【技术实现步骤摘要】
本申请涉及医药化工小核酸单体原料领域，尤其是涉及一种2-tbs尿苷单体合成方法。
技术介绍
1、2-tbs尿苷单体又称5'-o-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-o-[(叔丁基)二甲基硅基]尿苷-3'-(2-氰基乙基-n,n-二异丙基)2-tbs尿苷单体，其作为小核酸原料单体在药物化学研究领域发挥着巨大的潜力，在mrna研究应用领域有着举足轻重的作用；
2、目前常见的合成方案以尿苷始原料，先用dmtrcl保护5'-oh,再通过tbscl进行2'-oh的保护,最后进行磷脂化反应得到目标产物。
3、但是目前上述合成方法会产生多个问题，如：(1)dmtrcl保护5'-oh这一阶段会产生双dmtr保护杂质析晶难以除去，需要柱层析；(2)tbscl进行2'-oh的保护这步没有选择性，得到产物的同时还会得到较多的3'-otbs的异构体，并且难以去除；因此现有工艺不仅工艺繁琐、产生杂质不易去除而且收率也较低。
技术实现思路
1、为了改善现有工艺产生杂质不易去除、工艺繁琐而且收率也较低的问题，本申请提供一种2-tbs尿苷单体合成方法。
2、本申请提供的一种2-tbs尿苷单体合成方法采用如下的技术方案：
3、一种2-tbs尿苷单体合成方法，合成路线如下：
4、
5、在一个具体的可实施方案中，在step1中，将dmf、尿苷以及咪唑进行混合，控温20～25℃再加入1,3二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷并持续搅拌，1～5h后进
6、在一个具体的可实施方案中，所述咪唑与尿苷的摩尔比为3～5:1。
7、在一个具体的可实施方案中，所述1,3二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷与尿苷的摩尔比为1.1～2:1。
8、在一个具体的可实施方案中，在step2中，将dmf、s1以及咪唑进行搅拌，控温20-25℃再加入叔丁基二甲基氯硅烷并持续搅拌，1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再利用甲叔醚萃取，水洗1～3次有机相，溶剂浓缩走后，得到s2。
9、在一个具体的可实施方案中，所述咪唑与s1的摩尔比为3～5:1。
10、在一个具体的可实施方案中，所述叔丁基二甲基氯硅烷与s1的摩尔比为1～2:1。
11、在一个具体的可实施方案中，在step3中，将四氢呋喃和s2进行混合，降温至0～10℃进行搅拌并加入tbaf持续搅拌；1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再加入乙酸乙酯，水萃取分层，有机相水洗1～3次，干燥，在20～25℃浓缩除去溶剂，再采用甲叔醚打浆得到s3。
12、在一个具体的可实施方案中，所述tbaf与s2的摩尔比为1～1.5:1。
13、在一个具体的可实施方案中，在step4中，将s3和吡啶进行混合，再将dmtrcl加入并进行搅拌，搅拌温度为20-25℃，搅拌时间在1～5h；再加入甲基叔丁基醚，水萃取分液，水洗有机相；加入柠檬酸水溶液洗掉吡啶，干燥浓缩，再通过柱层析得到s4。
14、在一个具体的可实施方案中，所述dmtrcl与s3的摩尔比为1～1.3:1。
15、在一个具体的可实施方案中，所述吡啶与s3的体积比为5～20:1。
16、在一个具体的可实施方案中，在step5中，控制无水无氧条件下，将dcm、s4、四氮唑、ctppa进行混合并搅拌，将溶有s4的二氯甲烷溶液缓慢加入，保持温度在20～25℃并持续进行搅拌；1～5h后进行检测，待原料消耗完全；控温在10～20℃将二氯甲烷浓缩去除，加入甲叔醚、dmf以及水，萃取分液，加入dmf和水，进行1～3次洗涤有机相，干燥浓缩，滴加到正庚烷中析晶得到最后产品s5，即2-tbs尿苷单体。
17、在一个具体的可实施方案中，所述四氮唑与s4的摩尔比为1～2:1。
18、在一个具体的可实施方案中，所述ctppa与s4的摩尔比为1～2:1。
19、综上所述，本申请包括以下至少一种有益技术效果：
20、(1)现存的技术无法避免产生3'-otbs杂质，而本专利技术的核心：step3选择性低温脱掉3'-oh与5'-oh的双硅保护，有效避免了3'-otbs杂质的产生；
21、(2)后处理多数采用的萃取，析晶，打浆等简单的方式，易于操作，可以进行放大生产；
22、(3)与现存的技术相比，本专利技术通过全新工艺设计，提高了每一步的收率，降低合成成本。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于,合成路线如下：
2.根据权利要求1所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：在Step1中，将DMF、尿苷以及咪唑进行混合，控温20～25℃再加入1,3二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷并持续搅拌，1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再采用乙酸乙酯萃取，水洗1～3次有机相，溶剂浓缩走后，得到S1。
3.根据权利要求2所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述咪唑与尿苷的摩尔比为3～5:1。
4.根据权利要求2所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述DIPSCl2与尿苷的摩尔比为1.1～2:1。
