白刺果汁质量控制方法技术

本发明专利技术涉及一种白刺果汁质量控制方法，该方法以总花色苷含量、原花青素含量和总多酚含量的测定作为质量控制指标，采用分光光度法测定白刺果汁中花色苷、原花青素及总多酚，具有所用试剂量少、操作简单方便、灵敏度高、精密度高稳定性好等特点，可以实现对白刺果汁进行保健功能的有效性评价。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种果汁质量控制方法，尤其涉及。技术背景 白刺果汁是以白刺属植物白刺(Nitraria sibirica)的成熟果实去除籽皮后得到 的果汁，有较强的抗氧化性，呈紫红色，无毒，应用于医药、食品及化妆品。白刺果汁中主要含有花色苷类物质、原花青素和总多酚。其中花色苷类物质属酚 类化合物中的类黄酮，具有清除体内自由基、抗氧化、降血脂及防治动脉粥样硬化等作用； 原花青素(Proanthocyanidins或Procyanidins，简称PC，又译原花果汁、前花果汁等)是 植物中广泛存在的一大类天然多酚化合物的总称，具有清除人体自由基、抗氧化、抗致突 变、酶抑制等活性；总多酚具有清除自由基、抗氧化的功能。但是，白刺果汁目前还没有完整的质量控制方法，不利于保证白刺果汁的品质。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种简单、快速、准确的白刺果汁质量控制方 法。为解决上述问题，本专利技术所述的一种，其特征在于该方法 以总花色苷含量、原花青素含量和总多酚含量的测定作为质量控制指标；其中——总花色苷含量的测定方法是⑴制备样品溶液将0. 1 2ml白刺果汁用水 稀释1 1000倍后，取0. 1 50ml，加入盐酸-乙醇溶液中，在15 80°C温度下保温1 36小时后即得；(2)测定样品溶液吸光度值用紫外_可见光分光光度计在波长为450 600nm处测定样品溶液吸光度值；(3)计算样品溶液中总花色苷含量；—原花青素含量的测定方法是①制备对照品溶液将甲醇加入到儿茶素对照 品中，制成每Iml含儿茶素0. Img的溶液后即得；②制备标准曲线分别将0. 0,0. 5、1、1. 5、 2、2. 5ml的对照品溶液用甲醇定容至25ml，即得浓度为0. 01 lmg/ml的标准使用液；③制 备样品溶液在0. 01 IOml白刺果汁中加入甲醇，并用甲醇定容至2 500ml摇勻，即得； ④测定样品溶液中原花青素含量在0. 1 2ml样品溶液中，依次加入1 5ml香草醛甲醇 溶液、0. 5 2. 5ml浓盐酸，混合均勻，室温下显色10 20mim后，在波长为400 600nm处 比色即得；—总多酚含量的测定方法是(a)制备对照品溶液在1 IOmg没食子酸对照 品中加入水，经超声溶解后定容至2 25ml，即得每Iml含没食子酸0. 25g的溶液；(b)制 备标准曲线分别将0. 0,0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5ml的对照品溶液用水定容至50ml，摇勻，即 得；(c)制备样品溶液将0. 01 2. Oml白刺果汁用水溶解，并用水逐级稀释1 400倍， 即得样品溶液；(d)测定样品溶液吸光度值在样品溶液中加福林-酚显色剂，摇勻后加入 碳酸钠溶液，定容至IOml ；以加入福林-酚显色剂和碳酸钠的溶液为空白，用紫外-可见光 分光光度计在波长为300 SOOnm处测定样品溶液吸光度值；(e)计算样品溶液中总多酚含量。所述总花色苷含量的测定方法中的步骤(1)中盐酸的质量浓度为0. 01 5%，乙醇的质量浓度为50 90%。所述原花青素含量的测定方法中的步骤④中香草醛甲醇溶液的质量浓度为4%。所述总多酚含量的测定方法中的步骤(d)中碳酸钠溶液的质量浓度为20%。本专利技术与现有技术相比具有以下优点1、由于本专利技术采用分光光度法测定白刺果汁中花色苷、原花青素及总多酚，而该 法具有所用试剂量少、操作简单方便、灵敏度高、精密度高稳定性好等特点，因此，适宜测定 白刺果汁的花色苷、原花青素及总多酚，从而实现对白刺果汁进行保健功能的有效性评价。2、经对本专利技术进行精密度实验、稳定性实验、回收率实验后，可以看出本专利技术具有 较高的精密度、在8小时内稳定性良好、准确可靠，可以实现对白刺果汁有效地质量控制 (参见表1、表2、表3)。表1 精密度实验(次数η = 5) 表2 稳定性实验(t = 8h) 表3:回收率实验 3、本专利技术简单、快速，易于推广。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术做进一步说明，下述实施例仅用于说明本专利技术，而并非 对本专利技术的限制。实施例1 一种，该方法以总花色苷含量、原花青素含量和 总多酚含量的测定作为质量控制指标。其中——总花色苷含量的测定方法是(1)制备样品溶液取Iml白刺果汁用水稀释100倍后，取Iml至试管中，加入 IOmlO. 盐酸-80%乙醇溶液，在25°C温度下保温24小时后即得。(2)测定样品溶液吸光度值用紫外_可见光分光光度计在波长为540nm处测定 样品溶液吸光度值为0. 05。(3)计算样品溶液中总花色苷含量。