【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及可用于负载精油的功能性复合纳米颗粒制备，具体涉及一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒及其制备方法。
技术介绍
1、牛至精油(oeo)是从牛至全草中提取出来的一种淡黄色液体，含有30多种挥发性成分，具有很强的抗氧化和抗菌活性。由于牛至精油的挥发性强，稳定性差，易损失、易氧化而难以储存，同时牛至精油具有刺激性气味，也因此严重限制了其在药物、食品等领域的应用。纳米级载体系统封装和递送生物活性物质能够改善化合物水分散性差、稳定性低、挥发性强等缺点，并且纳米级载体具有制备工艺简单、生物相容性好、载药率高等特点，因此纳米封装技术被认为是解决以上问题的有效方法。
2、基于蛋白质的纳米颗粒不仅具有资源丰富易得、价格合理、良好的生物相容性和生物降解性等优点，而且蛋白质基纳米颗粒制备和装载化合物的过程相对温和，此外蛋白质的两亲性质使它们具有结构多样性，易与小分子化合物、碳水化合物和脂质等发生相互作用。玉米醇溶蛋白不仅具有良好的生物降解性和生物相容性，并且具有独特的自组装特性，这种特性使玉米醇溶蛋白成为开发胶体递送系统的合适材料，可用于封装和递送疏水性生物活性物质。尽管玉米醇溶蛋白纳米颗粒具有作为纳米载体的潜力，但单一的玉米醇溶蛋白纳米颗粒作为疏水性生物活性物质递送载体仍存在一些局限：在其等电点(6.2)附近容易发生聚集；环境稳定性差；具有较强的表面疏水性，导致其在储存过程易发生疏水聚集，从而失去纳米结构。因此，如何提高玉米醇溶蛋白纳米颗粒的稳定性并降低其表面疏水性是将其实际应用于封装和递送载体领域的关键。
3、实验表明槲皮素和玉米醇溶蛋白之间可以发生强烈的共价反应，槲皮素分子结构中具有多个亲水性羟基和疏水性的环结构，羟基是与食物基质中的蛋白质相互作用的主要结构。槲皮素和玉米醇溶蛋白之间的共价作用不仅可以降低玉米醇溶蛋白纳米颗粒的表面疏水性，而且可以提高其稳定性和对牛至精油的包封及负载效率。因此，开发并探究玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒，进一步降低其表面疏水性并提高其在包封和运载精油期间的稳定性，在扩大其递送疏水性生物活性物质方面具有重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，采用碱接枝的方法制备共价复合物，利用反溶剂沉淀法制备纳米颗粒。制备的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒粒径分布均匀，对牛至精油的包封和负载效率高，环境稳定性好，并具有更强的抗氧化性和抑菌性。
2、为实现上述目的，包括以下步骤：
3、(1)称取1g玉米醇溶蛋白和0.2g槲皮素分别溶解于50ml乙醇水溶液，充分搅拌使其完全溶解。
4、(2)将步骤(1)中得到的溶液的ph均调至9.0。
5、(3)将步骤(2)所得的溶液混合，暴露在空气中搅拌，使二者充分反应。
6、(4)将步骤(3)得到混合溶液置于透析袋中，置于4℃透析，每6h更换一次透析液，去除游离的槲皮素。
7、(5)将不同质量的牛至精油滴加到步骤(4)所得到的溶液中，持续搅拌，使其充分溶解。
8、(6)使用分液漏斗将步骤(5)得到的牛至精油/玉米醇溶蛋白-槲皮素溶液逐滴滴加到去离子水中，在转速500rpm下，持续磁力搅拌30min，旋转蒸发除去乙醇，最后，冷冻干燥即得到负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒。
9、本专利技术还包括这样一些特征：
10、步骤(1)中乙醇水溶体积分数为70％，搅拌时间为2h。
11、步骤(2)中使用的naoh为0.1m。
12、步骤(3)中的搅拌时间为24h。
13、步骤(4)中的透析袋的截留分子量为7000da，透析液为70％v/v乙醇水溶液，透析时间为48h。
14、步骤(5)中的牛至精油的质量分别为100mg、200mg、400mg、600mg。
15、本专利技术的有益效果：
16、1.本专利技术使用的玉米醇溶蛋白属于天然生物聚合物，价格低廉，绿色环保。
17、2.本专利技术使用的槲皮素属于多羟基黄酮醇类化合物，可以与玉米醇溶蛋白发生强烈的共价反应，改善其稳定性。
18、3.本专利技术以具有抗菌和抗氧化活性的牛至精油作为疏水性生物活性物质，以玉米醇溶蛋白-槲皮素作为载体，采用了常见的反溶剂沉淀法制备了负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒，材料低廉环保，方法简单易操作，同时还为负载抑菌活性物质提供了理论基础。
19、4.本专利技术制备所得到的复合纳米颗粒对牛至精油的包封率高达70.12％，制备的复合纳米颗粒具有很好的环境稳定性，在28天的储藏时间之内，体系稳定无明显的聚集现象。玉米醇溶蛋白-槲皮素与牛至精油协同增强其抗氧化活性和抑菌活性。
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1.一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中所用的乙醇水溶液，其浓度为70％v/v。
3.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的充分搅拌时间为2h。
4.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)的NaOH浓度为0.1M。
5.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中的透析袋的截留分子量为7000Da，透析液为70％v/v乙醇水溶液，透析时间为48h。
6.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中的牛至精油的质量分别为100mg、200mg、400mg、600m
...【技术特征摘要】
1.一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中所用的乙醇水溶液，其浓度为70％v/v。
3.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共价复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的充分搅拌时间为2h。
4.根据权利要求1所述的一种负载牛至精油的玉米醇溶蛋白-槲皮素共...
【专利技术属性】
技术研发人员：王辉，殷凌宇，孔保华，刘骞，陈倩，孙方达，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：
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