【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法及其应用。
技术介绍
1、白细胞减少症是指外周血液中白细胞计数持续低于4.0×109/l的一种疾病。临床上常因白细胞减少而继发严重感染、免疫力降低等现象，使得治疗进程被延误，导致临床疗效降低，严重甚至危及生命。根据现有文献报道可知，白细胞减少症引发的主要因素包括放/化疗、药物副作用和外科手术等原因引起，已成为临床上的常见病症，严重影响患者的疾病治疗和愈合。研究本疾病的药物治疗现状和对其进行有效的防治具有重要的现实意义。
2、目前，化学药物、生物制剂和中药是临床上用于治疗白细胞减少症的主要药物。其中，临床上应用较广泛的化学药物以利可君、维生素b4和鲨肝醇等为主；生物制剂主要有粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,g-csf)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,gm-csf)。虽然，化学药物和生物制剂在临床上有确切的疗效，尤其是生物制剂能在短时间内迅速升高白细胞的数量，但它们普遍存在药效持续时间短、价格昂贵、过敏反应强和效果不稳定性的现象。与之相比，中药及中药复方在白细胞减少症的治疗中因副作用小、疗效确切、效果稳定等优势被广泛使用，例如地榆、地榆升白片、芪精升白颗粒、升白汤、驴胶补血颗粒等。然而，中药复方的成分组成复杂，药效物质基础和作用机制不明确，在很大程度上限制了其临床应
3、为了解决上述技术问题，现有技术进行诸多探索，如申请人早前申请的专利号为cn1415328和cn108760945a的中国专利申请公开了一种治疗白细胞减少症的芪胶升白制剂及其制备方法和应用，该芪胶升白胶囊制剂按照重量份配比分别为：大枣225～275份、阿胶225～275份、血人参337～412份、淫羊藿337～412份、苦参225～275份、黄芪735～825份、当归225～275份，通过特定的制备方法制成的芪胶升白制剂能很好地发挥药物的有效作用，并使得红花逍遥制剂具有补血益气的功效，临床上用于治疗气血亏损所引起的头昏眼花、气短乏力、自汗盗汗，对白细胞减少症起到很好的调节作用。而且，专利cn108760945a对芪胶升白胶囊的鉴别方法和含量测定方法进行了公开，所述鉴别方法包括对大枣的薄层鉴别、当归的薄层鉴别、苦参的薄层鉴别、黄芪的薄层鉴别和/或淫羊藿的薄层鉴别，以及苦参碱和/或淫羊藿苷的含量测定。专利号为cn109266773a的中国专利技术专利申请公开了一种芪胶升白胶囊原料药材的dna条形码鉴定方法，公开了包括对大枣、淫羊藿和当归的dna条形码鉴定方法。该专利技术可对芪胶升白胶囊中的原料药材大枣、淫羊藿和当归进行鉴定，能更好地控制该产品的治疗，确保其临床疗效。
4、而目前的文献报道中，已有大量临床研究证实了芪胶升白胶囊(简称qsc)治疗白细胞减少症的作用，尚未见有芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的活性成分的具体分析，也未有相关对其作用机制的研究方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是确定基于网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法及应用，专利技术能从整体角度有效的探究芪胶升白胶囊药效成分和作用机制，适用于“多成分、多靶点、多通路”协同作用药物的研究。
2、本专利技术的技术方案：一种网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，所述方法按照以下步骤进行：
3、(1)芪胶升白胶囊入血原型成分和代谢产物的作用靶标预测：根据所述芪胶升白胶囊中的入血原型成分及代谢产物，作为所述芪胶升白胶囊潜在有效成分，从etcm、herb和targetnet数据库和网络服务器中进行预测和收集，得到预测作用靶标；
4、(2)转录组学、蛋白组学和预测靶标联合分析：使用trrust数据库中的小鼠基因组基因调控数据，构建了受所述芪胶升白胶囊调控的差异基因、差异蛋白和所述步骤(1)中的预测作用靶标的基因调控网络(gr网络)；
5、(3)代谢组学与预测靶标联合分析：借助metaboanalyst、metascape、string平台对差异代谢物和所述步骤(1)中的预测作用靶标进行通路富集分析，得到花生四烯酸代谢的通路富集程度最高；
6、(4)重要靶标挖掘：使用cytoscape软件中的keggscape应用程序来显示花生四烯酸代谢途径的详细网络图，确定所述芪胶升白胶囊对所述花生四烯酸代谢的作用集中在白三烯代谢通路，所述白三烯代谢通路上6个差异代谢物在所述芪胶升白胶囊干预后被反向调节；应用metaboanalyst的“网络分析”模块，以所述6个差异代谢物为研究对象，进一步建立白三烯途径上的差异代谢物-基因-靶标相互作用网络(mg网络)，确定了6个关联度最高的重要靶标；
7、(5)重要活性成分挖掘：根据所述6个重要靶标，通过proteinsplus和autodockvina进行分子对接分析，以结合分≤-8kcal/mol的化合物-蛋白对为筛选标准，确定了13个重要的活性成分。
8、(6)构建“药材-成分-靶点-通路”网络图：以预测得到的重要靶标和活性成分为研究对象，使用trrust、metaboanalyst平台和cytoscape软件构，绘制qsc关键靶点的“药材-成分-靶点-通路”网络图；
