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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物,具体涉及gmmpk7蛋白或其相关生物材料在培育耐盐碱植物中的应用。
技术介绍
1、大豆是我国重要的粮食作物之一。黑龙江省是我国最大的大豆主产区,土壤盐碱化严重。我国有盐碱地15亿亩,至少3亿亩为轻度盐碱地。因此,培育耐盐碱大豆品种,提高盐碱地大豆产量,有效利用面积巨大的盐碱地,为扩大大豆种植面积、提高大豆总产提供了一种新的策略。我国野生大豆资源非常丰富,可为耐盐碱大豆培育提供丰富的基因资源。同时,以全基因组选择和基因编辑为代表的分子育种新技术,不断推动传统育种技术改造升级,实现了精准育种。而挖掘野生大豆耐盐碱关键基因,解析耐盐碱分子机制是利用分子育种技术培育耐盐碱大豆新品种的关键。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种与植物耐逆性相关蛋白gmmpk7及其应用。
2、第一方面,本专利技术要求保护与植物耐逆性相关蛋白gmmpk7的新用途。
3、本专利技术要求保护gmmpk7蛋白在如下1)-3)中的应用:
4、1)调控植物耐逆性;
5、2)培育耐逆性提高的转基因植物;
6、3)植物育种;
7、所述gmmpk7蛋白为a1)或a2)或a3)或a4):
8、a1)氨基酸序列是序列3所示的蛋白质;
9、a2)在序列3所示的蛋白质的n端或/和c端连接标签得到的融合蛋白质;
10、a3)将序列3所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的
11、a4)与序列3所示的氨基酸序列具有90%同一性、来源于大豆且与植物耐逆性相关的蛋白质。
12、其中,序列3由368个氨基酸残基组成。
13、上述a2)所述的蛋白质中,所述标签是指利用dna体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述标签可为flag标签、his标签、mbp标签、ha标签、myc标签、gst标签和/或sumo标签等。
14、上述a3)所述的蛋白质中,所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过9个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过8个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过7个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过6个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过5个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过4个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过3个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过2个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或不超过1个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。
15、上述a4)所述的蛋白质中,所述同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性,如ncbi主页网站的blast网页。例如,可在高级blast2.1中,通过使用blastp作为程序,将expect值设置为10,将所有filter设置为off,使用blosum62作为matrix,将gap existence cost,per residue gap cost和lambdaratio分别设置为11,1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算,然后即可获得同一性的值(%)。所述同一性包括与本专利技术的序列3所示的氨基酸序列具有90%或更高,或91%或更高,或92%或更高,或93%或更高,或94%或更高,或95%或更高,或96%或更高,或97%或更高,或98%或更高,或99%或更高同源性的氨基酸序列。
16、上述a1)或a2)或a3)或a4)所述的蛋白质可人工合成,也可先合成其编码基因,再进行生物表达得到。
17、第二方面,本专利技术要求保护与gmmpk7蛋白相关的生物材料的新用途。
18、本专利技术要求保护与gmmpk7蛋白相关的生物材料在如下1)-3)中的应用:
19、1)调控植物耐逆性;
20、2)培育耐逆性提高的转基因植物;
21、3)植物育种。
22、所述生物材料为下述a1)至a8)中的任一种:
23、a1)编码gmmpk7蛋白的核酸分子;
24、a2)含有a1)所述核酸分子的表达盒;
25、a3)含有a1)所述核酸分子的重组载体;
26、a4)含有a2)所述表达盒的重组载体;
27、a5)含有a1)所述核酸分子的重组微生物;
28、a6)含有a2)所述表达盒的重组微生物;
29、a7)含有a3)所述重组载体的重组微生物;
30、a8)含有a4)所述重组载体的重组微生物。
31、上述应用中,a1)所述核酸分子为如下b1)或b2)或b3)所示的基因:
32、b1)序列1所示的基因组dna分子;
33、b2)序列2所示的cdna分子;
34、b3)与b1)或b2)限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性,且编码上述gmmpk7蛋白的cdna分子或基因组dna分子。
35、其中,所述核酸分子可以是dna,如cdna、基因组dna或重组dna;所述核酸分子也可以是rna,如mrna或hnrna等。
36、本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法,例如定向进化和点突变的方法,对本专利技术的编码上述gmmpk7蛋白的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的,具有编码上述gmmpk7蛋白的核苷酸序列75%或者更高同一性的核苷酸,只要编码上述gmmpk7蛋白且具有相同功能,均是衍生于本专利技术的核苷酸序列并且等同于本专利技术的序列。
37、这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本专利技术的编码序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75%或更高,或85%或更高,或90%或更高,或95%或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件,两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(%)表示,其可以用来评价相关序列之间的同一性。
38、上述75%或75%以上同一性,可为80%、85%、90%或95%以上的同一性。
39、上述应用中,a2)所述的含有编码gmmpk7蛋白的核酸分子的表达盒(gmmpk7基因表达盒)是指能够在宿主细胞中表达gmmpk7蛋白的dna,该dna不但可包括启动gmmpk7转录的启动子,还可包括终止gmmpk7转录的终止子。进一步,所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本专利技术的启动子包括但不限于:组成型启动子;组织、器官和发育特异的启动子及诱导型启动子。合适的转录终止子包括但不限于:农杆菌胭脂碱合成酶终止子(nos终止子)、花椰菜花叶病毒camv 35s终止子、tml终止子、豌豆rbcs e9终止子和胭脂氨酸和章鱼氨酸合酶终本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.GmMPK7蛋白在如下1)-3)中的应用:
2.与GmMPK7蛋白相关的生物材料在如下1)-3)中的应用:
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:A1)所述核酸分子为如下B1)或B2)或B3)所示的基因:
4.根据权利要求1-3任一所述的应用,其特征在于:所述耐逆性为耐盐碱胁迫。
5.一种培育耐逆性提高的转基因植物的方法,包括如下步骤:提高受体植物中GmMPK7蛋白的含量和/或活性,得到转基因植物;所述转基因植物的耐逆性高于所述受体植物;
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述耐逆性为耐盐碱胁迫;
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述提高受体植物中权利要求1中所述GmMPK7蛋白的含量和/或活性的方法为在受体植物中过表达GmMPK7蛋白。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述过表达的方法为将GmMPK7蛋白的编码基因导入受体植物中。
9.根据权利要求5-8任一所述的方法,其特征在于:所述GmMPK7蛋白的编码基因序列如序列2所示。
10.
...【技术特征摘要】
1.gmmpk7蛋白在如下1)-3)中的应用:
2.与gmmpk7蛋白相关的生物材料在如下1)-3)中的应用:
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:a1)所述核酸分子为如下b1)或b2)或b3)所示的基因:
4.根据权利要求1-3任一所述的应用,其特征在于:所述耐逆性为耐盐碱胁迫。
5.一种培育耐逆性提高的转基因植物的方法,包括如下步骤:提高受体植物中gmmpk7蛋白的含量和/或活性,得到转基因植物;所述转基因植物的耐逆性高于所述受体植物;
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙晓丽,才晓溪,孙明哲,李宛鸿,贾博为,沈阳,
申请(专利权)人:黑龙江八一农垦大学,
类型:发明
国别省市:
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