【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学，具体涉及一种石蜡包埋样本核酸前处理的试剂和方法，可以在十分钟内完成石蜡包埋样本的核酸提取，用于后续的pcr检测。
技术介绍
1、石蜡包埋样本是实验室中常见的样本保存手段，新鲜的样本经过甲醛或其他固定剂固定后再由石蜡封存，样本经过这种处理后可以在室温下常年保存，通常用于后续的免疫染色、核酸检测等。
2、现有的针对石蜡样本的核酸检测主要是qpcr、pcr-电泳法和pcr-测序法等，这些方法的共性是都需要经过样本的pcr扩增，在扩增前，需要对样本进行核酸纯化和提取。
3、目前有较多的商用提取和纯化试剂盒在售，如何解决石蜡包埋样本核酸纯化难、高度依赖进口、降低费用和缩短时间成为了当下亟待解决的问题。
4、综上可知，现有技术方案使用上显然存在明显缺陷与不便，可以实现核酸提取，但试剂使用涉及有毒的二甲苯且操作繁琐。所以有必要加以改进。
技术实现思路
1、为了解决上述技术的不足，本专利技术阐述了一种新型的石蜡包埋样本核酸前处理的试剂和方法，可以在十分钟内完成石蜡包埋样本的核酸提取，用于后续的pcr检测。本专利技术中的试剂不使用任何有毒性的有机溶剂，也不需要繁琐的操作，更不需要昂贵的专用设备。
2、本专利技术涉及两个具体的技术路线，第一个是石蜡的融化，第二个是样本核酸的释放。
3、1.石蜡的融化
4、实验室中的用于包埋样本的石蜡其熔点通常在65℃以下，因此可以通过加热使其融化。处理温度可以在65℃～9
5、但是，石蜡包埋样本在“固定”步骤中，会有较低概率发生胞嘧啶（c）脱氨基成为尿嘧啶（u），这种变化会导致后续的pcr中引入c>t或g>a的转换，因此在pcr体系中建议加入ung酶以避免这种突变发生。
6、2.样本核酸的释放
7、核酸的释放主要通过细胞的崩解来达到效果，本核酸前处理试剂包含了氢氧化钾（0.5-60mm）、曲拉通(0.1%-2%)、氯化钠（0.05-2mm）,溶剂为tris缓冲液。
8、通过碱和表面活性剂将细胞崩解，释放出来的核酸可在tris缓冲液中长期保存，氯化钠的加入可以使得体系中有较多的一价阳离子，可以中和核酸磷酸骨架的负电荷，使其溶液更加稳定。
9、经过上述的两种处理方法，可以实现石蜡包埋样本的脱蜡-释放-保存的功能。
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1.一种石蜡包埋样本核酸前处理试剂，其特征在于，该核酸前处理试剂包含了氢氧化钾（0.5-60mM）、曲拉通(0.1%-2%)、氯化钠（0.05-2mM）,溶剂为Tris缓冲液。
2.根据权利要求1所述的一种石蜡包埋样本核酸前处理试剂进行待测样本的核酸释放，其特征在于，将待测样本按照相应方法进行操作。
3.根据权利要求2所述的待测样本，其特征在于，待测样本为石蜡包埋样本。
4.根据权利要求2所述的相应方法，其特征在于，在待处理的石蜡包埋样本中加入该石蜡包埋样本核酸前处理试剂，采用金属浴加热或水浴加热的处理方式进行操作。
【技术特征摘要】
1.一种石蜡包埋样本核酸前处理试剂，其特征在于，该核酸前处理试剂包含了氢氧化钾（0.5-60mm）、曲拉通(0.1%-2%)、氯化钠（0.05-2mm）,溶剂为tris缓冲液。
2.根据权利要求1所述的一种石蜡包埋样本核酸前处理试剂进行待测样本的核酸释放，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：王珺飞，李文天，
申请(专利权)人：江苏臻石生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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