System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种铁观音茶渣来源的ACE抑制肽的制备方法及应用技术_技高网
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一种铁观音茶渣来源的ACE抑制肽的制备方法及应用技术

技术编号:40164826 阅读:18 留言:0更新日期:2024-01-26 23:37
本发明专利技术公开了一种来源于铁观音茶渣的ACE抑制肽及其制备方法与应用。所述ACE抑制肽的氨基酸序列为Val‑Pro‑Pro‑Leu‑Gly‑Phe。通过体外ACE抑制活性测定发现,其IC50为0.364±0.349mg/mL。当VPPLGF浓度为200µM时,对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)没有显著毒性;当浓度为100µM时,能刺激HUVECs显著提高一氧化氮(NO)的释放量。本发明专利技术提供的铁观音茶渣ACE抑制肽具有结构简单、安全、活性强的特点,且易于进行生产,有望为制备高血压预防药物提供有效成分,或作为功能食品添加剂供高血压患者使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于ace抑制肽,具体涉及一种来源于铁观音茶渣的ace抑制肽及其制备方法与应用。


技术介绍

1、如今,在饮食习惯、作息规律和精神压力等因素的影响下,高血压越来越普遍。研究表明,高血压影响世界上约25%的成年人口。高血压是一种心血管疾病综合征,常伴有动脉粥样硬化、心肌梗死和中风等其他疾病。目前尽管许多有效的合成ace抑制剂已用于人类高血压的临床治疗,但是这些合成药物在某些程度上具有各种副作用。因此,开发有效和安全的ace抑制剂对于高血压的治疗具有重要的意义。研究表明,食品源的ace抑制剂具有更高的安全性。ace抑制肽主要有动物蛋白和植物蛋白两种来源,其中,植物蛋白的来源更加丰富,成本也更加低廉,分离及纯化相较动物蛋白更加快速、简单、方便。

2、茶渣蛋白是良好的植物蛋白,利用茶渣酶解制备ace抑制肽既能取得良好的生物效能,提升附加值,又能实现资源回收再利用,续航经济发展,提高经济效益。因此,本专利技术以铁观音茶渣为研究对象,对其中的蛋白进行提取并酶解制备ace抑制肽,并经过进一步的分离纯化得到高活性ace抑制肽,结合分子对接、动力学研究和活性测定探究ace抑制肽的构效关系,对ace抑制肽的研究和应用奠定良好的基础。此外,铁观音茶渣降压肽的研究为进一步扩大铁观音茶渣的应用,提高其附加值和经济效益,具有重要的指导意义,同时为茶渣的扩展应用提供思路。


技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题是提供一种铁观音茶渣ace抑制肽及其制备方法与应用,提高铁观音茶渣的附加价值,实现资源的综合利用。

2、为实现上述目的,本专利技术采用如下技术方案:

3、一种来源于铁观音茶渣的ace抑制肽,其氨基酸序列为:val-pro-pro-leu-gly-phe(vpplgf),通过数据库biopep、ncbi、biopepdb、uniprot比对,发现其为新型肽。

4、进一步,上述ace抑制肽来源于铁观音茶渣天然提取或人工合成。

5、一种制备上述铁观音茶渣ace抑制肽的方法,具体操作步骤如下:

6、将粗铁观音茶渣ace抑制肽加入蒸馏水配成浓度为40mg/ml的溶液,将溶液过0.22μm滤膜后,用sephadex g-15凝胶色谱进行分离,以去离子水为洗脱液,流速0.3ml/min,测量洗脱组分在214nm波长处的吸光值;收集具有最佳ace抑制活性的峰,利用反相高效液相色谱rp-hplc进一步分离;rp-hplc的洗脱梯度为0-3min,5%v/v乙腈;3-43min,5%-40%v/v乙腈;43-53min,40%v/v乙腈;流速为2.0ml/min,检测波长214nm,收集洗脱时间为28-29min的洗脱峰,真空冷冻干燥即得所述ace抑制肽。

7、上述一种铁观音茶渣ace抑制肽可用于制备高血压预防药物。

8、上述一种铁观音茶渣ace抑制肽可用于制备降血压保健食品。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种来源于铁观音茶渣的ACE抑制肽,其特征在于:所述ACE抑制肽的氨基酸序列为Val-Pro-Pro-Leu-Gly-Phe。

2.根据权利要求1所述的铁观音茶渣ACE抑制肽,其特征在于:所述ACE抑制肽来源于铁观音茶渣天然提取或人工合成。

3.一种如权利要求1所述的铁观音茶渣ACE抑制肽的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:

4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述碱提酸沉法制备铁观音茶渣粗蛋白,具体方法包括:将铁观音茶渣放入60℃的烘箱中烘10 h,取出去梗,用中药粉碎机将叶片彻底粉碎,过80目的筛网,即可得到茶渣粉;茶渣粉加入NaOH溶液,在水浴锅中水浴震荡提取,于4℃条件下8000 r/min离心20 min,取上清,将茶渣蛋白提取液的pH调至3.0到3.5之间后,酸沉过夜,对酸沉液进行4℃,8000 r/min,离心20 min,取沉淀,冷冻干燥后得到茶渣粗蛋白。

5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述酶解方法包括:铁观音茶渣粗蛋白与蒸馏水按混合,在沸水中热处理10 min,冷却,调节溶液pH至7.0,加入中性蛋白酶,在振荡恒温水浴锅中反应,反应完毕后,样品沸水浴10 min,冷却;加入碱性蛋白酶进行第二步酶解反应,酶解结束后,样品沸水浴 10 min;待溶液冷却到室温后调pH值到7.0,于4℃条件下8000 r/min离心20 min,取上清液冷冻干燥,即得到粗铁观音茶渣ACE抑制肽。

6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述多肽溶液的配置方法为:将粗铁观音茶渣ACE抑制肽溶解于去离子水中,使其浓度为50 mg/mL,于4℃条件下8000 r/min离心10 min,取上清液。

7.权利要求1所述来源于铁观音茶渣的ACE抑制肽在制备高血压预防药物中的应用。

8.权利要求1所述来源于铁观音茶渣的ACE抑制肽在制备降血压保健食品中的应用。

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【技术特征摘要】

1.一种来源于铁观音茶渣的ace抑制肽,其特征在于:所述ace抑制肽的氨基酸序列为val-pro-pro-leu-gly-phe。

2.根据权利要求1所述的铁观音茶渣ace抑制肽,其特征在于:所述ace抑制肽来源于铁观音茶渣天然提取或人工合成。

3.一种如权利要求1所述的铁观音茶渣ace抑制肽的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:

4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述碱提酸沉法制备铁观音茶渣粗蛋白,具体方法包括:将铁观音茶渣放入60℃的烘箱中烘10 h,取出去梗,用中药粉碎机将叶片彻底粉碎,过80目的筛网,即可得到茶渣粉;茶渣粉加入naoh溶液,在水浴锅中水浴震荡提取,于4℃条件下8000 r/min离心20 min,取上清,将茶渣蛋白提取液的ph调至3.0到3.5之间后,酸沉过夜,对酸沉液进行4℃,8000 r/min,离心20 min,取沉淀,冷冻干燥后得到茶渣粗蛋白。

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【专利技术属性】
技术研发人员:洪晶叶淑芳孟春
申请(专利权)人:福州大学
类型:发明
国别省市:

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