【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及用于制备口腔癌微肿瘤模型的专用培养基以及相关的方法产品和应用。
技术介绍
1、口腔癌具有转移率高、预后差的特点；晚期或转移患者的治愈率低，一线用药少、效果不佳；药物临床有效率不高，患者往往错过最佳治疗时间、并会引起诸多额外毒性副作用，造成医药资源的浪费。
2、根据病理类型的不同，口腔癌可分为鳞状细胞癌（以下简称鳞癌）和唾液腺腺癌（以下简称腺癌）。其中，口腔鳞癌最为常见。但是，由于早诊率偏低，过半口腔癌患者在就诊时已处在中晚期阶段。从长期治疗过程来看，口腔癌患者也存在局部复发和远处转移的可能。
3、总的来说，口腔癌的治疗模式复杂，无法依靠单一学科完全解决，其基本治疗原则是以手术为主的综合治疗，其他辅助方案包括放疗、化疗、靶向治疗和免疫治疗等。然而，目前对于口腔癌治疗方案的选择，大多依靠临床医生的经验或参考指南，缺乏更加精准、针对个体化差异的用药指导建议。因此，亟待在体外开发一种能够充分代表患者原始肿瘤组织生物学特征的拟人化模型，以促进口腔癌相关基础研究和转化应用的发展。
4、截至目前，已有多个体外肿瘤模型被用于评价或预测口腔癌对药物的敏感性。最为前沿的技术包括患者来源的肿瘤异体移植模型（patient-derived xenografts，pdx）和患者来源的肿瘤类器官模型（patient-derived organoids，pdo）。
5、基于小鼠建立的肿瘤异体移植模型pdx是将患者的肿瘤移植至免疫缺陷的小鼠身上，对活体小鼠进行药敏检测，具有建立简单、成功率
6、类器官pdo模型是近年来最具代表性的体外肿瘤模型。传统类器官将患者细胞分离后进行诱导，并借助基质胶或支架等手段实现3d培养和药敏检测，同时能够一定程度保留来源组织或器官的特定结构和功能，相比细胞系2d培养更贴近细胞生长、互作和应激的真实情况。pdo可以较大程度的保留原始肿瘤组织的遗传学及表观遗传学特性、基因表达谱以及病理特征（80%以上），可一定程度上再现肿瘤细胞的异质性。但是pdo主要包含上皮细胞，不适合肿瘤与微环境的相互作用研究，在药物敏感性差异的分子机制研究上也存在一定局限性。此外，目前基于基质胶等手段的3d培养，仍然存在初始需求的细胞量大、培养周期较长（1-2个月）、培养成功率总体偏低（60%-80%）、复苏传代损失较大、建立和检测标准不统一、费用较高（需上万元）等问题，不适用于临床紧急用药以及微量样本的情况。
7、鉴于当前pdx和pdo模型存在的局限，亟待开发具有高通量、自动化、一体化特点的全新细胞模型，从而推动临床前有效性及安全性评价、加速新药研发、带动相关产业发展和患者受益。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供用于制备口腔癌微肿瘤模型的专用培养基以及相关的方法产品和应用。
2、ptc：患者来源的类肿瘤细胞簇（patient-derived tumor-like cell clusters），也即微肿瘤模型。
3、ptc可以很好地重现出原肿瘤患者的病理学特征、遗传学特征和细胞组成特征等，具有很高的科学研究价值和临床应用潜力。
4、第一，本专利技术保护一种用于制备口腔癌ptc的组合物，命名为ptc组合物。
5、ptc组合物的组成成分及其配比如下：
6、人egf 10×103-100×103ng、人bfgf 10×103-50×103ng、人hgf 5×103-25×103ng、人fgf-10 5×103-25×103ng、人wnt-3a 200×103-300×103ng、人noggin 100×103-200×103ng、人rspo1 250×103-500×103ng、人il-2 10×103-100×103ng、人il-15 10×103-100×103ng、chir-99021 1.5-6μmol、sb 202190 5-10μmol、a 83-01 0.25-1.25μmol、n-乙酰基-l-半胱氨酸0.5-2mmol、烟酰胺5-10mmol、y-27632 5-20μmol、人源胃泌素5-20nmol、霍乱毒素0.1-1nmol、l-乳酸1-10nmol、hepes 8-12mmol、甘氨酸0.08-0.12mmol、l-丙氨酸0.08-0.12mmol、l-天冬酰胺0.08-0.12mmol、l-天冬氨酸0.08-0.12mmol、l-谷氨酸0.08-0.12mmol、l-脯氨酸0.08-0.12mmol、l-丝氨酸0.08-0.12mmol、l-丙氨酰-l-谷氨酰胺1.6-2.4mmol、n-2 8-12ml、b2 15-25ml、its-x 8-12ml、青霉素100×103-200×103u、链霉素100×103-200×103μg 、两性霉素b 200×103-250×103ng、primocin 10×103-100×103μg。
7、具体的，ptc组合物的组成成分及其配比如下：
8、人egf 50×103ng、人bfgf 20×103ng、人hgf 20×103ng、人fgf-10 20×103ng、人wnt-3a 200×103ng、人noggin 100×103ng、人rspo1 400×103ng、人il-2 20×103ng、人il-15 20×103ng、chir-99021 3μmol、sb 202190 10μmol、a 83-01 1μmol、n-乙酰基-l-半胱氨酸1mmol、烟酰胺10mmol、y-27632 10μmol、人源胃泌素10nmol、霍乱毒素1nmol、l-乳酸5nmol、hepes 10mmol、甘氨酸0.1mmol、l-丙氨酸0.1mmol、l-天冬酰胺0.1mmol、l-天冬氨酸0.1mmol、l-谷氨酸0.1mmol、l-脯氨酸0.1mmol、l-丝氨酸0.1mmol、l-丙氨酰-l-谷氨酰胺2mmol、n-2 10ml、b-27 20ml、its-x 10ml、青霉素 100×103u、链霉素 100×10本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.用于制备口腔癌PTC的组合物，命名为PTC组合物，其组成成分及其配比如下：
2.用于制备口腔癌PTC的培养基，命名为PTC培养基，其包括权利要求1所述组合物。
3.一种用于制备口腔癌PTC的试剂盒，包括权利要求1所述PTC组合物。
4.一种用于制备口腔癌PTC的试剂盒，包括权利要求2所述PTC培养基。
5.权利要求1所述PTC组合物的应用，为如下（a1）或（a2）：
6.权利要求2所述PTC培养基的应用，为如下（a1）或（a2）：
7.权利要求3或4所述试剂盒的应用，为如下（a1）或（a2）：
8.一种制备口腔癌PTC的方法，包括如下步骤：对口腔癌实体瘤样本进行解离处理，然后获取细胞并用权利要求2所述PTC培养基进行悬浮培养，得到口腔癌PTC。
9.权利要求8所述方法制备得到的口腔癌PTC。
10.一种获取口腔癌肿瘤细胞的方法，包括如下步骤：
【技术特征摘要】
1.用于制备口腔癌ptc的组合物，命名为ptc组合物，其组成成分及其配比如下：
2.用于制备口腔癌ptc的培养基，命名为ptc培养基，其包括权利要求1所述组合物。
3.一种用于制备口腔癌ptc的试剂盒，包括权利要求1所述ptc组合物。
4.一种用于制备口腔癌ptc的试剂盒，包括权利要求2所述ptc培养基。
5.权利要求1所述ptc组合物的应用，为如下（a1）或（a2）：
【专利技术属性】
技术研发人员：张函槊，尹申意，
申请(专利权)人：北京基石生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。