9、(7)联合通路富集分析：通过所述基因调控(gr)网络、差异代谢物-基因-靶标相互作用网络(mg网络)，对网络中的富集到的节点以及转录组得到的差异基因进行kegg通路富集分析，得到受白细胞减少症影响的通路；
10、(8)活性成分和靶点验证：通过分子生物学技术验证预测的活性目标化合物和直接效应靶标。
11、前述步骤(1)中，预测方法是通过差异基因、差异蛋白、内源性差异代谢物和网络药理学预测得到芪胶升白胶囊作用靶标。
12、前述步骤(4)中，关联度最高的6个重要靶标为alox5，ltb4r，cysltr1，fos，jun，il-1β。
13、前述步骤(5)中，“药材-成分-靶点-通路”网络图中治疗白细胞减少症的作用的关键物质为13个入血成分。
14、具体的说，前述步骤(5)中，13个入血成分是：3’-methoxy-isoflavone-7-o-glu-xyl,5-methoxy-3-indoleaceate,7-hydroxy chromone,calycosin,daidzein,formononetin,medicarpin,emodin,p-hydroxyc innamate,maackiain,icaritin,senkyunolide i,pinellice acid。
15、前述步骤(7)中，受白细胞减少症影响本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述方法按照以下步骤进行：
2.如权利要求1所述基于网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，预测方法是通过差异基因、差异蛋白、内源性差异代谢物和网络药理学预测得到芪胶升白胶囊作用靶标。
3.如权利要求1所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，关联度最高的6个重要靶标为ALOX5，LTB4R，CYSLTR1，FOS，JUN，IL-1β。
4.如权利要求1所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，“药材-成分-靶点-通路”网络图中治疗白细胞减少症的作用的关键物质为13个入血成分。
5.如权利要求4所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，13个入血成分是：3'-methoxy-isoflavone-7-O-glu-xyl,5-meth
6.如权利要求1所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(7)中，受白细胞减少症影响的通路为MAPK信号通路。
7.如权利要求1所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(8)中，骨髓细胞中的药物直接效应靶标是ALOX5和FOS。
8.如权利要求1所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(8)中，所述活性目标化合物为美迪紫檀素、洋川芎内酯I、毛蕊异黄酮、刺芒柄花素和大黄素。
9.一种芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的作用机制的应用，其特征在于：所述应用是芪胶升白胶囊通过靶向调节白三烯代谢通路和MAPK信号通路，调控骨髓细胞中ALOX5和FOS的表达，并抑制血清中炎症因子IL-34和IL-6的含量，升高免疫和造血支持因子TGF-β1、CXCL12的水平，使小鼠体内的炎症反应被抑制，免疫和造血功能增强，从整体改善白细胞减少症。
...【技术特征摘要】
1.一种网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述方法按照以下步骤进行：
2.如权利要求1所述基于网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，预测方法是通过差异基因、差异蛋白、内源性差异代谢物和网络药理学预测得到芪胶升白胶囊作用靶标。
3.如权利要求1所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，关联度最高的6个重要靶标为alox5，ltb4r，cysltr1，fos，jun，il-1β。
4.如权利要求1所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，“药材-成分-靶点-通路”网络图中治疗白细胞减少症的作用的关键物质为13个入血成分。
5.如权利要求4所述网络药理学模式分析芪胶升白胶囊治疗白细胞减少症的药效成分的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，13个入血成分是：3'-methoxy-isoflavone-7-o-glu-xyl,5-methoxy-3-indoleaceate,7-hydroxyc hromone,calycosin,daidzein,for...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴金华，马迟，毛松，叶雯，葛秋平，栾鑫，张莉君，
申请(专利权)人：贵州汉方药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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