【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于稻米品质分析，具体涉及一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法。
技术介绍
1、优质食味水稻品种选育及优质食味机理解析是稻米品质遗传改良研究的重点，而稻米食味品质的客观准确评价，是优质食味形成机理研究和优质水稻品种选育的前提。近年来，稻米理化品质及形成的分子机理研究已经取得较大进展，根据大米的食味与直链淀粉含量、糊化温度等理化指标之间的相关性，克隆了一系列影响稻米直链淀粉含量、糊化温度等食味品质相关的基因。但这些理化指标多是对稻米食味品质的间接评价，与稻米食味之间非简单的线性关系，理化指标相同的水稻品种，食味也可能相差较大。
2、总体上，目前对稻米食味品质直接相关的硬度、粘性等遗传研究甚少。究其原因主要有二：一是食味表型鉴定技术相对滞后，稻米食味品质评价传统依靠感官评价，国家标准《gb/t 15682-2008粮油检验稻谷、大米蒸煮食用品质感官评价方法》中，测试品种与参照品种对比，硬度、弹性、粘性等根据好坏程度，以“最好”、“较好”、“稍好”、“与参照样品相同”、“稍不好”、“较不好”、“最不好”共7个等级，分别赋分+3、+2、+1、0、-1、-2、-3。因此，样品的最终得分实际是相对于参照品种的一个参考分值，非实际值。该结果对于遗传研究来说，信息量非常有限，缺乏实用性；二是稻米食味品质是复杂的生物学性状，是多基因调控外加环境因素等综合作用的结果，利用遗传群体开展qtls、gwas关联分析等可能更行之有效，而一个水稻遗传群体少则包含一百到几百份材料，多则上千份到几千份材料，实际情况是由于试
3、因此，本专利技术从适用于水稻遗传群体尤其是f2分离群体食味相关的质构特性研究出发，控制蒸煮用米量，建立一种相对全面、客观、准确的评价稻米食味品质相关的包括硬度、粘性、咀嚼性等在内的质构特性的鉴定方法，为稻米食味品质相关性状的遗传研究奠定基础。
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定的技术方案。本专利技术具体采用以下技术方案实现：
2、一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，包括以下步骤：
3、1)水稻遗传群体材料的种子收获后在室温下保存3个月以上，并平衡水分含量至12±1％；
4、2)将步骤1)的种子脱壳、碾精，制备成国家标准gb1354-2009一等精度的大米备用；
5、3)取步骤2)处理后的大米0.5g磨粉，制得米粉，过100目筛备用；
6、4)将步骤3)制得的米粉，参照行业标准ny/t 2639-2014测定其直链淀粉含量；
7、5)将步骤3)制得的米粉，参照行业标准gb 5009.5-2016测定其蛋白质含量；
8、6)从步骤2)处理后的大米中，挑选长度≥3/4粒长的整精米，称取0.5±0.03g整精米放入事先剪除管盖的2.0ml圆底离心管中，分别记录剪除管盖后的离心管的准确重量a和称取的整精米的准确重量b；
9、7)将步骤6)中的离心管内的米粒进行清洗，清洗完成后用吸水纸将离心管外壁及离心管内壁米粒上方的水吸干；
10、8)向步骤7)清洗过的米粒中加水，加水后用直径5cm的定性中速滤纸，盖住剪除管盖的离心管口，并用橡皮筋将滤纸边缘扎牢固定于离心管外壁；
11、9)将步骤8)的离心管放入24孔2.0ml专用不锈钢离心管架上，然后置入温度25℃、湿度70％的恒温恒湿培养箱中使米样浸泡15min；
12、10)将步骤9)米样浸泡结束的离心管连同管架一起放入蒸锅进行蒸制；
13、11)将步骤10)所得样品取出后放入温度25℃、湿度70％的恒温恒湿培养箱中，其中，2管放置10min，用于新鲜米饭的质构测定，2管放置24h，用于回生米饭的质构测定。
14、进一步地，步骤6)中，重量a和重量b精确至0.1mg，每材料重复4次。
15、进一步地，步骤7)中清洗具体为：用尖嘴洗瓶对着离心管内米粒喷水，用200μl移液器枪头顺时针搅拌2圈、逆时针搅拌2圈，洗掉碾磨加工时残留在米粒表面的糊粉层粉末和浮尘，将洗米水尽可能倾倒干净，重复清洗、倾倒共2次，倾倒过程中用移液器枪头阻挡米粒防止米粒被倒出。
16、进一步地，步骤8)中，加水量根据公式y＝0.024x1+0.037x2+0.574来计算，其中，y，水米比，x1，直链淀粉含量％，干基；x2，蛋白质含量％，干基，使总重量w＝a+yb。
17、进一步地，步骤10)中，蒸制的时间为30min，保温时间为20min。
18、进一步地，步骤11)中所得样品采用整粒无差别取样法，每管米饭样品，不搅拌，用钝头镊子在离心管中由上到下依次取样，破碎断开的米饭粒不取，每次取3颗完整米饭粒，平行置于测试探头下平台上，每管取5次。
