System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂制造技术_技高网

一种针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂制造技术

技术编号:40259840 阅读:8 留言:0更新日期:2024-02-02 22:50
本发明专利技术公开了一种针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,通过以下方式制备:步骤1:经体外分离、培养获得原代调节型T细胞,同时转染编码IL37有效成分的慢病毒质粒;步骤2:对所得的调节型T细胞在低氧环境下进行无血清培养;步骤3:配制高表达IL37因子的调节型T细胞条件培养上清液;步骤4:将过表达IL37的调节T细胞上清因子与天然植物萃取成分、神经酰胺复合物等乳霜制备试剂溶解调和,得到T细胞上清细胞因子乳霜。本发明专利技术的制剂可以有效提取调节型T细胞活性因子,并高表达IL37,具有抑制变应性鼻部炎症、再生修复、舒敏解压的功效,可以制备成乳霜、鼻喷试剂、冻干粉等产品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学,具体地,涉及一种调节型t细胞上清培养液细胞分子制剂,其中高表达细胞因子il37等有效成分的组合,在缓解变应性鼻炎同时,还具有对皮肤镇静修复的美容功效。


技术介绍

1、变应性鼻炎(ar)是一种常见的上呼吸道过敏性疾病,由过敏原触发2型免疫反应引起。cd4+t细胞亚群失衡是ar的重要免疫学特征,其主要特点是辅助性t细胞th2细胞占优势。其中,免疫反应紊乱由th2细胞分泌的免疫球蛋白ig e介导,且鼻黏膜部常伴有嗜酸性粒细胞增多等炎性症状。在过去的几十年里,研究试图通过促进th1细胞发育来逆转ar的病理过程,但收效甚微。最近的研究发现,th17细胞和调节性t细胞也参与ar的发病机制,而细胞因子疗法对变应性鼻炎的缓解和治疗具有良好的应用前景。

2、炎症抑制是改善病毒感染和应变性鼻炎患者预后的重要主题。目前,治疗ar病症的主要手段有抗过敏疫苗接种、酶分子抑制剂药物、糖皮质激素等手段。随着mrna技术的出现,疫苗虽然有了长足的进步与进展,但抗过敏疫苗的主要问题是用量不好把控,且过敏性患者个体化差异较大。而酶分子抑制剂药物、糖皮质激素等手段做成的鼻滴或喷雾等制剂常导致使用者鼻腔干燥、鼻腔黏膜出血等副作用,对于药物的良好依从性方面,挑战仍然任重道远。细胞因子疗法及其组合疗法,比如先前提出的tff2+ifn-κ组合,可以有效且广谱地抑制rna病毒复制,并降低上呼吸道炎症的不良影响。同时,最近发现的il1家族细胞因子il37被发现不仅可以有效地抑制新冠病毒、流感病毒等rna病毒的复制,还可以通过抑制stat6/stat3及其磷酸化减弱过敏性鼻炎中的过敏进程,具有良好的应用前景。然而,目前市场上细胞因子疗法也存在一定问题,比如当前的许多细胞因子产品多源于基因工程,获得的生长因子往往缺乏适当的化学修饰比如糖修饰,疗效难以保证。因此,获取天然的免疫细胞产生的细胞因子,比如从免疫细胞上清提取,不仅能保证其有效活性,并且也较工业生产的蛋白具有更高的安全性。

3、调节t细胞是人体内近年来研究较多的一种重要免疫细胞,可以分泌多种有效的组织修复及抑炎细胞因子,比如il10、tgf-beta、il35及il37等多种免疫因子。il35也是一种近期被报道的细胞活性物质,能够有效地抑制多种由于感染、自身免疫病中过度激活的免疫细胞释放炎性细胞因子,抑制其的激活和分化,特别是抑制巨噬细胞和树突状细胞的功能,同时在调节ar中也具有一定的效果。因此,将调节型t细胞分泌的上清培养液中的细胞因子有效利用,可以在降低感染风险的同时,还能有效缓解变异性鼻炎的进程。从产品转化的角度讲,将免疫细胞上清培养液中的有效细胞因子组合,可通过多种不同的途径给药,如雾化吸入、滴鼻、喷雾等形式。但同时,上述方式针对皮肤或黏膜等敏感部位,有效地发挥保湿、和控油和调节皮肤稳态的作用,对于药物或产品依从性角度来讲至关重要。

4、目前市场上在生物保健类及美容产品中,多添加天然植物萃取成分,作为其中抗炎消毒、镇静缓释皮肤组织的缓释因子,且这些植物天然成分多具有效的进行保湿、缩水的功效。其中,齿叶乳香(boswellia serrata)树脂提取物提取于齿叶乳香树脂,是天然的炎症治疗物质,通过活化过氧化酶激活受体,从而快速愈合皮肤损伤,修复皮肤屏障,其安全性较高,广泛用于孕妇及婴幼儿产品;神经酰胺np/神经酰胺eop/神经酰胺ap是多种神经酰胺复合物,可以与与皮肤的天然保护屏障一起协同作用,在促进皮肤水分吸收的同时,可防止皮肤水分流失和抵御外界影响,提高自身免疫系统,消除皮肤炎症;岩藻寡糖也被研究发现具有提高皮肤稳态,清除异常细胞、加速神经新生的作用,常被作为美容护肤用品中的添加成分。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种可有效缓解变应性鼻炎、镇静修复皮肤组织的产品或组合配方,针对变应性鼻炎所引发的炎症和组织损伤,能够解决现有技术中存在的问题。

