本发明专利技术公开了一种军团菌运送增菌培养基，其特征是在军团菌ＢＣＹＥα－基础培养基制备过程中添加了军团菌选择成分：甘氨酸、万古霉素、多粘菌素Ｂ和放线菌酮。其中添加特定优化量的抗生素，既可以用作军团菌分离培养标本的运送，又可使军团菌在运送过程中增殖。有益效果如下：一是提高对非军团菌属及杂菌类的抑制能力，减少杂菌污染，二是降低对军团菌的抑制性，从而提高了对军团菌属分离培养阳性率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种培养基，具体为一种特别适合临床标本中军团菌的分离培养，在标本采集运送过程中减少杂菌污染，但能保持军团菌适当生长，从而提高军团菌的分离培养阳性率的军团菌运送增菌培养基。
技术介绍
据军团菌检测国际标准工S。1173l19981美国疾病预防控制中心(CDC)和我国卫生部卫生行业标准《军团病诊断标准及处理原则》wS—195—200l规定，对军团菌病的诊断，细菌培养是金标准。但对军团菌的分离培养，要求营养丰富的选择性分离培养基，技术难度大1耗时长，阳性率低，经常延误了临床对军团菌病的准确诊断和及时采取有效的治疗措施，而造成军团菌病的病死率增高。其中最主要的是临床标本军团菌分离培养难，在标本采集和运送过程中，由于杂菌生长，军团菌受抑制，而导致军团菌分离培养阳性率偏低的对整个军团菌病的诊断影响巨大。至今，国内外尚无一种可用于军团菌分离培养的运送增菌培养基。
技术实现思路
本专利技术的目的为了克服临床标本军团菌分离培养难，在标本采集和运送过程中，由于杂菌生长，军团菌受抑制，而导致军团菌分离培养阳性率偏低的问题，提供了一种目前国内外尚没有的军团菌运送增菌培养基。该培养基在BCYE o一基础培养基中，通过实验研究，优化组合，添加了适当浓度的选择性抗生素，使军团菌培养的临床标本在运送过程中减少杂菌污染1但保持军团菌适当生长，从而提高军团菌的分离培养阳性率。 本专利技术是这样实现的军团菌运送增菌培养基，既可以用作军团菌分离培养标本的运送，又可使军团菌在运送过程中增殖，其是在军团菌BCYE o一基础液中添加了军团菌选择成分甘氨酸(GlyCine)1万古霉素(VanC0myCin)1多粘菌素B(p。lymiXin B)和放线菌酮(CyCl。heXimide)。 所述的军团菌运送增菌培养基，一基础液中添加了如下重量份的成分 万古霉素o．0005一o．OOl5， 多粘菌素Bo．005一o．012， 放线菌酮o．005一o．012， 甘氨酸2．o一4．o。 所述的军团菌运送增菌培养基，其包括的组份重量份数如下 基础液 酵母粉6一15， ACES6一15， a一酮戊二酸o．5一1．5， 焦磷酸铁o．2一o．3，氨基酸蛋白液甘氨酸L-半胱氨酸白蛋白2. 0 4. 0， 0. 3 0. 7， 0. 05 0. 15，抗生素液万古霉素0. 0005 0. 0015，多粘菌素B 0. 005 0. 012，放线菌酮0. 005 0. 012 ；制备步骤包括如下(1)基础液中的酵母粉、ACES和α _酮戊二酸按上述重量份数称量放置容器中，加 水900 1000份，用KOH将ρΗ值调至6. 85 ；煮沸1分钟，然后在121°C蒸汽中灭菌15min ； 将焦磷酸铁溶于8 12份水中，过滤灭菌；将灭菌后的酵母粉、ACES和α -酮戊二酸溶液 冷却至55°C，加入过滤灭菌的焦磷酸铁溶液混勻；(2)将甘氨酸、L-半胱氨酸、白蛋白按上述重量份数称量放置容器中加入25 35 份水进行溶解，过滤灭菌；(3)将万古霉素、多粘菌素B、放线菌酮按上述重量份数称量放置容器中加入8 12份水中进行溶解，过滤灭菌；(4)将(1)步骤的溶液加入(2)步骤得到的溶液中，所得到的混合液再加入(3)步 骤得到的溶液中混勻。(5)无菌操作分装培养基，5ml/支，2°C _8°C，保存，有效期6个月。本专利技术在包括以酵母粉、ACES (N-2-乙酰氨基_2_氨基乙烷磺酸)缓冲剂、α -酮 戊二酸、可溶性焦磷酸铁以及L-半胱氨酸等军团菌生长所必需的营养成分的基础配方上， 添加选择性甘氨酸(Glycine)以及万古霉素(vancomycin)、多粘菌素B (polymixin B)和 放线菌酮(Cycloheximide)等抗生素，以抑制非军团菌属细菌如革兰阳性球菌、革兰阴性 杆菌和霉菌类生长，使军团菌培养的临床标本在运送过程中减少杂菌污染、但保持军团菌 适当生长，从而提高军团菌的分离培养阳性率。