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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及核酸适配体领域,尤其涉及一种结合白细胞介素-31蛋白的核酸适配体的筛选方法。
技术介绍
1、白细胞介素-31(il-31)是il-6细胞因子家族的成员,主要由活化的cd4+t细胞产生,特别是活化的th2细胞。il-31主要作用靶点位于皮肤、肺、肠以及神经系统,在睾丸、骨髓、胸腺、脾脏、肾脏和骨骼肌中也有低水平的表达。研究表明il-31在皮炎、瘙痒、过敏性哮喘等过敏性疾病中发挥重要作用。
2、il-31已被证实在人的各种炎症性疾病中发挥作用,同时也影响着造血作用,细胞的增殖和迁移。因此对il-31的检测在临床具有非常重要的意义。由于核酸适配体能够与il-31结合而被用于il-31的检测,所以人们开设合成能够特异性地与il-31结合的核酸适配体,由于合成核酸适配体的过程中是随机中,一次合成的过程中会生成多条不同的单链(即核酸适配体),所以需要对合成后的核酸适配体进行筛选,选取与il-31结合力强的核酸适配体。
技术实现思路
1、本专利技术针对上述问题,提出了一种结合白细胞介素-31蛋白的核酸适配体的筛选方法。
2、本专利技术采取的技术方案如下:
3、一种结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,包括如下步骤,
4、包被步骤,将不同浓度的白细胞介素-31用碳酸盐包被液稀释;
5、混合步骤,将bsa蛋白用碳酸盐包被液稀释,而后将稀释后的bas蛋白与白细胞介素-31混合,弃去上清,余液用dpbs清洗,得到待结合物;<
...【技术保护点】
1.一种结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,包括如下步骤,
2.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,所述碳酸盐包被液的pH为9.6。
3.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,所述碳酸盐报备液为碳酸钠与碳酸氢钠的混合液。
4.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,孵育时的温度为25℃。
5.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,显色步骤时整个混合物的温度为25℃。
6.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,所述SA-HRP与DPBS混合时二者的体积比为1:25000。
7.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,所述包被步骤中白细胞介素-31的浓度为0ng/mL~4ng/mL。
8.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,用DPBS
...【技术特征摘要】
1.一种结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,包括如下步骤,
2.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,所述碳酸盐包被液的ph为9.6。
3.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,所述碳酸盐报备液为碳酸钠与碳酸氢钠的混合液。
4.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核酸适配体的筛选方法,其特征在于,孵育时的温度为25℃。
5.如权利要求1所述的结合白细胞介素-31的核...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴超超,牛成镇,高强,杨通,
申请(专利权)人:杭州佰辰医学检验所有限公司,
类型:发明
国别省市:
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