【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物细胞外囊泡，涉及一种具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针及其制备方法和应用。
技术介绍
1、细胞外囊泡(exosome-like nanovesicles，evs)，是由细胞产生的一种40-150nm的生物纳米颗粒，具有磷脂双分子层的膜结构，内含有mrna、蛋白质、核酸等活性物质。evs可在植物、动物和微生物间进行信息的传递。起初，细胞外囊泡被认作是细胞碎片，因此忽略了其价值。如今，人们认为细胞外囊泡是细胞间传递信息、调节细胞生理功能的关键载体。植物evs可以作为植物和病原菌细胞之间信息交流的有效载体，或者参与植物对病原体的防御反应、参与植物细胞壁成分形成，在调节植物免疫方面发挥着重要作用。
2、马齿苋(portulaca oleracea l.)是我国古老的药食两用植物，具有抗菌、抗炎、抗糖尿病、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性作用，但马齿苋源性的evs却很少有人研究。从马齿苋中提取细胞外囊泡是否可行，提取出的马齿苋源性细胞外囊泡是否具有生物活性还未可知。因此，如何提供一种从马齿苋中提取高纯度、高质量的细胞外囊泡的方法，并深入研究提取到的细胞外囊泡的功能，以发掘其在制备化妆品或药品方面的应用潜力，是具有意义的。
3、随着敏感肌肤人群的增加，消费者对于皮肤舒缓功效型产品(例如化妆品或药品)的需求越来越高，影响皮肤刺激的因素包括种族差别、年龄、皮肤健康状态、遗传等内在因素和气候、劣质化妆品等外在因素。皮肤刺激可能造成皮肤干燥、紧绷、发红、瘙痒、脱屑、产生烧灼和刺痛感、或者皮肤屏障受损、神
4、特应性皮炎(atopic dermatitis，ad)是一种慢性、反复发作性的炎症性皮肤病，在任何年龄均可累及，且具有遗传倾向，它以强烈的瘙痒和湿疹样损害为主要特征。大部分患者在婴幼儿期首次发病，由于该病具有慢性、反复性等特点，部分病患可以迁延至成年。患病严重者可影响日常生活，甚至导致睡眠障碍。关于ad的主要发病机制目前尚不明确，可能涉及免疫系统信号失衡、遗传、皮肤功能障碍、心理等因素。目前对于特应性皮炎的治疗主要以局部外用激素药膏、糖皮质激素、口服抗组胺药、生物制剂、紫外线治疗等，但这些治疗方法均有不同程度的缺点，如长期使用激素药膏会产生严重的不良反应，生物制剂价格昂贵等。因此，寻找新的药物和治疗手段显得尤为必要。
5、微针是一种生物活性分子以一定速率透过皮肤经毛细血管吸收进入人体循环的剂型，相较于口服、皮下注射等方式，微针具有患者依从性好、避免首过效应、血液浓度稳定可控、安全性高等特点。其能穿过皮肤角质层，形成导管，生物活性分子通过导管直接扩散到真皮微循环，促进大分子(分子量>500da)、蛋白质和纳米颗粒在体内递送，并且具有微创、无痛、安全、使用方便等优点。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针及其制备方法和应用。本专利技术将马齿苋源性细胞外囊泡载入以马齿苋多糖和透明质酸或其盐为基质的可溶性微针中，制成马齿苋源性细胞外囊泡微针(pop-mns-pelns)。旨在通过微针这一微创递送平台，以无痛的方式安全有效地递送马齿苋源性细胞外囊泡入皮肤中，达到抗炎舒缓的功效。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供一种具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，所述马齿苋源性细胞外囊泡微针的制备原料包括基质材料和负载于基质材料中的马齿苋源性细胞外囊泡；所述基质材料包括马齿苋多糖以及透明质酸或其盐。
4、上述透明质酸或其盐是指透明质酸或透明质酸钠。
5、本专利技术创造性地提取纯化马齿苋衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其具有优异的体内体外抗炎效果，同时将马齿苋细胞外囊泡与微针这一剂型相结合，为制备抗炎舒缓功效的化妆品或药品提供了新的思路。此外，将马齿苋多糖和透明质酸或其盐合用作为微针基质，具有潜在的协同配合作用，马齿苋多糖与马齿苋细胞外囊泡能够共同发挥抗炎作用，同时，透明质酸或其盐和马齿苋多糖混合制备的微针的机械强度更高，物理稳定性更好。试验研究表明该微针产品具有优异的缓解皮肤敏感刺激、抗炎抗敏的作用，可以缓解和治疗特应性皮炎小鼠模型的皮损症状，降低特应性皮炎小鼠模型的脾脏指数，降低皮肤组织中tnf-α、il-4的表达水平。
6、优选地，所述马齿苋源性细胞外囊泡的负载量以蛋白浓度计为0.1-3％，例如0.1％、0.3％、0.5％、0.8％、1％、1.2％、1.5％、2％、2.5％、3％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
7、优选地，所述马齿苋多糖与透明质酸或其盐的质量比为1:1-1:7，例如1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。更优选1:2-1:7。