在BCYEa-基础培养基中，添加的万古霉素 (vancomycin)、多粘菌素B(polymixin B)和放线菌酮(Cycloheximide)可抑制非军团菌属 细菌如革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌和霉菌类生长，但对军团菌并不影响其生长繁殖，从而 提高军团菌的分离培养阳性率。总的来说，与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下(1)调整选择性抗生素浓度，提高对非军团菌属及杂菌类的抑制能力，降低对军团 菌种的抑制性，从而提高了对军团菌属分离培养阳性率；(2)采集的临床标本(痰、支气管 抽出物等)直接种人运送增菌培养基在室温(25°C )或保温箱(35°C )中运送，非军团菌属 细菌受抑制，军团菌属可在运送过程中生长，提高军团菌分离培养阳性率，填补了一项军团 菌运送增菌培养基的国内外空白。具体实施例方式以下结合具体实施例对本专利技术军团菌的运送增菌培养基进行详细的说明。实施例1军团菌运送增菌培养基，其包括的组份·t量份类妙口下基础液酵母粉6，ACES6，a-酮戊二酸0. 5，焦磷酸铁 0.2，氨基酸蛋白液甘氨酸2. 0，L-半胱氨酸0. 3，白蛋白0. 05，抗生素液万古霉素0.0005，多粘菌素B0. 005，放线菌酮0. 005。实施例2军团菌运送增菌培养基，其包括的组份量份_女如下基础液酵母粉15，ACES15，a-酮戊二酸1. 5，焦磷酸铁0. 3，氨基酸蛋白液甘氨酸4. 0，L-半胱氨酸0. 7，白蛋白0. 15，抗生素液万古霉素 0.0015，多粘菌素B 0 012，放线菌酮 0.012。实施例3军团菌运送增菌培养基，其包括的组份I■量份 &如下基础液酵母粉 8 12，ACES 8 12，a-酮戊二酸0. 8 1. 2，焦磷酸铁0. 24 0. 28，氨基酸蛋白液甘氨酸2 · 5 3 · 5 jL-半胱氨酸0. 4 0. 6，(3)将万古霉素、多粘菌素B、放线菌酮按上述重量份数称量放置容器中加入10份 水中进行溶解，过滤灭菌；(4)将(1)步骤的溶液加入(2)步骤得到的溶液中，所得到的混合液再加入(3)步 骤得到的溶液中混勻；(5)无菌操作分装培养基，5ml/支，2°C _8°C，保存，有效期6个月。以上所述的过滤灭菌可以是在在121°C蒸汽中灭菌15min。本专利技术军团菌运送增菌培养基在BCYE α-基础培养基中添加了军团菌选择性 成分甘氨酸(Glycine)、万古霉素(vancomycin)、多粘菌素B (polymixinB)和放线菌酮 (Cycloheximide)。本培养基既可以当作军团菌增菌培养基使用，防止培养过程中，其他细 菌的污染，另一方面又可作为军团菌临床标本运送培养基应用，其中添加的抗生素可以抑 制杂菌生长，提高军团菌分离培养阳性率。在军团菌运送增菌培养基中，添加选择性抗生素可抑制非军团菌属细菌如革兰 阳性球菌、革兰阴性杆菌和霉菌类生长，从而提高军团菌分离培养阳性率。其中甘氨酸 (glycine)对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为1280μ g/ml和160 μ g/ml ；对痢疾 杆菌的最低抑菌浓度为640 μ g/ml，对伤寒杆菌的最低抑菌浓度分别为1280 μ g/ml和 640 μ g/ml本文档来自技高网...
【技术保护点】
军团菌运送增菌培养基，其特征在于：在军团基础液中添加了甘氨酸、万古霉素、多粘菌素Ｂ和放线菌酮。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：朱庆义，胡朝晖，赵利伟，王娟，刘洋敏，
申请(专利权)人：广州金域医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。