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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域,具体涉及一种用作糖尿病生物标志物和治疗靶点的hcfc1及糖尿病治疗药物。
技术介绍
1、糖尿病是最常见的慢性疾病之一,其发病率随着生活水平的提高和人口老龄化的增长而稳定增长,这代表着医疗服务负担的增加。在大多数国家,糖尿病及其并发症是主要的死亡原因,全球每年有500万人因糖尿病并发症死亡。据预测,从2005年到2050年,65岁以上的糖尿病患者人数将增长4.5倍。2016年起美国老年糖尿病协会和欧洲老年糖尿病工作组织承认了老年糖尿病患者的问题,并对糖尿病管理进行了分级处理。尽管糖尿病的发病率在不断增加,但几十年来,科学家们通过控制患者血糖、血压、脂质水平等危害因素,在减少糖尿病并发症方面取得显著进展,特别是在老年人群中尤为突出,其死亡率总体呈下降趋势。尽管糖尿病相关的研究取得了长足的进步,但对特定分子靶点的发现还不够。此外,耐药性和不良反应与使用降糖药物有关,如二甲双胍,但它们可能会增加胰岛素抵抗以及肝脏问题和乳酸性酸中毒。因此,有必要持续寻找具有高效率和低毒性的t2dm替代药物和天然药物,将其应用于衰老糖尿病的预防和治疗中。
2、随着蛋白质组学研究的深入和高通量测序技术的应用,发现了许多的糖尿病相关的生物标志物与其存在紧密关联。鉴于糖尿病发病因素的多样性,及治疗过程中所呈现出的指标及反应的多样性,当前生物标记物的发现与应用的程度远远不够,需要更多更好的生物标记物来针对性治疗各种诱发因素下的糖尿病。
3、hcfc1蛋白也可被称作宿主细胞因子c1蛋白(host cell fact
技术实现思路
1、针对上述问题,本专利技术提供一种用作糖尿病生物标志物和治疗靶点的hcfc1及糖尿病治疗药物。
2、本专利技术是通过以下技术方案实现的:
3、一种用作糖尿病生物标志物和治疗靶点的hcfc1,所述所述糖尿病的生物标志物和治疗靶点为hcfc1蛋白的氧连糖基化修饰水平,所述hcfc1的氨基酸序列如seq id no.1所示。
4、本专利技术还提供一种糖尿病治疗药物,所述药物以权利要求1所述的hcfc1蛋白的氧连糖基化修饰水平为治疗靶点,所述药物组分中包含浒苔寡糖。
5、作为一种可能的实施方式,进一步,所述浒苔寡糖的制备方法,包括如下步骤:
6、1)将浒苔粉与纯水混合后进行超声波辅助提取;
7、2)提取液经离心后真空抽滤取上清液,上清液经旋蒸浓缩后加入乙醇进行醇沉;
8、3)离心取沉淀进行干燥,接着将其溶于纯水中并加入蛋白酶进行酶解后灭活,接着加入三氯乙酸;
9、4)离心取上清液,使用透析袋透析后收集袋内液体浓缩冻干,得到浒苔多糖;
10、5)将浒苔多糖配置成水溶液,并向溶液中加入浓硫酸进行加热酸解;
11、6)冷却至室温后离心取上清液,加入naoh将溶液调至中性后进行旋蒸浓缩,然后再加入乙醇溶液进行醇沉后离心取上清液,使用透析袋透析后收集袋外溶液浓缩冻干,获得浒苔寡糖。
12、作为一种较优的实施方式,优选的,步骤1)具体为:浒苔粉与纯水以1:40(g/ml)的比例混合,60℃,45khz,200w超声波辅助提取2h;其中,所述浒苔粉粒度为80目。
13、作为一种较优的实施方式,优选的,步骤2)具体为:5000 -6000rpm离心10-15min后真空抽滤取上清液,60-70℃下旋蒸浓缩后加入4-4.5倍体积的90-100%乙醇醇沉8 -12h。
14、作为一种较优的实施方式,优选的,步骤3)具体为:5000-6000rpm离心10-15min后取沉淀置于50-60℃干燥后,以1:100-120(g:ml)的比例将其溶于纯水,在溶液中加入蛋白酶使酶活350-450u/ml,45-50℃温度条件下酶解2-3h,接着在95-100℃下水浴10-20min灭酶活后,加入溶液体积1/3的3%三氯乙酸。
15、作为一种较优的实施方式,优选的,步骤4)具体为:5000-6000rpm离心10-15min取上清液,以分子量大小为15kda的透析袋透析48-60h后收集袋内液体浓缩冻干得浒苔多糖。
16、作为一种较优的实施方式,优选的,步骤5)具体为:取浒苔多糖按料液比1:100-120(g/ml)溶于纯水,每升溶液加入2.5-3ml浓硫酸,于95-100℃水浴酸解1.5-2h,
17、作为一种较优的实施方式,优选的,步骤6)具体为:冷却至室温后,5000-6000rpm离心10-15min取上清液,加0.5-2mol/l naoh将溶液调至中性,60-70℃旋蒸浓缩后,按1:1的体积比加入95%乙醇溶液醇沉8-12h后,5000-6000rpm离心10-15min,取上清液于3kda透析袋在超纯水中进行透析36-48h,收集袋外溶液旋蒸浓缩冻干,获得浒苔寡糖(epo)。
