一种体外重组神经氨酸酶的细胞定位方法技术

本发明专利技术涉及一种体外重组神经氨酸酶的细胞定位方法，该方法利用增强型绿色荧光蛋白基因与神经氨酸酶基因构建融合表达载体ｐｃＤＮＡ３．０／ＥＧＦＰ－ＮＡ，使融合表达载体在ＮＩＨ－３Ｔ３细胞获得表达，然后通过检测融合表达蛋白在细胞水平上的表达位置，建立快速、简捷定位神经氨酸酶的方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种体外重组神经氨酸酶的细胞定位方法，包括以下步骤：　　步骤一：将神经氨酸酶基因的ｃＤＮＡ连接进真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．０，构建ｐｃＤＮＡ－ＮＡ载体，然后再将增强型绿色荧光蛋白基因连接至ｐｃＤＮＡ－ＮＡ载体，构建融合表达载体ｐｃＤＮＡ３．０／ＥＧＦＰ－ＮＡ；　　步骤二：将融合表达载体ｐｃＤＮＡ３．０／ＥＧＦＰ－ＮＡ转染ＮＩＨ－３Ｔ３细胞；　　步骤三：转染细胞培养４８ｈ后，荧光倒置显微镜下观察绿色荧光在细胞水平上的表达位置，确定神经氨酸酶在细胞中亚定位分布。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李碧春，任丽伟，田智泉，徐琪，常国斌，孙敏，王霄燕，陈国宏，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：32