【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及基于steap4荧光定量pcr诊断活动性结核病的试剂盒及其应用。
技术介绍
1、结核病是由结核分枝杆菌感染引起的疾病。
2、造成结核病流行现状有多方面的原因，其中缺乏特异、有效的活动性结核病诊断技术是至关重要的。不能早期诊断，一方面导致延误病情，增加治疗费用和死亡率；另一方面不能有效控制传染源，造成结核病的扩散。因此，研制特异、有效的活动性结核病诊断试剂对结核病防治具有重要意义。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是如何特异、有效的诊断活动性肺结核。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术首先提供了检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物的新用途。
3、本专利技术提供了检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在制备诊断或辅助诊断活动性肺结核的产品，或诊断或辅助诊断活动性肺结核中的应用。
4、本专利技术又提供了检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在制备检测或辅助检测待测者是否为活动性肺结核患者的产品，或检测或辅助检测待测者是否为活动性肺结核患者中的应用。
5、本专利技术还提供了检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在制备区分或辅助区分活动性肺结核患者和健康者(正常个体)的产品，或区分或辅助区分活动性肺结核患者和健康者(正常个体)中的应用。
6、上述任一所述应用中，所述steap4基因表达量为待测者外周血中st
7、进一步的，所述检测steap4基因表达量的物质为检测待测者外周血中steap4 基因相对表达量的试剂和/或仪器。
8、再进一步的，所述试剂包括由序列1所示的单链dna分子和序列2所示的单链 dna分子组成的引物对。
9、所述仪器包括荧光定量pcr仪，具体可为480ⅱ荧光定量pcr仪。
10、更进一步的，所述相对表达量为steap4基因参比内参基因的相对表达量。
11、所述内参基因具体为gapdh基因。
12、所述试剂还包括用于扩增gapdh基因的由序列3所示的单链dna分子和序列4 所示的单链dna分子组成的引物对。
13、所述相对表达量的计算方法具体如下：以待测者cdna为模板，采用上述引物对进行实时荧光定量pcr，然后使用2-δct法计算获得。所述待测者cdna可为待测者外周血中分离的pbmcs的cdna。
14、所述实时荧光定量pcr的体系可采用kapatm快速定量pcr试剂盒进行配制，具体如下：2×green master mix 10μl，正向引物(浓度为10μm)0.4μl，反向引物(浓度为10μm)0.4μl，cdna(5-20ng)2μl，用无核酶水补足体系至20μl。所述正向引物和所述反向引物分别为用于扩增steap4基因的序列1所示的单链dna 分子和序列2所示的单链dna分子或用于扩增gapdh基因的序列3所示的单链dna 分子和序列4所示的单链dna分子。
15、所述实时荧光定量pcr的反应条件具体如下：预变性：95℃3分钟；扩增反应： 95℃5秒，60℃30秒，在延伸阶段检测荧光信号，40个循环。
16、为了解决上述技术问题，本专利技术还提供了一种活动性肺结核诊断试剂盒。
17、本专利技术提供的活动性肺结核诊断试剂盒包括上述检测steap4基因表达量的物质。
18、本专利技术提供的活动性肺结核诊断试剂盒还包含数据处理装置；所述数据处理装置内设模块：所述模块具有如下功能：根据待测者外周血中steap4基因相对表达量判断待测者是否为活动性肺结核患者：如果待测者外周血中steap4基因相对表达量高于0.01296，则待测者为或疑似为活动性肺结核患者；如果待测者外周血中steap4 基因相对表达量等于或低于0.01296，则待测者不为或疑似不为活动性肺结核患者。
19、上述任一所述的应用或试剂盒中，所述steap4基因序列如序列表中的序列5所示。
20、上述任一所述的应用或试剂盒中，所述活动性肺结核是指由结核分枝杆菌感染引起的，结核病变发生于肺组织、气管、支气管和胸膜的慢性传染病。
21、本专利技术通过采用荧光定量pcr检测活动性肺结核患者和健康对照者pbmcs中的steap4相对表达水平发现：steap4在活动性肺结核患者pbmcs中的相对表达量显著高于健康对照者。受试者工作特征曲线分析结果表明，steap4作为标志物在活动性肺结核诊断方面具有重要价值。
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1.检测STEAP4基因表达量的物质或STEAP4作为标志物在制备诊断或辅助诊断活动性肺结核的产品中的应用。
2.检测STEAP4基因表达量的物质或STEAP4作为标志物在诊断或辅助诊断活动性肺结核中的应用。
3.检测STEAP4基因表达量的物质或STEAP4作为标志物在制备检测或辅助检测待测者是否为活动性肺结核患者的产品中的应用。
4.检测STEAP4基因表达量的物质或STEAP4作为标志物在检测或辅助检测待测者是否为活动性肺结核患者中的应用。
5.检测STEAP4基因表达量的物质或STEAP4作为标志物在制备区分或辅助区分活动性肺结核患者和健康者的产品中的应用。
6.检测STEAP4基因表达量的物质或STEAP4作为标志物在区分或辅助区分活动性肺结核患者和健康者中的应用。
7.根据权利要求1-6任一所述的应用，其特征在于：所述检测STEAP4基因表达量的物质为检测待测者外周血中STEAP4基因相对表达量的试剂和/或仪器。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述试剂包括由序列1所示的单链
9.一种活动性肺结核诊断试剂盒，其包括检测STEAP4基因表达量的物质。
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含数据处理装置；所述数据处理装置内设模块：所述模块具有如下功能：根据待测者外周血中STEAP4基因相对表达量判断待测者是否为活动性肺结核患者：如果待测者外周血中STEAP4基因相对表达量高于0.01296，则待测者为或疑似为活动性肺结核患者；如果待测者外周血中STEAP4基因相对表达量等于或低于0.01296，则待测者不为或疑似不为活动性肺结核患者。
...【技术特征摘要】
1.检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在制备诊断或辅助诊断活动性肺结核的产品中的应用。
2.检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在诊断或辅助诊断活动性肺结核中的应用。
3.检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在制备检测或辅助检测待测者是否为活动性肺结核患者的产品中的应用。
4.检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在检测或辅助检测待测者是否为活动性肺结核患者中的应用。
5.检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在制备区分或辅助区分活动性肺结核患者和健康者的产品中的应用。
6.检测steap4基因表达量的物质或steap4作为标志物在区分或辅助区分活动性肺结核患者和健康者中的应用。
7.根据权利要求1-6...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨秉芬，程小星，翟斐，蒋静，曹志红，刘艳华，王若，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第八医学中心，
类型：发明
国别省市：
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