System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 副猪格拉瑟菌06257和HbpB串联重组蛋白及用途制造技术_技高网

副猪格拉瑟菌06257和HbpB串联重组蛋白及用途制造技术

技术编号:40092301 阅读:4 留言:0更新日期:2024-01-23 16:24
本发明专利技术提供副猪格拉瑟菌06257和HbpB串联重组蛋白及用途,属于兽用生物制品技术领域。本发明专利技术涉及一种串联表达的副猪格拉瑟菌06257和HbpB的重组蛋白06257‑HbpB。试验结果表明,本发明专利技术中串联表达的重组蛋白06257‑HbpB具有反应原性强、免疫原性强、保护效力强的明显优势和特点,与佐剂混合后制备亚单位疫苗工艺简单,安全性良好,可以有效地抵抗副猪格拉瑟菌的感染,为工业化生产副猪格拉瑟菌病亚单位疫苗奠定基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种副猪格拉瑟菌06257和hbpb串联重组蛋白及其制备的副猪格拉瑟菌病疫苗及应用,属于兽用生物制品。


技术介绍

1、猪副猪格拉瑟菌病是由副猪格拉瑟菌( glaesserellaparasuis, gps)感染引起猪的以多发性纤维素浆膜炎、关节炎和脑膜炎为主要症状的疾病,是世界范围内养猪业的重要细菌性传染病之一。各年龄段的猪都能感染副猪格拉瑟菌,其中断奶仔猪和保育仔猪最易感。副猪格拉瑟菌包括至少15种不同的血清型,世界范围内以血清4型和5型为主。在我国最为流行的血清型是4型、5型、13型、12型和17型等。疫苗免疫接种是预防副猪格拉瑟菌病的有效手段,现在市面上的商业化疫苗主要是菌体灭活疫苗,但由于副猪格拉瑟菌血清型众多,各血清型之间缺乏交叉保护力,灭活疫苗对各种血清型的保护效果参差不齐。当前仍然需要研发血清型覆盖面更广的新型副猪格拉瑟菌病疫苗。

2、06257是副猪格拉瑟菌abc型抗微生物肽转运系统和atp酶的组分,是通过细菌tat途径分泌的一种蛋白,相类蛋白在脑膜炎奈瑟球菌中被认为是最有潜力的保护性抗原。hbpb是副猪格拉瑟菌hxu(haem–haemopexin utilization)摄铁系统的一种血红素结合外膜蛋白,具有吸收血红素和谷胱甘肽等营养物质的功能,是副猪格拉瑟菌的重要致病因子。国内外已有研究报道表明,06257和hbpb均是副猪格拉瑟菌具有发展潜力的重要保护性抗原蛋白,在小鼠和仔猪的免疫保护试验中均表现出了良好的保护效力;其中,以06257蛋白为抗原成分之一的副猪格拉瑟菌病亚单位疫苗已生产上市。但是,重组的hbpb全长片段蛋白表达量较低,重组蛋白06257作为疫苗抗原成分含量较大(抗原蛋白含量≥500μg/2.0ml/头份),这将导致疫苗生产成本较高,因此仍需提高其免疫保护效力,降低其成分含量和疫苗生产成本。


技术实现思路

1、针对上述问题,本专利技术的目的是提供一种具有免疫保护性的副猪格拉瑟菌重组串联表达蛋白,其特征在于是06257和hbpb蛋白的串联蛋白06257-hbpb。所述串联蛋白06257-hbpb的氨基酸序列如seq id no:6所示,编码该蛋白的基因的核苷酸序列如seq id no:5所示。

2、同时,本专利技术提供了一株含有副猪格拉瑟菌06257和hbpb串联表达蛋白的基因工程菌bl21/pet28a-06257-hbpb。

3、进一步的,本专利技术提供了重组串联表达蛋白06257-hbpb在副猪格拉瑟菌病亚单位疫苗中的应用,将串联表达蛋白06257-hbpb和佐剂混合制成疫苗,肌肉免疫仔猪,可以给仔猪提供良好的保护效力。

4、本专利技术中一种串联表达的副猪格拉瑟菌06257和hbpb重组蛋白06257-hbpb制备的亚单位疫苗,具有抗原蛋白可以可溶性形式表达、表达量高、保护效力强的特点,适用于大量生产和市场应用。

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【技术保护点】

1.一种串联表达的副猪格拉瑟菌06257和HbpB重组蛋白,其特征在于:所述重组蛋白为06257-HbpB;所述重组蛋白06257-HbpB的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。

2.表达如权利要求1所述重组蛋白的基因,其特征在于:

3.一种重组表达载体,包含如权利要求2所述的基因。

4.一种工程菌,将权利要求3所述的重组表达载体转化后所得。

5.根据权利要求4所述的工程菌,其特征在于:所述工程菌为BL21/pET28a-06257-HbpB。

6.一种副猪格拉瑟菌病亚单位疫苗,其特征在于:所述的亚单位疫苗是使用权利要求1所述的重组蛋白作为抗原制备的。

7.根据权利要求6所述的亚单位疫苗,其特征在于:所述亚单位疫苗是将所述重组蛋白与佐剂混合后制备所得。

8.根据权利要求6或7所述的亚单位疫苗在制备副猪格拉瑟菌病防控药物中的应用。

【技术特征摘要】

1.一种串联表达的副猪格拉瑟菌06257和hbpb重组蛋白,其特征在于:所述重组蛋白为06257-hbpb;所述重组蛋白06257-hbpb的氨基酸序列如seq id no:6所示。

2.表达如权利要求1所述重组蛋白的基因,其特征在于:

3.一种重组表达载体,包含如权利要求2所述的基因。

4.一种工程菌,将权利要求3所述的重组表达载体转化后所得。

5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵战勤杨金钱史琳琪丁略烜关丽君戚百川丁文文薛云
申请(专利权)人:河南科技大学
类型:发明
国别省市:

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