18、专利技术的有益效果在于:
19、本专利技术以hcfc1氧连糖基化水平作为生物标志物,可用于2型糖尿病的快速诊断,并作为临床治疗新的靶点。相比于传统的血糖及糖化血红蛋白检测手段,对该生物标志物的检测能够提供更为精确而直接的参考数据,有助于提高临床诊断的准确度。同时本专利技术提供的治疗糖尿病的浒苔寡糖药物,其制备方法简单,耗费低廉,对糖尿病的治疗效果显著且无副作用。
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1.一种用作糖尿病生物标志物和治疗靶点的HCFC1,其特征在于,所述糖尿病的生物标志物和治疗靶点为HCFC1蛋白的氧连糖基化修饰水平,所述HCFC1的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一种糖尿病治疗药物,其特征在于,所述药物以权利要求1所述的HCFC1蛋白的氧连糖基化修饰水平为治疗靶点,所述药物组分中包含浒苔寡糖。
3.根据权利要求2所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,所述浒苔寡糖的制备方法,包括如下步骤:
4.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤1)具体为:浒苔粉与纯水以1:40(g/mL)的比例混合,60℃,45kHz,200W超声波辅助提取2h;其中,所述浒苔粉粒度为80目。
5.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤2)具体为:5000-6000rpm离心10-15min后真空抽滤取上清液,60-70℃下旋蒸浓缩后加入4-4.5倍体积的90-100%乙醇醇沉8-12h。
6.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤3)具体为:5000-6000rpm离心10-15
7.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤4)具体为:5000-6000rpm离心10-15min取上清液,以分子量大小为15kDa的透析袋透析48-60h后收集袋内液体浓缩冻干得浒苔多糖。
8.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤5)具体为:取浒苔多糖按料液比1:100-120(g/ml)溶于纯水,每升溶液加入2.5-3ml浓硫酸,于95-100℃水浴酸解1.5-2h。
9.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤6)具体为:冷却至室温后,5000-6000rpm离心10-15min取上清液,加0.5-2mol/LNaOH将溶液调至中性,60-70℃旋蒸浓缩后,按1:1的体积比加入95%乙醇溶液醇沉8-12h后,5000-6000rpm离心10-15min,取上清液于3kDa透析袋在超纯水中进行透析36-48h,收集袋外溶液旋蒸浓缩冻干,获得浒苔寡糖(EPO)。
...【技术特征摘要】
1.一种用作糖尿病生物标志物和治疗靶点的hcfc1,其特征在于,所述糖尿病的生物标志物和治疗靶点为hcfc1蛋白的氧连糖基化修饰水平,所述hcfc1的氨基酸序列如seq idno.1所示。
2.一种糖尿病治疗药物,其特征在于,所述药物以权利要求1所述的hcfc1蛋白的氧连糖基化修饰水平为治疗靶点,所述药物组分中包含浒苔寡糖。
3.根据权利要求2所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,所述浒苔寡糖的制备方法,包括如下步骤:
4.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤1)具体为:浒苔粉与纯水以1:40(g/ml)的比例混合,60℃,45khz,200w超声波辅助提取2h;其中,所述浒苔粉粒度为80目。
5.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤2)具体为:5000-6000rpm离心10-15min后真空抽滤取上清液,60-70℃下旋蒸浓缩后加入4-4.5倍体积的90-100%乙醇醇沉8-12h。
6.根据权利要求3所述的糖尿病治疗药物,其特征在于,步骤3)具体为:5000-6000rpm离心10-15min后取沉淀置于50-60℃干燥后,以1:100-120(...
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