【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及鸡白细胞介素2、17b和26重组乳酸菌免疫制剂的制备和应用。
技术介绍
1、畜禽集约化养殖厂是市场上畜产品的主要来源。随着全球人口增长，对畜禽产品的需求也在逐年增加。全球范围内每年鸡肉的消耗量占所有肉类产品的40％左右，直接经济效益高达数千亿美元。
2、鸡通常在有利于机会性病原体感染的密集环境下饲养。家禽养殖业面临的主要问题是由于疾病导致的生产力下降，必须利用大量资源来维持动物的健康状况。疫苗和抗菌素(特别是抗生素)主要用于控制疾病。传统的灭活疫苗和减毒活疫苗对某些病原菌的灭活效果不够，包括传统的ibv疫苗由于其变异性等。因此，dna疫苗、rna疫苗、多表位疫苗等新型疫苗成为疫苗研究的热点。
3、然而，传统的佐剂并不能显著增强这些新型疫苗的体液免疫和细胞免疫。目前市场上许可的兽用疫苗佐剂最常见的是铝胶佐剂和油乳佐剂。由于氢氧化铝(铝)佐剂的安全性，它们已普遍用于许多兽医和人类疫苗中；但铝胶佐剂几乎不能诱导细胞介导的免疫，特别是细胞毒性t细胞反应，这对于将其用于抗细胞内寄生虫和某些病毒的疫苗而言是一个重大缺陷；此外，铝胶佐剂具有诱导ige介导的免疫反应的趋势，并可能促进ige介导的过敏反应。油乳佐剂的使用受其产生的副作用和不良反应的限制；例如，油乳佐剂cfa会引起注射部位的炎症、溃疡以及发烧和过敏反应。禽肉外观质量对家禽养殖业来说非常重要，铝胶佐剂和油乳佐剂引起的免疫鸡只疫苗注射点的这些不良反应会影响肉的外观品质，也会导致动物不适，不利于动物福利。所以家禽疫苗产业需要有效的佐剂要
技术实现思路
1、本专利技术要求保护鸡白细胞介素2、17b和26重组乳酸菌免疫制剂的制备和应用。
2、第一方面，本专利技术要求保护一种融合蛋白。
3、本专利技术所要求保护的融合蛋白包括鸡白细胞介素2、鸡白细胞介素17b和鸡白细胞介素26。
4、进一步地，所述融合蛋白可为：seq id no.1所示的蛋白质或seq id no.1的第28-432位所示蛋白质或seq id no.1的第28-438位所示蛋白质。
5、第二方面，本专利技术要求保护编码前文第一方面中所述融合蛋白的核酸分子。
6、进一步地，所述核酸分子可为如下任一：
7、(b1)编码区如seq id no.2或seq id no.2的第82-1296位或seq id no.2的第82-1314位所示的dna分子；
8、(b2)在严格条件下与(b1)限定的dna分子杂交且编码所述融合蛋白的dna分子；
9、(b3)与(b1)或(b2)限定的dna分子至少具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且编码所述融合蛋白的dna分子。
10、其中，seq id no.2编码seq id no.1所示蛋白质。seq id no.1的第1-27位氨基酸残基组成信号肽spusp45，第28-149位氨基酸残基组成鸡白细胞介素2，第150-164位氨基酸残基为柔性linker，第165-336位氨基酸残基为鸡白细胞介素17b，第337-351位氨基酸残基为柔性linker，第352-432位氨基酸残基为鸡白细胞介素26，第433-438位氨基酸残基组成6×his标签。
11、第三方面，本专利技术要求保护如下任一生物材料：
12、(c1)含有前文第二方面中所述核酸分子的表达盒；
13、(c2)含有前文第二方面中所述核酸分子的重组载体；
14、(c3)含有前文第二方面中所述核酸分子的转基因细胞系；
15、(c4)含有前文第二方面中所述核酸分子的重组菌；
16、(c5)(c4)中所述重组菌的发酵产物；
17、(c6)(c4)中所述重组菌的菌体总蛋白；
18、(c7)成套蛋白，由鸡白细胞介素2、鸡白细胞介素17b和鸡白细胞介素26组成。
19、进一步地，所述重组菌为能够表达前文第一方面中所述融合蛋白的重组菌，可为重组乳酸菌。
20、更进一步地，所述重组乳酸菌为将(c2)中所述重组载体导入到受体乳酸菌后得到的，所述受体乳酸菌为植物乳杆菌。在本专利技术的具体实施方式中，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌nc8。
21、在本专利技术的具体实施方式中，所述重组载体为将pmg36e载体中salⅰ和sphⅰ酶切识别序列中的小片段取代为seq id no.2所示的双链dna分子后得到的重组质粒(命名为pmg36e-chil2/17b/26)。