总花色苷含量(mg/g) = (AX丽XDF)/b，式中A为吸光度；丽为相对分子量(取 449.2) ；DF为稀释倍数；b为摩尔吸光度(取26900)，得到白刺果汁的总花色苷的含量为 0. 08mg/ml。——原花青素含量的测定原理原花青素是含有儿茶素和表儿茶素单元的聚合 物。原花青素本身无色，在酸性介质中与香草醛反应，可以生产深红色的花青素离子。测定方法是①制备对照品溶液将甲醇加入到儿茶素对照品中，制成每Iml含儿茶素0. Img的 溶液后即得。②制备标准曲线分别将0. 0,0. 5、1、1. 5、2、2. 5ml的对照品溶液置25ml量瓶中， 甲醇定容至25ml，摇勻，即得浓度为0. 01 lmg/ml的标准使用液。以甲醇为空白，在500nm 波长测定吸光度A，以浓度C对吸光度A进行回归，得回归方程为A = 5. 4012C+0. 0014，Γ =0.9997。③制备样品溶液取白刺果汁1ml，置IOOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，静止30 分钟，用时稀释5倍，即得。④测定样品溶液中原花青素含量用锡箔纸将试管包裹严，仅留管口用于加样。取 样品Iml加入试管中，再加3ml的4%香草甲醛溶液混合，然后加入1. 5ml的浓盐酸，彻底混 勻，室温显色15分钟，最后在500nm比色。含量测定结果经计算，白刺果汁原花青素含量为5mg/ml。——总多酚含量的测定方法是(a)制备对照品溶液在1 IOmg没食子酸对照品中加入水，经超声(功率150W， 频率53KHz)溶解后定容至2 25ml，即得每Iml含没食子酸0. 25g的溶液。(b)制备标准曲线分别将0. 0,0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5ml的对照品溶液置于50ml 量瓶中，用水定容至50ml，摇勻，即得。在760nm波长测定吸光度A，以浓度C对吸光度A进 行回归，得回归方程为A = 3. 0940C+0. 0178，Γ = 0.9994。(c)制备样品溶液将0. 5ml白刺 果汁用水溶解，并用水逐级稀释100倍，即得样 品溶液；(d)测定样品溶液吸光度值取样品溶液lml，置IOml量瓶中，加水6ml，加福林-酚显色剂0. 5ml，摇勻，10分钟内加入20%碳酸钠溶液1. 5ml，定容至刻度10ml，摇勻。 以加入福林_酚显色剂和碳酸钠的溶液为空白，用紫外_可见光分光光度计在波长为760nm 处测定样品溶液吸光度值。福林-酚显色剂称取IOg钨酸钠和2. 5g钼酸钠，用70ml蒸馏水溶于250ml回流 瓶中，加入5ml磷酸和IOml浓盐酸，混勻，微沸回流2小时，加入1. 5g硫酸锂、5ml蒸馏水 和3滴溴水，开口沸腾15分钟(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种白刺果汁质量控制方法，其特征在于：该方法以总花色苷含量、原花青素含量和总多酚含量的测定作为质量控制指标；其中－－总花色苷含量的测定方法是：（１）制备样品溶液：将０．１～２ｍｌ白刺果汁用水稀释１～１０００倍后，取０．１～５０ｍｌ，加入盐酸－乙醇溶液中，在１５～８０℃温度下保温１～３６小时后即得；（２）测定样品溶液吸光度值：用紫外－可见光分光光度计在波长为４５０～６００ｎｍ处测定样品溶液吸光度值；（３）计算样品溶液中总花色苷含量；－－原花青素含量的测定方法是：①制备对照品溶液：将甲醇加入到儿茶素对照品中，制成每１ｍｌ含儿茶素０．１ｍｇ的溶液后即得；②制备标准曲线：分别将０．０、０．５、１、１．５、２、２．５ｍｌ的对照品溶液用甲醇定容至２５ｍｌ，即得浓度为０．０１～１ｍｇ／ｍｌ的标准使用液；③制备样品溶液：在０．０１～１０ｍｌ白刺果汁中加入甲醇，并用甲醇定容至２～５００ｍｌ摇匀，即得；④测定样品溶液中原花青素含量：在０．１～２ｍｌ样品溶液中，依次加入１～５ｍｌ香草醛甲醇溶液、０．５～２．５ｍｌ浓盐酸，混合均匀，室温下显色１０～２０ｍｉｍ后，在波长为４００～６００ｎｍ处比色即得；－－总多酚含量的测定方法是：（ａ）制备对照品溶液：在１～１０ｍｇ没食子酸对照品中加入水，经超声溶解后定容至２～２５ｍｌ，即得每１ｍｌ含没食子酸０．２５ｇ的溶液；（ｂ）制备标准曲线：分别将０．０、０．５、１．０、１．５、２．０、２．５ｍｌ的对照品溶液用水定容至５０ｍｌ，摇匀，即得；（ｃ）制备样品溶液：将０．０１～２．０ｍｌ白刺果汁用水溶解，并用水逐级稀释１～４００倍，即得样品溶液；（ｄ）测定样品溶液吸光度值：在样品溶液中加福林－酚显色剂，摇匀后加入碳酸钠溶液，定容至１０ｍｌ；以加入福林－酚显色剂和碳酸钠的溶液为空白，用紫外－可见光分光光度计在波长为３００～８００ｎｍ处测定样品溶液吸光度值；（ｅ）计算样品溶液中总多酚含量。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：邵赟，陶燕铎，陈晨，文怀秀，赵晓辉，梅丽娟，张兴旺，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：63[中国|青海]