19、进一步地，步骤11)中样品的测试条件为：ftc质构仪二次挤压模式，圆柱形探头直径2.5cm、高度3.5cm，力量感应元选用100n，起始力为0.15n，测试速度30mm/min，形变量为60％，弹性恢复时间为2s，每管测定5次，每样品测定2管，所得硬度、粘性、咀嚼性等质构参数去掉1个最小值和1个最大值，取其余8次的平均值作为该样品的最终值。
20、本专利技术缩减了用米量，每样品仅需要2.5g，便可完成新鲜米饭及回生米饭的硬度、粘性、咀嚼性等质构参数的以及直链淀粉含量、蛋白质含量等理化指标测定，对于收获种子量少的遗传群体特别合适；本专利技术通过选用2.0ml离心管作为米饭的蒸制器皿，剪除管盖换用定量中速滤纸封住管口，便于米饭蒸制过程中离心管内外水分的交互平衡，可有效防止冷却后水分凝结于管盖和管壁，滴落至样品中影响测定结果；此外，本专利技术用2.0ml离心管作为蒸制容器，样品量少且内部空间小，便于样品均一；此外，本专利技术中的整粒无差别取样法，可有效规避从大量蒸煮样品取样时由于蒸煮时米饭内外层本身不均匀因取样位置不同而引起的结果差异。
21、综上，本专利技术的有益效果如下：1)所需样品量少，为水稻遗传群体尤其是种子量少的遗传群体的质构表型鉴定提供了可行的方法；2)2.0ml离心管作为煮饭容器，其内部空间小，更利于样品的均一，且从上到下的整粒无差别取样法，规避了大量样品时由于煮饭内外层差异等引起的取样不均匀和取样代表性弱的问题；3)建立了基于质构仪的小样米饭的质构特性的客观评价方法，相对于人工品尝感官评价方法中比较对照样品给出的定性参考分值，能够提供更多的具体数值信息，为稻米食味品质相关质构特性的遗传研究奠定了基础。
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1.一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤6)中，重量A和重量B精确至0.1mg，每材料重复4次。
3.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤7)中清洗具体为：用尖嘴洗瓶对着离心管内米粒喷水，用200μL移液器枪头顺时针搅拌2圈、逆时针搅拌2圈，洗掉碾磨加工时残留在米粒表面的糊粉层粉末和浮尘，将洗米水尽可能倾倒干净，重复清洗、倾倒共2次，倾倒过程中用移液器枪头阻挡米粒防止米粒被倒出。
4.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤8)中，加水量根据公式Y＝0.024X1+0.037X2+0.574来计算，其中，Y，水米比，X1，直链淀粉含量％，干基；X2，蛋白质含量％，干基，使总重量W＝A+YB。
5.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤10)中，蒸制
6.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤11)中所得样品采用整粒无差别取样法，每管米饭样品，不搅拌，用钝头镊子在离心管中由上到下依次取样，破碎断开的米饭粒不取，每次取3颗完整米饭粒，平行置于测试探头下，每管取5次。
7.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤11)中样品的测试条件为：FTC质构仪二次挤压模式，圆柱形探头直径2.5cm、高度3.5cm，力量感应元选用100N，起始力为0.15N，测试速度30mm/min，形变量为60％，弹性恢复时间为2S，每管测定5次，每样品测定2管，所得硬度、粘性、咀嚼性等质构参数去掉1个最小值和1个最大值，取其余8次的平均值作为该样品的最终值。
...【技术特征摘要】
1.一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤6)中，重量a和重量b精确至0.1mg，每材料重复4次。
3.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤7)中清洗具体为：用尖嘴洗瓶对着离心管内米粒喷水，用200μl移液器枪头顺时针搅拌2圈、逆时针搅拌2圈，洗掉碾磨加工时残留在米粒表面的糊粉层粉末和浮尘，将洗米水尽可能倾倒干净，重复清洗、倾倒共2次，倾倒过程中用移液器枪头阻挡米粒防止米粒被倒出。
4.如权利要求1所述的一种适用于水稻遗传群体的小样米饭的质构特性表型鉴定方法，其特征在于步骤8)中，加水量根据公式y＝0.024x1+0.037x2+0.574来计算，其中，y，水米比，x1，直链淀粉含量％，干基；x2，蛋白质含量％，干基，使总重量w＝a+yb。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：焦桂爱，胡培松，唐绍清，王翠丽，魏祥进，胡时开，圣忠华，邵高能，谢黎虹，王玲，陈颖，赵凤利，
申请(专利权)人：中国水稻研究所，
类型：发明
国别省市：
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