22、在本专利技术的具体实施方式中，所述重组菌为将所述重组载体(即所述pmg36e-chil2/17b/26)导入植物乳杆菌nc8后得到的重组植物乳杆菌。
23、第四方面，本专利技术要求保护前文第一方面中所述融合蛋白或前文第二方面中所述核酸分子或前文第三方面中所述生物材料在如下任一中的应用：
24、(d1)制备免疫促进剂；
25、(d2)作为免疫促进剂。
26、第五方面，本专利技术要求保护一种用于预防和/或治疗鸡传染性支气管炎的成套产品。
27、本专利技术所要求保护的用于预防和/或治疗鸡传染性支气管炎的成套产品中含有ibv疫苗和免疫促进剂；所述免疫促进剂为前文第一方面中所述融合蛋白或前文第二方面中所述核酸分子或前文第三方面中所述生物材料。
28、第六方面，本专利技术要求保护ibv疫苗和免疫促进剂在制备产品中的应用。所述产品的功能为预防和/或治疗鸡传染性支气管炎；所述免疫促进剂为前文第一方面中所述融合蛋白或前文第二方面中所述核酸分子或前文第三方面中所述生物材料。
29、在前文相关方面中，本专利技术的具体实施方式中，所述ibv疫苗为ibv h120疫苗。
30、在前文相关方面中，所述免疫促进剂的用途具体可为提高动物免疫能力。所述动物为禽类，如鸡。
31、进一步地，所述提高动物免疫能力具体可体现为下述中的至少一种：
32、m1、增强动物免疫细胞活性；
33、m2、抑制鸡传染性支气管炎病毒增殖；
34、m3、提高动物发育和生长增重；
35、m4、促进体液免疫、黏膜免疫和/或细胞免疫；
36、m5、降低鸡传染性支气管炎病毒在动物ibv靶器官中的滴度。
37、在m4中，促进所述体液免疫体现在如下中的全部或部分：促进血清中ibv特异性抗体分泌；促本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种融合蛋白，包括鸡白细胞介素2、鸡白细胞介素17B和鸡白细胞介素26。
2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白为SEQ ID No.1所示的蛋白质或SEQ ID No.1的第28-432位所示蛋白质或SEQ ID No.1的第28-438位所示蛋白质。
3.编码权利要求1或2所述融合蛋白的核酸分子。
4.如权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为如下任一：
5.如下任一生物材料：
6.如权利要求5所述的生物材料，其特征在于：所述重组菌为重组乳酸菌；
7.权利要求1或2所述融合蛋白或权利要求3或4所述核酸分子或权利要求5或6所述生物材料在如下任一中的应用：
8.一种用于预防和/或治疗鸡传染性支气管炎的成套产品，其特征在于：所述成套产品中含有IBV疫苗和免疫促进剂；所述免疫促进剂为权利要求1或2所述融合蛋白或权利要求3或4所述核酸分子或权利要求5或6所述生物材料。
9.IBV疫苗和免疫促进剂在制备产品中的应用；所述产品的功能为预防和/或治疗鸡传染性支气管
10.根据权利要求7-9中任一所述的应用或成套产品，其特征在于：所述IBV疫苗为IBVH120疫苗。
...【技术特征摘要】
1.一种融合蛋白，包括鸡白细胞介素2、鸡白细胞介素17b和鸡白细胞介素26。
2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白为seq id no.1所示的蛋白质或seq id no.1的第28-432位所示蛋白质或seq id no.1的第28-438位所示蛋白质。
3.编码权利要求1或2所述融合蛋白的核酸分子。
4.如权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为如下任一：
5.如下任一生物材料：
6.如权利要求5所述的生物材料，其特征在于：所述重组菌为重组乳酸菌；
7.权利要求1或2所述融合蛋白或权利要求3或...
【专利技术属性】
技术研发人员：高荣，郭绍华，彭俊杰，肖永乐，杨鑫，吕学斌，李江凌，王泽洲，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：
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