5.根据权利要求1所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：在Step2中，将DMF、S1以及咪唑进行搅拌，控温20～25℃再加入叔丁基二甲基氯硅烷并持续搅拌，1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再利用甲叔醚萃取，水洗1～3次有机相，溶剂浓缩走后，得到S2。
6.根据权利要求5所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述咪唑与S
7.根据权利要求5所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述叔丁基二甲基氯硅烷与S1的摩尔比为1～2:1。
8.根据权利要求1所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：在Step3中，将四氢呋喃和S2进行混合，降温至0～10℃进行搅拌并加入TBAF持续搅拌；1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再加入乙酸乙酯，水萃取分层，有机相水洗1～3次，干燥，在20～25℃浓缩除去溶剂，再利用甲叔醚打浆得到S3。
9.根据权利要求8所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述TBAF与S2的摩尔比为1～1.5:1。
10.根据权利要求1所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：在Step4中，将S3和吡啶进行混合，再将DMTrCl加入并进行搅拌，搅拌温度为20～25℃，搅拌时间在1～5h；再加入甲基叔丁基醚，水萃取分液，水洗有机相；加入柠檬酸水溶液洗掉吡啶，干燥浓缩，再通过柱层析得到S4。
11.根据权利要求10所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述DMTrCl与S3的摩尔比为1～1.3:1。
12.根据权利要求10所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述吡啶与S3的体积比为5～20:1。
13.根据权利要求1所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：在Step5中，控制无水无氧条件下，将DCM、S4、四氮唑、CTPPA进行混合并搅拌，将溶有S4的二氯甲烷溶液缓慢加入，保持温度在20～25℃并持续进行搅拌；1～5h后进行检测，待原料消耗完全；控温在10～20℃将二氯甲烷浓缩去除，加入甲叔醚、DMF以及水，萃取分液，加入DMF和水，进行1～3次洗涤有机相，干燥浓缩，滴加到正庚烷中析晶得到最后产品S5，即2-TBS尿苷单体。
14.根据权利要求13所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述四氮唑与S4的摩尔比为1～2:1。
15.根据权利要求13所述的一种2-TBS尿苷单体合成方法，其特征在于：所述CTPPA与S4的摩尔比为1～2:1。
...【技术特征摘要】
1.一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于,合成路线如下：
2.根据权利要求1所述的一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于：在step1中，将dmf、尿苷以及咪唑进行混合，控温20～25℃再加入1,3二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷并持续搅拌，1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再采用乙酸乙酯萃取，水洗1～3次有机相，溶剂浓缩走后，得到s1。
3.根据权利要求2所述的一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于：所述咪唑与尿苷的摩尔比为3～5:1。
4.根据权利要求2所述的一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于：所述dipscl2与尿苷的摩尔比为1.1～2:1。
5.根据权利要求1所述的一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于：在step2中，将dmf、s1以及咪唑进行搅拌，控温20～25℃再加入叔丁基二甲基氯硅烷并持续搅拌，1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再利用甲叔醚萃取，水洗1～3次有机相，溶剂浓缩走后，得到s2。
6.根据权利要求5所述的一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于：所述咪唑与s1的摩尔比为3～5:1。
7.根据权利要求5所述的一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于：所述叔丁基二甲基氯硅烷与s1的摩尔比为1～2:1。
8.根据权利要求1所述的一种2-tbs尿苷单体合成方法，其特征在于：在step3中，将四氢呋喃和s2进行混合，降温至0～10℃进行搅拌并加入tbaf持续搅拌；1～5h后进行检测，待原料消耗完全；再加入乙酸乙酯，水萃取分层，有机相水洗1～3次，干燥，在20～25℃浓缩除...
【专利技术属性】
技术研发人员：李鑫，卢江平，陈甫，刘树森，
申请(专利权)人：康羽生命科学技术苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。