2、为了达到上述目的,本专利技术提供了一种产品,特别是一种针对变应性鼻炎及相关病症的高表达il37调节型t细胞上清细胞因子制剂,其中,该制剂的主要成分包含:

3、(a)调节型t细胞上清中的细胞因子;

4、(b)慢病毒转染或额外添加的活性il37细胞因子;

5、(c)任选的,安全性和药学上能接受的载剂及制备方式。

6、进一步地,该制剂通过以下方式制备:

7、步骤1:经体外分离、培养获得原代调节型t细胞,并对其转染编码il37有效成分的慢病毒质粒;

8、步骤2:将步骤1所得的转染后的调节型t细胞在低氧环境下进行无血清培养;

9、步骤3:将步骤2所得的培养液通过离心、浓缩、纯化,配制高表达il37因子的调节型t细胞条件培养上清液,得到过表达il37的调节t细胞上清因子;

10、步骤4:将步骤3所得的包含过表达il37的调节t细胞上清因子的上清培养液,与包括天然植物萃取成分、神经酰胺复合物的乳霜制备试剂溶解调和,得到t细胞上清细胞因子乳霜。

11、进一步地,所述制剂中,调节型t细胞条件培养得到的上清培养液,经检测含有的细胞因子,至少包括且并不限于il10、il35、tgf-beta在内的有效成分,并高表达il37抗炎及缓解变应性鼻炎蛋白因子。

12、进一步地,所述的制剂中,除提取调节型t细胞上清培养液获取抗变应性鼻炎成分外,也包括编码il10、il35、tgf-beta、il37在内的有效成分的核酸分子、含有所述有效成分核酸分子的表达载体或细胞、含有所述有效成分蛋白的细胞膜组分,以及合成的有效成分蛋白。

13、进一步地,所述的制剂中,il10包括以下有效成分:序列seq id no:1所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或seq id no:2所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

14、进一步地,所述的制剂中,tgfβ包括以下有效成分:序列seq id no:3所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或seq id no:4所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

15、进一步地,所述的制剂中,il35包括以下有效成分:序列seq id no:5、seq id no:7所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或seq id no:6、seq id no:8所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

16、进一步地,所述的制剂中,il37包括以下有效成分:序列seq id no:9所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或seq id no:10所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

17、进一步地,所述的调节型t细胞条件培养得到的上清培养液中,高表达的il37蛋白的质量为0.1~100mg;其他抗变应性鼻炎的有效成分,包括il10、il35、tgf-beta因子的蛋白质量为0.01~100mg。

18、进一步地,所述的制剂,t细胞上清中包含il10、本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,该制剂包含:

2.根据权利要求1所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,该制剂通过以下方式制备:

3.根据权利要求2所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述制剂中,调节型T细胞条件培养得到的上清培养液,经检测含有的细胞因子,至少包括且并不限于IL10、IL35、TGF-Beta在内的有效成分,并高表达IL37抗炎及缓解变应性鼻炎蛋白因子。

4.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,除提取调节型T细胞上清培养液获取抗变应性鼻炎成分外,也包括编码IL10、IL35、TGF-Beta、IL37在内的有效成分的核酸分子、含有所述有效成分核酸分子的表达载体或细胞、含有所述有效成分蛋白的细胞膜组分,以及合成的有效成分蛋白。

5.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,IL10包括以下有效成分:序列SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或SEQ ID NO:2所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

6.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,TGFβ包括以下有效成分:序列SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或SEQ ID NO:4所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

7.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,IL35包括以下有效成分:序列SEQ ID NO:5、SEQID NO:7所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:8所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

8.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,IL37包括以下有效成分:序列SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或SEQ ID NO:10所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

9.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的调节型T细胞条件培养得到的上清培养液中,高表达的IL37蛋白的质量为0.1~100mg;其他抗变应性鼻炎的有效成分,包括IL10、IL35、TGF-Beta因子的蛋白质量为0.01~100mg。

10.根据权利要求1~9中任意一项所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达IL 37调节型T细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂,T细胞上清中包含IL10、IL35、TGF-Beta、IL37的细胞因子有效成分,以分开的形式使用,或通过具有独立量活性成分的不同固定组合的形式使用。

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【技术特征摘要】

1.一种针对变应性鼻炎及相关病症的高表达il37调节型t细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,该制剂包含:

2.根据权利要求1所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达il37调节型t细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,该制剂通过以下方式制备:

3.根据权利要求2所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达il37调节型t细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述制剂中,调节型t细胞条件培养得到的上清培养液,经检测含有的细胞因子,至少包括且并不限于il10、il35、tgf-beta在内的有效成分,并高表达il37抗炎及缓解变应性鼻炎蛋白因子。

4.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达il37调节型t细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,除提取调节型t细胞上清培养液获取抗变应性鼻炎成分外,也包括编码il10、il35、tgf-beta、il37在内的有效成分的核酸分子、含有所述有效成分核酸分子的表达载体或细胞、含有所述有效成分蛋白的细胞膜组分,以及合成的有效成分蛋白。

5.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达il37调节型t细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,il10包括以下有效成分:序列seq id no:1所示的核苷酸序列、其简并序列或其剪接体核苷酸序列;或seq id no:2所示的蛋白、其剪接体或其变体的氨基酸序列。

6.根据权利要求3所述的针对变应性鼻炎及相关病症的高表达il37调节型t细胞上清细胞因子制剂,其特征在于,所述的制剂中,tgfβ包括以下有效成分:序列seq i...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱有卫高戎戎张源洲阳刘科徐明昊
申请(专利权)人:沃淄上海生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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