)中，所述浓缩后所得果胶浓缩液的体积为原体积的10％。
15、通过果胶浓缩液的高添加量以保证在提高果胶胶束中紫杉醇含量的同时，减少乙醇用量对果胶胶束结构的影响，混合比过大会造成紫杉醇用量多大，增加生产成本的同时且增加乙醇对果胶胶束结构影响几率，过小会降低果胶胶束中紫杉醇的含量。优选的，所述步骤(3)中，所述紫杉醇的乙醇溶液的浓度为60～120mg/ml；在该浓度范围下，紫杉醇的乙醇溶液的添加量与本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种富含紫杉醇的果胶胶束的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述果胶水溶液的浓度为0.20wt.％；该溶液所采用的果胶的分子量为1.31～1.37×104，酯化度为45％～55％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述氯化铁水溶液的浓度为0.06～0.16mM；在该浓度范围下，氯化铁水溶液的添加量等同于所述原始胶束溶液的质量。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述氯化铁水溶液加入前通过纯氧对其进行处理，避免溶液中存在二价亚铁离子。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述均质的条件为在15～25℃下以12000～14000rpm的速率处理，在该温度及速率范围下，均质的时间为2min。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述浓缩后所得果胶浓缩液的体积为原体积的10％。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述紫杉醇的
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述混合于避光条件下进行，在20℃下以380rpm的速率搅拌3h。
9.一种富含紫杉醇的果胶胶束，其特征在于：采用如权利要求1～8任一项所述的方法制成。
...【技术特征摘要】
1.一种富含紫杉醇的果胶胶束的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述果胶水溶液的浓度为0.20wt.％；该溶液所采用的果胶的分子量为1.31～1.37×104，酯化度为45％～55％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述氯化铁水溶液的浓度为0.06～0.16mm；在该浓度范围下，氯化铁水溶液的添加量等同于所述原始胶束溶液的质量。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述氯化铁水溶液加入前通过纯氧对其进行处理，避免溶液中存在二价亚铁离子。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述均...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘芳，叶静萍，罗劲松，刘宏，李莉，王华倩，范传会，
申请(专利权)人：武汉大学人民医院湖北省人民医院，
类型：发明
国别省市：
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