表达嗜热子囊菌原变种ｃｈｉｔ－ｔａａ基因的毕赤酵母工程菌株制造技术

本发明专利技术是一种表达嗜热子囊菌原变种（Ｔｈｅｒｍｏａｓｃｕｓ?ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ?ｖａｒ．ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ）热稳定几丁质酶基因ｃｈｉｔ－ｔａａ的毕赤酵母工程菌ＧＳ－ＣＨＩＴ－ＴＡＡ－１７６。通过ＲＴ－ＰＣＲ及ＲＡＣＥ等方法从嗜热子囊菌原变种中获得几丁质酶基因ｃｈｉｔ－ｔａａ，构建表达载体ｐＰＩＣ９Ｋ／ｃｈｉｔ－ｔａａ，并导入毕赤酵母ＧＳ１１５，从中筛选出一种表达几丁质酶的酵母工程菌ＧＳ－ＣＨＩＴ－ＴＡＡ－１７６。该工程菌几丁质酶的酶活性可达２８．９６Ｕ／ｍｇ，在５０℃稳定，６０℃保温６０ｍｉｎ仍有７０．３％的活性，热稳定性高，用于转化环境中的几丁质废料及其它工业领域，具有经济价值和社会价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种表达嗜热子囊菌原变种（Ｔｈｅｒｍｏａｓｃｕｓ　ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ　ｖａｒ．ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ）几丁质酶基因ｃｈｉｔ－ｔａａ的酵母工程菌株，其特征在于该菌为一种毕赤酵母，通过ＲＴ－ＰＣＲ及ＲＡＣＥ等方法从嗜热子囊菌原变种（Ｔｈｅｒｍｏａｓｃｕｓ　ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ　ｖａｒ．ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ）获得热稳定几丁质酶基因ｃｈｉｔ－ｔａａ，将该基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体ｐＰＩＣ９Ｋ，获得表达重组质粒ｐＰＩＣ９Ｋ／ｃｈｉｔ－ｔａａ，转化毕赤酵母ＧＳ１１５，从中筛选出表达热稳定几丁质酶基因ｃｈｉｔ－ｔａａ的毕赤酵母工程菌株ＧＳ－ＣＨＩＴ－ＴＡＡ－１７６。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李多川，张婕，谢晨，郭晓红，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]