8、所述马齿苋多糖与透明质酸或其盐的质量比以上述特定的质量配比进行使用时基质溶液状态最好，具有流变性，制备成微针后微针背衬适宜且制备的微针针尖形态更完整，四周未见塌陷；当马齿苋多糖的相对使用量进一步增加会使干燥后的微针针尖出现空泡和断裂等情况，或者基质溶液太粘稠，不具有流变性，使制成的微针背衬较硬且针尖形态不完整；当马齿苋多糖的相对使用量进一步减少会使得产品的抗炎舒缓功效减弱。
9、本专利技术所涉及的马齿苋源性细胞外囊泡可以通过本领域技术人员公知的任何方法制备得到，更优选下述提取方法，该方法得到的马齿苋源性细胞外囊泡纯度更高，具有更优异的抗炎舒缓的效果。
10、优选地，所述马齿苋源性细胞外囊泡的制备方法包括超速离心法或聚乙二醇沉淀法。
11、优选地，所述超速离心法具体包括如下步骤：
12、(1)将马齿苋原料的汁液过滤，滤液进行离心并收集上清液；
13、(2)将上清液过滤后进行超速离心后收集沉淀并重悬，即得；
14、优选地，步骤(1)所述进行离心并收集上清液包括至少三次，离心的速度依次为800-1800g(例如800g、900g、1000g、1200g、1300g、1400g、1500g、1600g、1800g等)、2000-5000g(例如2000g、2500g、3000g、3500g、4000g、4500g、5000g等)、8000-15000g(例如8000g、9000g、10000g、11000g、12000g、13000g、15000g等)，离心的时间依次为5-35min(例如5min、10min、15min、20min、25min、35min等)、5-35min(例如5min、10min、15min、20min、25min、35min等)、40-90min(例如40min、50min、60min、70min、80min、90min等)；上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
15、优本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述马齿苋源性细胞外囊泡微针的制备原料包括基质材料和负载于基质材料中的马齿苋源性细胞外囊泡；所述基质材料包括马齿苋多糖以及透明质酸或其盐。
2.根据权利要求1所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述马齿苋源性细胞外囊泡的负载量以蛋白浓度计为0.1-3％；
3.根据权利要求1所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述马齿苋源性细胞外囊泡的制备方法包括超速离心法或聚乙二醇沉淀法。
4.根据权利要求3所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述超速离心法具体包括如下步骤：
5.根据权利要求3所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述聚乙二醇沉淀法具体包括如下步骤：
6.根据权利要求1所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述马齿苋多糖由包括如下的制备方法制得：
7.根据权利要求6所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征
8.根据权利要求1-7中任一项所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
9.根据权利要求8所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针的制备方法，其特征在于，所述真空环境的真空度为-0.05～-0.1MPa；
10.根据权利要求1-7中任一项所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针在制备化妆品或药品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述马齿苋源性细胞外囊泡微针的制备原料包括基质材料和负载于基质材料中的马齿苋源性细胞外囊泡；所述基质材料包括马齿苋多糖以及透明质酸或其盐。
2.根据权利要求1所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述马齿苋源性细胞外囊泡的负载量以蛋白浓度计为0.1-3％；
3.根据权利要求1所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述马齿苋源性细胞外囊泡的制备方法包括超速离心法或聚乙二醇沉淀法。
4.根据权利要求3所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特征在于，所述超速离心法具体包括如下步骤：
5.根据权利要求3所述的具有抗炎舒缓功效的马齿苋源性细胞外囊泡微针，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：施雁勤，张永太，龙梦，朱跃程，李嘉琪，冯年平，
申请(专利权)人：东方美谷企业集团美创上海科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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